Resistencia al ácido

Propiedad física de ciertas células bacterianas y eucariotas.

Mycobacterium tuberculosis (teñido de rojo) en tejido (azul).

La acidez es una propiedad física de ciertas células bacterianas y eucariotas , así como de algunas estructuras subcelulares , específicamente su resistencia a la decoloración por ácidos durante los procedimientos de tinción de laboratorio . ^{[1] [2]} Una vez teñidos como parte de una muestra, estos organismos pueden resistir los procedimientos de decoloración a base de ácido y/o etanol comunes en muchos protocolos de tinción, de ahí el nombre de ácido resistente . ^[2]

Los mecanismos de la acidez varían según la especie, aunque el ejemplo más conocido se encuentra en el género Mycobacterium , que incluye las especies responsables de la tuberculosis y la lepra . La resistencia al ácido de las micobacterias se debe al alto contenido de ácido micólico de sus paredes celulares , que es responsable del patrón de tinción de mala absorción seguida de una alta retención. Algunas bacterias también pueden ser parcialmente acidorresistentes, como la Nocardia .

Los organismos ácido-alcohol resistentes son difíciles de caracterizar utilizando técnicas microbiológicas estándar, aunque se pueden teñir con tintes concentrados, particularmente cuando el proceso de tinción se combina con calor. Algunas, como las micobacterias , se pueden teñir con la tinción de Gram , pero no captan bien el cristal violeta y, por lo tanto, aparecen de color violeta claro, lo que aún puede dar lugar a una identificación incorrecta de los gramnegativos. ^[3]

La técnica de tinción más común utilizada para identificar bacterias acidorresistentes es la tinción de Ziehl-Neelsen , en la que las especies acidorresistentes se tiñen de color rojo brillante y se destacan claramente sobre un fondo azul. Otro método es el método Kinyoun , en el que las bacterias se tiñen de rojo brillante y destacan claramente sobre un fondo verde. Las micobacterias acidorresistentes también se pueden visualizar mediante microscopía de fluorescencia utilizando colorantes fluorescentes específicos ( tinción de auramina-rodamina , por ejemplo). ^[4] Los huevos del trematodo pulmonar parásito Paragonimus westermani en realidad son destruidos por la tinción, lo que puede dificultar el diagnóstico en pacientes que presentan síntomas similares a los de la tuberculosis. ^{[ cita necesaria ]}

Algunas técnicas de tinción acidorresistente

• Tinte Ziehl-Neelsen (tipos de lejía clásica y modificada) ^[5]
• Tinción de Kinyoun
• Para personas daltónicas (o en entornos donde es difícil detectar bacterias rojas), el azul Victoria se puede sustituir por carbol fucsina y el ácido pícrico se puede usar como contratinción en lugar de azul de metileno , y se puede usar el resto de la técnica Kinyoun. ^[6]
  • Varias técnicas de tinción de esporas bacterianas utilizando Kenyon, por ejemplo
    • El método de Moeller.
    • Método de Dorner ^[7] (decolorante de alcohol ácido) sin la modificación de Schaeffer-Fulton ^[8] (decolorar con agua) ^[9]
    • Método detergente, utilizando Tergitol 7, tensioactivos no iónicos de éter de poliglicol tipo NP-7 ^[10]
• Tinte fite ^[11]
  • Tinción de Fite-Faraco ^{[12] [13]}
  • Tinte Wade Fite ^[14]
• Tinción de Ellis y Zabrowarny ^{[15] [16]} (sin fenol/ácido carbólico)
• Tinción de auramina-rodamina
• Tinción de auramina y fenol

Estructuras acidorresistentes notables

Muy pocas estructuras son acidorresistentes; esto hace que la tinción para determinar la resistencia al ácido sea particularmente útil en el diagnóstico. Los siguientes son ejemplos notables de estructuras que son resistentes al ácido o resistentes al ácido modificadas:

• Todas las micobacterias : M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis y Mycobacterium atípico
• Actinomicetos (especialmente algunos aeróbicos) con ácido micólico en su pared celular (tenga en cuenta que los Streptomyces NO lo tienen); No confundir con Actinomyces , que es un género de actinomicetos no resistentes al ácido.
  • Nocardia (débilmente resistente al ácido; resiste la decoloración con concentraciones de ácido más débiles)
  • rodococo
  • Gordonia (un actinomiceto)
  • Tsukamurella
  • Dietzia
• cabeza de esperma
• Esporas bacterianas, ver Endospora
• Legionella micdadei
• Ciertas inclusiones celulares, por ejemplo.
  • Cuerpos de inclusión citoplasmáticos vistos en
    • Neuronas de la capa 5 de la corteza cerebral lipofuscinosis ceroide neuronal ( enfermedad de Batten ).
  • Cuerpos de inclusión nucleares vistos en
    • Envenenamiento por plomo
    • Intoxicación por bismuto.
• Ooquistes de algunos parásitos coccidios en la materia fecal, como:
  • Criptosporidium parvum , ^[17]
  • Isospora belli ^[18]
  • Cyclospora cayetanensis . ^[19]
• Algunos otros parásitos:
  • Sarcocistis
  • Los huevos de Taenia saginata se tiñen bien, pero los huevos de Taenia solium no (pueden usarse para distinguirlos)
  • Los quistes hidatídicos , especialmente sus " ganchitos ", se tiñen de forma irregular con la tinción ZN, pero emanan fluorescencia roja brillante bajo luz verde y pueden ayudar a la detección en fondos moderadamente densos o con escasos garfios. ^[20]
• Las formas de levadura fúngica se tiñen de manera inconsistente con la tinción ácido-alcohol resistente, que se considera una tinción de espectro estrecho para hongos. ^[21] En un estudio sobre la resistencia al ácido de los hongos, ^[22] el 60% de los blastomices y el 47% de los histoplasmas mostraron tinción citoplasmática positiva de las células similares a las levaduras, y Cryptococcus o Candida no se tiñeron, y se observaron tinciones muy raras. en endosporas de Coccidioides.

Referencias

1. Madison B (2001). "Aplicación de tinciones en microbiología clínica". Histoquímica biotecnológica . 76 (3): 119–25. doi :10.1080/714028138. PMID  11475314.
2. Ryan KJ; Ray CG, eds. (2004). Microbiología médica Sherris (4ª ed.). McGraw-Hill. ISBN 0-8385-8529-9.
3. Reynolds, Jackie; Moyes, Rita B.; Breakwell, Donald P. (noviembre de 2009). "Tinción diferencial de bacterias: tinción acidorresistente". Protocolos actuales en microbiología . Apéndice 3: Apéndice 3H. doi :10.1002/9780471729259.mca03hs15. ISSN  1934-8533. PMID  19885935. S2CID  45685776.
4. Abe C (2003). "[Estandarización de pruebas de laboratorio para tuberculosis y sus pruebas de aptitud]". Kekkaku . 78 (8): 541–51. PMID  14509226.
5. "Ácido resistente / auramina-rodamina". Pathologyoutlines.com .
6. Teoría y práctica de técnicas histológicas, John D Bancroft, 6.a ed., p314
7. Dorner, W. 1926. Un procedimiento simple para la coloración de las esporas. Le Lait 6:8–12.
8. Schaeffer AB, Fulton M (1933). "Un método simplificado para teñir endosporas". Ciencia . 77 (1990): 194. Bibcode : 1933Sci....77..194S. doi :10.1126/ciencia.77.1990.194. PMID  17741261.
9. "Protocolo de tinción de endosporas". 1 de junio de 2012. Archivado desde el original el 1 de junio de 2012 . Consultado el 7 de marzo de 2022 .
10. M. Hayama; K. Oana; T. Kozakai; S. Umeda; J. Fujimoto; H. Ota; Y. Kawakami (2007). «PROPUESTA DE TÉCNICA SIMPLIFICADA PARA TINTAR ESPORAS BACTERIANAS SIN APLICAR CALOR – MODIFICACIÓN EXITOSA DEL MÉTODO DE MOELLER» (PDF) . Revista europea de investigación médica . 12 (8): 356–359. PMID  17933713 . Consultado el 7 de marzo de 2022 .
11. "Manchas - Fite". manchasfile.info . Archivado desde el original el 18 de noviembre de 2011 . Consultado el 28 de junio de 2012 .
12. "Protocolo de tinción con Fite-Faraco para los bacilos de la lepra". Ihcworld.com .
13. "Manchas - Fite Faraco". manchasfile.info . Archivado desde el original el 18 de noviembre de 2011 . Consultado el 28 de junio de 2012 .
14. "Manchas - Wade Fite". manchasfile.info . Archivado desde el original el 18 de noviembre de 2011 . Consultado el 28 de junio de 2012 .
15. Ellis, RC; Zabrowarny, LA (1993). "Método de tinción más seguro para bacilos acidorresistentes". Revista de patología clínica . 46 (6): 559–560. doi :10.1136/jcp.46.6.559. PMC 501296 . PMID  7687254. 
16. "Laboratorio de Histología: TINCIÓN PARA BACILOS ÁCIDOS RÁPIDOS". Archivado desde el original el 4 de enero de 2006 . Consultado el 11 de marzo de 2006 .
17. García LS, Bruckner DA, Brewer TC, Shimizu RY (julio de 1983). "Técnicas para la recuperación e identificación de ooquistes de Cryptosporidium a partir de muestras de heces". J.Clin. Microbiol . 18 (1): 185–90. doi :10.1128/JCM.18.1.185-190.1983. PMC 270765 . PMID  6193138. 
18. Ng E, Markell EK, Fleming RL, Fried M (septiembre de 1984). "Demostración de Isospora belli mediante tinción acidorresistente en un paciente con síndrome de inmunodeficiencia adquirida". J.Clin. Microbiol . 20 (3): 384–6. doi :10.1128/JCM.20.3.384-386.1984. PMC 271334 . PMID  6208216. 
19. Ortega YR, Sterling CR, Gilman RH, Cama VA, Díaz F (mayo de 1993). "Especies de Cyclospora: un nuevo protozoo patógeno de los humanos". N. inglés. J. Med . 328 (18): 1308–12. doi : 10.1056/NEJM199305063281804 . PMID  8469253.
20. Clavel A, Varea M, Doiz O, López L, Quílez J, Castillo FJ, Rubio C, Gómez-Lus R (1999). "Visualización de elementos hidatídicos: comparación de varias técnicas". J Clin Microbiol . 37 (5): 1561–3. doi :10.1128/JCM.37.5.1561-1563.1999. PMC 84828 . PMID  10203521. 
21. "Productos Dako - Agilent" (PDF) . Dako.com . Archivado desde el original (PDF) el 4 de marzo de 2016 . Consultado el 3 de diciembre de 2018 .
22. Salarios ds, Wear dJ. Resistencia al ácido de hongos en blastomicosis e histoplasmosis. Laboratorio Arch Pathol Med 1982; 106:440-41.

Ejemplos de protocolos en línea

• Protocolo Ziehl-Neelsen ( formato PDF ).
• Método alternativo de Ellis y Zabrowarny Archivado el 4 de enero de 2006 en Wayback Machine para teñir AFB.