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Microesferas (investigación)

Microesferas superparamagnéticas: Dynabeads monodimensionales ( imagen de microscopio electrónico de barrido )

Las microperlas, también llamadas partículas de Ugelstad [1] [2] [3] en honor al químico noruego , profesor John Ugelstad , quien las inventó en 1977 y patentó el método en 1978, [4] son ​​partículas poliméricas uniformes , típicamente de 0,5 a 500 micrones de diámetro. Las moléculas biorreactivas pueden ser absorbidas o acopladas a su superficie y usarse para separar materiales biológicos como células , proteínas o ácidos nucleicos .

Las microperlas se han utilizado para el aislamiento y manipulación de materiales o moléculas específicos, así como para analizar moléculas sensibles o que se encuentran en baja abundancia, por ejemplo, en entornos miniaturizados y automatizados.

Fondo

Las microperlas se crearon cuando John Ugelstad logró formar perlas de poliestireno de los mismos tamaños esféricos en la Universidad Noruega de Ciencia y Tecnología (NTNU) [5] en 1977. [4] Unos años más tarde, creó microperlas superparamagnéticas ( Dynabeads ), que exhiben propiedades magnéticas cuando se colocan en un campo magnético. Cuando se retiran del campo magnético, no hay magnetismo residual , lo que llevó al desarrollo de la tecnología de separación magnética. No se necesitan otros procesos como centrifugación , filtración , columnas o precipitación .

Las microesferas presentan una gran superficie por volumen. Esto, junto con la uniformidad de tamaño y forma, proporciona una muy buena accesibilidad y una rápida cinética de reacción en fase líquida , así como una unión rápida y eficiente.

La historia de las «partículas de Ugelstad» 1977-2006 (gráficos: NTNU /Mads Nortvedt)

Usar

Las microesferas de polietileno negro pueden tener funcionalidad magnética o conductora y se utilizan en dispositivos electrónicos, protección EMI y técnicas de microscopía. [6] [7]

Las microesferas de polietileno fluorescentes se utilizan habitualmente para realizar pruebas a ciegas en procesos industriales y de laboratorio, con el fin de desarrollar métodos adecuados y minimizar la contaminación cruzada de equipos y materiales. Las microesferas que parecen invisibles a la luz del día se pueden iluminar para mostrar una respuesta fluorescente brillante bajo la luz ultravioleta . [8]

Las microesferas de polietileno coloreadas se utilizan para la visualización del flujo de fluidos para permitir la observación y caracterización del flujo de partículas en un dispositivo o se pueden utilizar como marcadores visibles en microscopía y biotecnología. [9]

Aplicaciones

Las microesferas son la herramienta principal para las separaciones biomagnéticas. Se han desarrollado una variedad de procesos y aplicaciones patentados basados ​​en el uso de microesferas en la investigación académica e industrial. Las microesferas se acoplan previamente con un ligando ; una biomolécula como un anticuerpo , estreptavidina , proteína , antígeno , ADN / ARN u otra molécula. Hay tres pasos involucrados en el proceso de separación magnética:

  1. Unión: las microperlas se unen al objetivo deseado, en relación con la afinidad específica del ligando en la superficie de las perlas.
  2. Lavado: las microesferas se moverán hacia un costado del tubo en respuesta a un campo magnético , junto con el material unido. Esto sucede de manera rápida y eficiente debido al campo magnético y a las partículas de tamaño microscópico. El material no unido y no deseado que queda en la muestra se elimina mediante pipeteo/aspiración. El material unido a las microesferas se lava utilizando los tampones adecuados, aplicando el imán.
  3. Elución: una vez que se aísla y se lava el objetivo unido a las microesferas, se puede liberar en la solución adecuada y en el volumen deseado. Luego, se puede utilizar directamente para cualquier aplicación posterior o se pueden liberar y eliminar las microesferas.

Las microesferas se utilizan para el aislamiento y la expansión celular. Las proteínas y los complejos proteicos se pueden separar; por ejemplo, en protocolos de inmunoprecipitación . Los estudios moleculares y los diagnósticos también se benefician de las microesferas (por ejemplo, inmunoensayo IVD e IVD de ácidos nucleicos ). Cuando las microesferas se combinan con estreptavidina , ofrecen una forma muy eficiente de aislar cualquier molécula biotinilada. Esto se utiliza con frecuencia en estudios de proteínas de unión de ADN / ARN , secuenciación y para preparar plantillas monocatenarias. El análisis de la expresión génica también se beneficia de las microesferas, como el aislamiento de ARNm para el análisis transcripcional.

Las microesferas tienen muchos usos, principalmente en la investigación biomédica y biotecnológica . Las microesferas y la tecnología de separación magnética han permitido el uso de una variedad de métodos innovadores para mejorar la investigación en prevención de enfermedades, medicina y otros campos con el fin de mejorar la condición humana.

Véase también

Referencias

  1. ^ EP 2424901, Modahl, Grete Irene; Fonnum, Geir y Molteberg, Astrid et al., "Partículas poliméricas submicrónicas monodispersas", publicada el 31 de mayo de 2017, asignada a Life Technologies A/S 
  2. ^ Herk, AM van, ed. (2005). Química y tecnología de la polimerización en emulsión . Blackwell Publishing. pág. 23. ISBN 9781405121132.
  3. ^ Andersen, Otto; Andrae, Anders SG; Walnum, Hans Jakob (2010). "Evaluación del ciclo de vida de la electrónica. Matriz de rejilla de bolas de partículas Ugelstad y empaquetado a escala de chip". ResearchGate .
  4. ^ de Rangnes 1997:4–5
  5. ^ En 1977: el Instituto Noruego de Tecnología (NTH). En 1996: el NTH se fusionó con la Universidad Noruega de Ciencia y Tecnología (NTNU).
  6. ^ Ghosh, Sabyasachi; Ganguly, Sayan; Remanan, Sanjay; Mondal, Subhadip; Jana, Subhodeep; Maji, Pradip K.; Singha, Nikhil; Das, Narayan Ch. (1 de junio de 2018). "Espuma de poliuretano ultraligera, resistente al agua y flexible, altamente conductora de la electricidad para materiales superiores de protección contra interferencias electromagnéticas". Revista de ciencia de materiales: materiales en electrónica . 29 (12): 10177–10189. doi :10.1007/s10854-018-9068-2. ISSN  1573-482X. S2CID  139201001.
  7. ^ "Partículas paramagnéticas | Microesferas en línea" . Consultado el 20 de agosto de 2020 .
  8. ^ "Microesferas fluorescentes, micropartículas y polvos esféricos: propiedades y aplicaciones". www.cospheric.com . Consultado el 20 de agosto de 2020 .
  9. ^ "Microesferas de polietileno | Microesferas en línea" . Consultado el 20 de agosto de 2020 .

Enlaces externos