El procedimiento de sección congelada es un procedimiento de laboratorio patológico para realizar un análisis microscópico rápido de una muestra. Se utiliza con mayor frecuencia en cirugía oncológica . [1] El nombre técnico de este procedimiento es criosección . El dispositivo de micrótomo que corta en frío bloques delgados de tejido congelado se llama criotoma . [2]
La calidad de las preparaciones obtenidas mediante cortes congelados es inferior a la del procesamiento de tejido fijado con formalina e incluido en parafina. Si bien en muchos casos se puede realizar un diagnóstico, en muchas situaciones se prefiere el procesamiento de tejido fijado para lograr un diagnóstico más preciso.
La consulta intraoperatoria es el nombre que se le da a toda la intervención del patólogo , que incluye no solo la sección congelada sino también la evaluación macroscópica de la muestra, el examen de las preparaciones citológicas tomadas sobre la muestra (por ejemplo, impresiones táctiles) y la alícuota de la muestra para estudios especiales (por ejemplo, técnicas de patología molecular, citometría de flujo). El informe dado por el patólogo a menudo se limita a un diagnóstico "benigno" o "maligno", y se comunica al cirujano que opera a través del intercomunicador. Cuando se opera sobre una malignidad previamente confirmada, el objetivo principal del patólogo es informar al cirujano si el margen de resección está libre de cáncer residual, o si hay cáncer residual presente en el margen de resección. El método de procesamiento generalmente se realiza con la técnica de panificación . Pero la cirugía controlada por márgenes ( CCPDMA ) se puede realizar utilizando una variedad de métodos de corte y montaje de tejido, incluida la cirugía de Mohs .
El procedimiento de sección congelada que se practica hoy en día en los laboratorios médicos se basa en la descripción del Dr. Louis B. Wilson en 1905. Wilson desarrolló la técnica a partir de informes anteriores a pedido del Dr. William Mayo , cirujano y uno de los fundadores de la Clínica Mayo [3]. Los informes anteriores del Dr. Thomas S. Cullen en el Hospital Johns Hopkins en Baltimore también involucraron la sección congelada, pero solo después de la fijación con formalina, y el patólogo Dr. William Welch, también en Hopkins, experimentó con el procedimiento de Cullen pero sin consecuencias clínicas. Por lo tanto, generalmente se le atribuye a Wilson el verdadero pionero del procedimiento (Gal & Cagle, 2005). [4]
El instrumento clave para la criosección es el criostato , que es esencialmente un micrótomo dentro de un congelador. El micrótomo se puede comparar con una cortadora de "deli" muy precisa, capaz de cortar secciones tan finas como 1 micrómetro. El corte histológico habitual se corta a 5 a 10 micrómetros. La muestra quirúrgica se coloca en un disco de tejido metálico que luego se asegura en un mandril y se congela rápidamente a aproximadamente -20 a -30 °C. La muestra se coloca en un medio de inclusión similar a un gel, generalmente OCT que consiste en polietilenglicol y alcohol polivinílico ; este compuesto se conoce por muchos nombres y cuando se congela tiene la misma densidad que el tejido congelado. A esta temperatura, la mayoría de los tejidos se vuelven duros como una roca. Por lo general, se requiere una temperatura más baja para el tejido rico en grasa o lípidos. Cada tejido tiene una temperatura preferida para su procesamiento. Posteriormente, se corta congelado con la parte del micrótomo del criostato, la sección se recoge en un portaobjetos de vidrio y se tiñe (generalmente con hematoxilina y eosina , la tinción H&E ). La preparación de la muestra es mucho más rápida que con la técnica de histología tradicional (alrededor de 10 minutos frente a 16 horas). Sin embargo, la calidad técnica de las secciones es mucho menor. Todo el laboratorio puede ocupar un espacio de menos de 9 pies cuadrados (0,84 m 2 ) y se requiere una ventilación mínima en comparación con un laboratorio estándar de muestras con cera incorporada. [ cita requerida ]
Pasos de la criotomía:
El principal uso del procedimiento de sección congelada es el examen de tejido mientras se lleva a cabo la cirugía. Esto puede deberse a varias razones. En la realización de la cirugía de Mohs , es un método simple para el control de márgenes en tiempo real de una muestra quirúrgica. Si un tumor parece haber hecho metástasis , se envía una muestra de la metástasis sospechosa para criosección para confirmar su identidad. Esto ayudará al cirujano a decidir si tiene algún sentido continuar con la operación. Por lo general, la cirugía agresiva se realiza solo si existe la posibilidad de curar al paciente. Si el tumor ha hecho metástasis, la cirugía generalmente no es curativa y el cirujano elegirá una cirugía más conservadora o no realizar ninguna resección. Si se ha resecado un tumor pero no está claro si el margen de resección está libre de tumor, se solicita una consulta intraoperatoria para evaluar la necesidad de realizar una resección adicional para márgenes limpios. En un procedimiento de ganglio centinela , un ganglio centinela que contiene tejido tumoral impulsa una disección adicional del ganglio linfático, mientras que un ganglio benigno evitará dicho procedimiento. [ cita requerida ]
Si la cirugía es exploratoria, el examen rápido de una lesión puede ayudar a identificar la posible causa de los síntomas del paciente. Sin embargo, es importante señalar que el patólogo está muy limitado por la mala calidad técnica de las secciones congeladas. Rara vez se ofrece un diagnóstico definitivo durante la operación. [ cita requerida ]
En raras ocasiones, las criosecciones se utilizan para detectar la presencia de sustancias que se pierden en la técnica histológica tradicional, por ejemplo, los lípidos. También se pueden utilizar para detectar algunos antígenos enmascarados por la formalina. El criostato está disponible en un pequeño dispositivo portátil que pesa menos de 80 lb (36 kg) o en un dispositivo estacionario grande de 500 lb (230 kg) o más. Todo el laboratorio histológico se puede transportar en una caja portátil, lo que hace que la histología de secciones congeladas sea una herramienta posible en la medicina primitiva.
Una revisión sistemática Cochrane publicada en 2016 analizó todos los estudios que informaron la precisión diagnóstica de las secciones congeladas en mujeres sometidas a cirugía por un tumor sospechoso en el ovario. La revisión concluyó que para los tumores que eran claramente benignos o malignos en la sección congelada, la precisión del diagnóstico fue buena, como se confirmó más tarde mediante una biopsia regular. Por el contrario, cuando el diagnóstico de la sección congelada fue un tumor limítrofe, que no confirmó ni descartó el cáncer, el diagnóstico fue menos preciso. La revisión sugiere que en tales situaciones de incertidumbre, los cirujanos pueden optar por realizar una cirugía adicional en este grupo de mujeres en el momento de su cirugía inicial para reducir la necesidad de una segunda operación, ya que, en promedio, una de cada cinco de estas mujeres fue diagnosticada posteriormente con cáncer. [5]
Un ultracriotomo , que es un dispositivo muy similar al critomo, puede cortar bloques ultradelgados de tejido, y ese tejido puede observarse mediante microscopía electrónica de transmisión . El espesor de corte del ultracriotomo es de aproximadamente decenas de nanómetros. Las propiedades ultraestructurales se pueden estudiar sin incrustar el tejido, por lo que la conservación molecular es mejor. [6]
