El procedimiento de sección congelada es un procedimiento de laboratorio patológico para realizar un análisis microscópico rápido de una muestra. Se utiliza con mayor frecuencia en cirugía oncológica . [1] El nombre técnico de este procedimiento es criosección . El dispositivo microtomo que corta en frío bloques delgados de tejido congelado se llama criotomo . [2]
La calidad de los portaobjetos producidos por sección congelada es de menor calidad que el procesamiento de tejido incluido en parafina fijado con formalina. Si bien en muchos casos se puede realizar el diagnóstico, en muchas condiciones se prefiere el procesamiento de tejido fijo para obtener un diagnóstico más preciso.
La consulta intraoperatoria es el nombre que se le da a toda la intervención realizada por el patólogo , que incluye no sólo la sección congelada sino también la evaluación macroscópica de la muestra, el examen de las preparaciones citológicas tomadas en la muestra (por ejemplo, huellas táctiles) y la toma de alícuotas de la muestra para fines especiales. estudios (por ejemplo, técnicas de patología molecular, citometría de flujo). El informe del patólogo se limita a menudo a un diagnóstico "benigno" o "maligno" y se comunica al cirujano mediante intercomunicador. Cuando se opera una neoplasia maligna previamente confirmada, el objetivo principal del patólogo es informar al cirujano si el margen de resección está libre de cáncer residual o si hay cáncer residual presente en el margen de resección. El método de elaboración se suele realizar con la técnica del pan holgazán . Pero la cirugía de margen controlado ( CCPDMA ) se puede realizar utilizando una variedad de métodos de corte y montaje de tejido, incluida la cirugía de Mohs .
El procedimiento de sección congelada tal como se practica hoy en los laboratorios médicos se basa en la descripción del Dr. Louis B. Wilson en 1905. Wilson desarrolló la técnica a partir de informes anteriores a petición del Dr. William Mayo , cirujano y uno de los fundadores de la Clínica Mayo . 3] Informes anteriores del Dr. Thomas S. Cullen en el Hospital Johns Hopkins en Baltimore también involucraron la sección congelada, pero solo después de la fijación con formalina, y el patólogo Dr. William Welch, también en Hopkins, experimentó con el procedimiento de Cullen pero sin consecuencias clínicas. Por lo tanto, generalmente se atribuye a Wilson el mérito de haber sido verdaderamente pionero en este procedimiento (Gal y Cagle, 2005). [4]
El instrumento clave para la criosección es el criostato , que es esencialmente un microtomo dentro de un congelador. El microtomo se puede comparar con una cortadora de delicatessen muy precisa, capaz de cortar secciones tan finas como 1 micrómetro. El corte histológico habitual se corta de 5 a 10 micrómetros. La muestra quirúrgica se coloca sobre un disco de tejido metálico que luego se fija en un portabrocas y se congela rápidamente a una temperatura de entre –20 y –30 °C. La muestra se coloca en un medio de inclusión similar a un gel, generalmente OCT , que consiste en polietilenglicol y alcohol polivinílico ; Este compuesto se conoce por muchos nombres y cuando se congela tiene la misma densidad que el tejido congelado. A esta temperatura, la mayoría de los tejidos se vuelven duros como piedras. Por lo general, se requiere una temperatura más baja para el tejido rico en grasas o lípidos. Cada tejido tiene una temperatura preferida para su procesamiento. Posteriormente, se corta congelado con la porción del microtomo del criostato, se recoge el corte en un portaobjetos de vidrio y se tiñe (normalmente con hematoxilina y eosina , la tinción H&E ). La preparación de la muestra es mucho más rápida que con la técnica histológica tradicional (alrededor de 10 minutos frente a 16 horas). Sin embargo, la calidad técnica de los tramos es mucho menor. Todo el laboratorio puede ocupar un espacio de menos de 9 pies cuadrados (0,84 m 2 ) y se requiere una ventilación mínima en comparación con un laboratorio de muestras estándar incrustado en cera. [ cita necesaria ]
Pasos de la criotomía:
El uso principal del procedimiento de sección congelada es el examen del tejido mientras se realiza la cirugía. Esto puede deberse a varias razones. En la realización de la cirugía de Mohs , es un método sencillo para el control de márgenes en tiempo real de una pieza quirúrgica. Si un tumor parece haber hecho metástasis , se envía una muestra de la metástasis sospechada para criosección para confirmar su identidad. Esto ayudará al cirujano a decidir si tiene sentido continuar con la operación. Por lo general, la cirugía agresiva se realiza sólo si existe la posibilidad de curar al paciente. Si el tumor ha hecho metástasis, la cirugía generalmente no es curativa y el cirujano elegirá una cirugía más conservadora o ninguna resección. Si se ha resecado un tumor pero no está claro si el margen de resección está libre de tumor, se solicita una consulta intraoperatoria para evaluar la necesidad de realizar una resección adicional para obtener márgenes claros. En un procedimiento de ganglio centinela , un ganglio centinela que contiene tejido tumoral provoca una disección adicional de los ganglios linfáticos, mientras que un ganglio benigno evitará dicho procedimiento. [ cita necesaria ]
Si la cirugía es exploratoria, el examen rápido de una lesión podría ayudar a identificar la posible causa de los síntomas del paciente. Es importante señalar, sin embargo, que el patólogo está muy limitado por la mala calidad técnica de las secciones congeladas. Rara vez se ofrece un diagnóstico final intraoperatoriamente. [ cita necesaria ]
En raras ocasiones, las criosecciones se utilizan para detectar la presencia de sustancias perdidas en la técnica histológica tradicional, por ejemplo lípidos. También se pueden utilizar para detectar algunos antígenos enmascarados por formalina. El criostato está disponible desde un pequeño dispositivo portátil que pesa menos de 80 lb (36 kg) hasta un gran dispositivo estacionario de 500 lb (230 kg) o más. Todo el laboratorio histológico se puede transportar en una caja portátil, lo que hace que la histología por secciones congeladas sea una posible herramienta en la medicina primitiva.
Una revisión sistemática Cochrane publicada en 2016 analizó todos los estudios que informaron la precisión diagnóstica de las secciones congeladas en mujeres sometidas a cirugía por un tumor sospechoso en el ovario. La revisión concluyó que para los tumores que eran claramente benignos o malignos en la sección congelada, la precisión del diagnóstico era buena, como lo confirmó más tarde una biopsia regular. Por el contrario, cuando el diagnóstico de la sección congelada era un tumor límite, sin confirmar ni descartar cáncer, el diagnóstico fue menos preciso. La revisión sugiere que en tales situaciones de incertidumbre, los cirujanos pueden optar por realizar cirugía adicional en este grupo de mujeres en el momento de su cirugía inicial para reducir la necesidad de una segunda operación, ya que en promedio una de cada cinco de estas Posteriormente se descubrió que las mujeres tenían cáncer. [5]
Un ultracriotomo , que es un dispositivo muy similar al critoma, puede cortar bloques ultrafinos de tejido, y ese tejido se puede observar mediante microscopía electrónica de transmisión . El espesor de corte del ultracriótomo es de unas decenas de nanómetros. Las propiedades ultraestructurales se pueden estudiar sin incrustar el tejido, por lo que la conservación molecular es mejor. [6]
