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Bioensayo

Configuración del bioensayo

Un bioensayo es un método analítico para determinar la potencia o el efecto de una sustancia por su efecto sobre animales o plantas vivos ( in vivo ), o sobre células o tejidos vivos ( in vitro ). [1] [2] Un bioensayo puede ser cuantitativo o cuántico, directo o indirecto. [3] Si la respuesta medida es binaria, el ensayo es cuántico; si no, es cuantitativo . [3]

Un bioensayo puede utilizarse para detectar peligros biológicos o para evaluar la calidad de una mezcla. [4] Un bioensayo se utiliza a menudo para controlar la calidad del agua , así como las descargas de aguas residuales y su impacto en el entorno. [5] También se utiliza para evaluar el impacto ambiental y la seguridad de nuevas tecnologías e instalaciones. [ cita requerida ]

Los bioensayos son esenciales en las ciencias farmacéuticas, médicas y agrícolas para el desarrollo y lanzamiento de nuevos medicamentos, vitaminas, etc.

Principio

Un bioensayo es una prueba bioquímica para estimar la potencia de un compuesto de muestra. Por lo general, esta potencia solo se puede medir en relación con un compuesto estándar. [3] [1] Un bioensayo típico implica un estímulo (p. ej., medicamentos) aplicado a un sujeto (p. ej., animales, tejidos, plantas). De este modo, se desencadena y mide la respuesta correspondiente (p. ej., muerte) del sujeto. [6]

Historia

El primer uso de un bioensayo se remonta a finales del siglo XIX, cuando el médico alemán Paul Ehrlich sentó las bases de los bioensayos. [7] Introdujo el concepto de estandarización mediante las reacciones de la materia viva. [7] [6] Su bioensayo sobre la antitoxina diftérica fue el primer bioensayo en recibir reconocimiento. [8] Su uso del bioensayo permitió descubrir que la administración de dosis gradualmente crecientes de difteria en animales estimulaba la producción de antisuero. [9]

Un ejemplo bien conocido de bioensayo es el experimento del "canario en la mina de carbón". [10] Para advertir con antelación de los niveles peligrosos de metano en el aire, los mineros llevaban canarios sensibles al metano a las minas de carbón. Si el canario moría debido a una acumulación de metano, los mineros abandonaban la zona lo antes posible.

Muchos de los primeros ejemplos de bioensayos utilizaban animales para comprobar la carcinogenicidad de las sustancias químicas. [11] En 1915, Yamaigiwa Katsusaburo y Koichi Ichikawa probaron la carcinogenicidad del alquitrán de hulla utilizando la superficie interna de las orejas de conejo. [11]

Desde la década de 1940 hasta la de 1960, los bioensayos en animales se utilizaron principalmente para probar la toxicidad y seguridad de medicamentos, aditivos alimentarios y pesticidas. [11]

A partir de finales de los años 1960 y 1970, la dependencia de los bioensayos aumentó a medida que aumentó la preocupación pública por los riesgos ocupacionales y ambientales. [11]

Clasificaciones

El bioensayo se puede clasificar según cómo se aplica y cómo se registra la respuesta.

Ensayo directo
En un ensayo directo, el estímulo aplicado al sujeto es específico y directamente medible, y se registra la respuesta a ese estímulo. La variable de interés es el estímulo específico requerido para producir una respuesta de interés (por ejemplo, la muerte del sujeto). [6] [12]
Ensayo indirecto
En un ensayo indirecto, el estímulo se fija de antemano y se mide la respuesta en los sujetos. La variable de interés en el experimento es la respuesta a un estímulo de interés fijo. [6] [12]
Respuesta cuantitativa
La medición de la respuesta al estímulo se realiza en una escala continua (por ejemplo, contenido de azúcar en sangre, grado de cambio de color en el medio de crecimiento celular). [12]
Respuesta cuántica
La respuesta es binaria, es una determinación de si ocurre o no un evento (por ejemplo, la muerte del sujeto). [12]

Ejemplos

Procedimiento de prueba de Ames

Un bioensayo clásico es la prueba de Ames . Una cepa de Salmonella que requiere histidina para crecer se coloca en dos placas con un medio de crecimiento que contiene cantidades mínimas de histidina y un poco de extracto de hígado de rata (para imitar el metabolismo hepático). Se agrega un mutágeno sospechoso a una placa. Si la placa con el mutágeno sospechoso produce colonias más visibles, probablemente sea mutagénico: un mutágeno podría hacer que la cepa de la bacteria recupere la capacidad de producir su propia histidina. [13]

La mayoría de las demás formas de pruebas toxicológicas también son bioensayos. Se pueden someter animales o cultivos celulares a una serie de niveles de una toxina sospechosa para determinar si la sustancia provoca cambios nocivos y a qué nivel lo hace. El valor LD50 , una medida común de toxicidad aguda, describe la dosis a la que una sustancia es letal para el 50% de los animales analizados. [14]

La potencia de un fármaco se puede medir mediante un bioensayo. [15]

Bioensayos ambientales

Los bioensayos ambientales son generalmente un estudio de amplio espectro de toxicidad . [16] Se lleva a cabo una evaluación de identificación de toxicidad para determinar cuáles son los tóxicos relevantes . Aunque los bioensayos son beneficiosos para determinar la actividad biológica dentro de un organismo, a menudo pueden requerir mucho tiempo y ser laboriosos. Los factores específicos del organismo pueden dar como resultado datos que no son aplicables a otros en esa especie. Por estas razones, a menudo se emplean otras técnicas biológicas, incluidos los radioinmunoensayos . Véase bioindicador .

Los requisitos de control de la contaminación del agua en los Estados Unidos exigen que algunos vertidores industriales y plantas de tratamiento de aguas residuales municipales realicen bioensayos. Estos procedimientos, denominados pruebas de toxicidad de efluentes completos , incluyen pruebas de toxicidad aguda, así como métodos de prueba crónicos. [5] Los métodos implican la exposición de organismos acuáticos vivos a muestras de aguas residuales durante un período de tiempo específico. [17] [18] Otro ejemplo es el bioensayo ECOTOX, que utiliza la microalga Euglena gracilis para probar la toxicidad de muestras de agua. [19] ( Ver Bioindicador#Microalgas en la calidad del agua )

Véase también

Referencias

  1. ^ ab Hoskins, WM; Craig, R. (1962-01-01). "Usos del bioensayo en entomología". Revista anual de entomología . 7 (1): 437–464. doi :10.1146/annurev.en.07.010162.002253. ISSN  0066-4170. PMID  14449182.
  2. ^ "Guía para la industria: pruebas de potencia para productos de terapia celular y génica". Washington, DC: Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos. Enero de 2011. pág. 7.
  3. ^ abc Laska, EM; Meisner, MJ (1987-04-01). "Métodos estadísticos y aplicaciones del bioensayo". Revisión anual de farmacología y toxicología . 27 (1): 385–397. doi :10.1146/annurev.pa.27.040187.002125. ISSN  0362-1642. PMID  3579242.
  4. ^ Prinsloo, Gerhard; Papadi, Georgia; Hiben, Mebrahtom G.; Haan, Laura de; Luisa, Jochem; Beekmann, Karsten; Vervoort, Jacques; Rietjens, Ivonne MCM (2017). "Bioensayos in vitro para evaluar los efectos beneficiosos y adversos para la salud de los productos botánicos: promesas y peligros". Descubrimiento de fármacos hoy . 22 (8): 1187-1200. doi :10.1016/j.drudis.2017.05.002. PMID  28533190.
  5. ^ ab "Límites de permisos: toxicidad total de efluentes (WET)". Sistema Nacional de Eliminación de Descargas Contaminantes (NPDES) . Washington, DC: Agencia de Protección Ambiental de los Estados Unidos (EPA). 2021-10-11.
  6. ^ abcd Saha, G. M (29 de noviembre de 2002). Diseño y análisis de bioensayos . Calcuta: Instituto de Estadística de la India. págs. 61–76.
  7. ^ ab Van Noordwijk, Jacobus (1989). "Bioensayos en animales completos". Revista de análisis farmacéutico y biomédico . 7 (2): 139–145. doi :10.1016/0731-7085(89)80077-9. PMID  2488614.
  8. ^ Análisis de alimentos y bebidas: técnicas modernas . Charalambous, George, 1922-1994. Orlando: Academic Press. 1984. ISBN 0121691608.OCLC 9682930  .{{cite book}}: Mantenimiento de CS1: otros ( enlace )
  9. ^ Bosch, Fèlix; Rosich, Laia (2008). "Las contribuciones de Paul Ehrlich a la farmacología: un homenaje con motivo del centenario de su Premio Nobel". Farmacología . 82 (3): 171-179. doi :10.1159/000149583. ISSN  0031-7012. PMC 2790789 . PMID  18679046. 
  10. ^ "Investigación ambiental: ¿cómo se utilizan los bioensayos en el mundo real?". ei.cornell.edu . Consultado el 1 de diciembre de 2017 .
  11. ^ abcd Beyer, L. A.; Beck, BD; Lewandowski, TA (1 de abril de 2011). "Perspectiva histórica sobre el uso de bioensayos animales para predecir la carcinogenicidad: evolución en el diseño y reconocimiento de la utilidad". Critical Reviews in Toxicology . 41 (4): 321–338. doi :10.3109/10408444.2010.541222. ISSN  1040-8444. PMID  21438739. S2CID  2269998.
  12. ^ abcd Le, Cap. "Bioensayos directos y estimación de proporciones" (PDF) . Consultado el 15 de junio de 2021 .
  13. ^ Charnley G (2002). "Prueba de Ames". Enciclopedia de Salud Pública . eNotes.com. Archivado desde el original el 4 de febrero de 2009 . Consultado el 2 de mayo de 2014 .
  14. ^ "Dosis letal absoluta (DL100)". Libro de Oro de la IUPAC . Unión Internacional de Química Pura y Aplicada. Archivado desde el original el 2019-07-01 . Consultado el 2019-07-01 .
  15. ^ Qin, X; Yao, W; Shi, X; Liu, L; Huang, F; Ding, Y; Zhou, Y; Yu, L; Jia, C; Li, S; Rao, C; Wang, J (7 de marzo de 2019). "Células sensibles al bioensayo de rhEGF obtenidas mediante el cribado de una biblioteca CRISPR/Cas9". Scientific Reports . 9 (1): 3780. Bibcode :2019NatSR...9.3780Q. doi : 10.1038/s41598-019-40381-4 . PMC 6405917 . PMID  30846752. 
  16. ^ Gavanji S, Bakhtari A, Famurewa AC, Othman EM (enero de 2023). "Actividad citotóxica de medicamentos a base de hierbas evaluada in vitro: una revisión". Química y biodiversidad . 20 (2): 3–27. doi : 10.1002/cbdv.202201098 . PMID  36595710. S2CID  255473013.
  17. ^ Métodos para medir la toxicidad aguda de efluentes y aguas receptoras para organismos marinos y de agua dulce (informe). EPA. Octubre de 2002. EPA-821-R-02-012.
  18. ^ "Métodos de toxicidad de efluentes completos". Métodos analíticos de la Ley de Agua Limpia . EPA. 2020-08-01.
  19. ^ Tahedl, Harald; Hader, Donat-Peter (1999). "Examen rápido de la calidad del agua utilizando el biotest automático ECOTOX basado en el comportamiento del movimiento de un flagelado de agua dulce". Water Research . 33 (2): 426–432. Bibcode :1999WatRe..33..426T. doi :10.1016/s0043-1354(98)00224-3.