Los anticuerpos antiinmunoglobulina se definen como una proteína que detecta otros anticuerpos de un organismo. Específicamente, los anticuerpos antiinmunoglobulina son creados por las células B como anticuerpos para unirse a otras inmunoglobulinas. Las inmunoglobulinas tienen dos regiones: la región constante y la región variable. La región constante está involucrada en la función efectora, mientras que la región variable está involucrada en el reconocimiento y unión a antígenos . Los anticuerpos antiinmunoglobulina pueden unirse a la región variable o constante de la inmunoglobulina. [1] Los anticuerpos antiinmunoglobulina son un tipo de anticuerpo secundario . Son capaces de detectar anticuerpos primarios a través de múltiples métodos como Western blot , inmunohistoquímica , tinción de inmunofluorescencia , citometría de flujo y ELISA . [2]
Los anticuerpos anti-inmunoglobulina se crean mediante tecnología de ADN recombinante . La producción mediante tecnología de ADN recombinante permite el más alto nivel de reproducibilidad de lote a lote. Este método de ingeniería de anticuerpos puede ampliar la compatibilidad de los anticuerpos a múltiples componentes de ensayo. [3] Todos los anticuerpos anti-inmunoglobulina se fabrican en laboratorio, por lo que son un tipo de anticuerpo clonal. Los anticuerpos clonales se diseñan en un laboratorio para imitar los efectos de los anticuerpos primarios. Los anticuerpos clonales pueden ser monoclonales o policlonales. Los anticuerpos monoclonales son clones de un anticuerpo; por lo tanto, los anticuerpos monoclonales solo pueden unirse a un objetivo. Los anticuerpos policlonales son clones de múltiples anticuerpos y células inmunes, por lo que pueden unirse a varios objetivos. [4] Los anticuerpos clonales recombinantes se producen mediante clonación in vitro . El proceso de clonación in vitro ocurre mediante la inserción de genes para la región ligera y pesada de un anticuerpo en un vector de expresión. Luego, el vector se introduce en las células huésped para su expresión. [5] Los huéspedes pueden variar desde conejos hasta ratones y cabras. Los anticuerpos antiinmunoglobulina se reconocen por el nombre del clon. El nombre del clon se coloca habitualmente entre paréntesis después del nombre escrito. [ cita requerida ]
Los anticuerpos para uso humano pueden reconocer IgM , IgA , IgE , IgD e IgG . Para detectar todos los isotipos de anticuerpos humanos, se encuentran disponibles anticuerpos anti- cadena ligera kappa y lambda humana . [2] Los anticuerpos anti-inmunoglobulina humana están disponibles para su compra en laboratorios comerciales.
Existen anticuerpos anti-IgG que son específicos de la cadena pesada y ligera, específicos de la parte Fc y específicos de la parte bisagra. [6]
Los anticuerpos IgM son los anticuerpos más grandes y son los primeros en responder en una respuesta inmunitaria. Los anticuerpos anti-IgM se utilizan para detectar la presencia de anticuerpos IgM en sueros humanos. Los anticuerpos IgM son responsables de la coagulación sanguínea durante las transfusiones de sangre de donantes incorrectos . [12]
Los anticuerpos IgE son las inmunoglobulinas menos abundantes en la respuesta inmunitaria. Se encuentran comúnmente en respuesta a reacciones alérgicas. El uso de anticuerpos contra IgE puede ayudar a prevenir las respuestas a la histamina. [15]
El anticuerpo IgA se encuentra con mayor frecuencia en las secreciones mucosas, como las lágrimas y la saliva, pero rara vez se encuentra circulando en el torrente sanguíneo. Alrededor del 15 % de los anticuerpos producidos cada día son del isotipo IgA. [18]
Los linfocitos B inmaduros expresan con mayor frecuencia el isotipo IgD. También se puede encontrar IgD circulando en el suero sanguíneo. La IgD envía señales a las células B para que activen la respuesta inmunitaria. Esta función también la comparte la IgM. La IgD es funcional en el sistema de defensa inmunitaria respiratoria, ya que activa los basófilos y los mastocitos que secretan factores antimicrobianos. [20]
Las cadenas ligeras lambda son una de las dos clases de cadenas ligeras presentes en las inmunoglobulinas de los mamíferos. Se encuentran en combinación con las cadenas ligeras kappa. Estas cadenas suelen estar presentes en una proporción de 70:30 de kappa a lambda. Los anticuerpos anti-cadena ligera lambda pueden unirse de forma no específica a múltiples isotipos de inmunoglobulinas. [22]
Las cadenas ligeras kappa son la segunda de las dos clases de cadenas ligeras presentes en las inmunoglobulinas de los mamíferos. Cada inmunoglobulina tiene solo un tipo de cadena ligera. Cada cadena ligera tiene una región constante y una variable. [23]
Es importante señalar que estos no son los únicos anticuerpos anti-inmunoglobulina humana. Estos son ejemplos de los anticuerpos anti-inmunoglobulina más comunes que se utilizan en la investigación humana actual. Estos anticuerpos se pueden comprar a escala comercial.
La mayoría de los anticuerpos de inmunoglobulina no humanos se detectan en modelos de primates no humanos (NHP). Los modelos de NHP sirven como sustitutos de los humanos durante los estudios preclínicos. Los modelos de NHP más comunes para isotipos y subtipos de anticuerpos importantes incluyen macacos rhesus , monos cinomolgus y babuinos . Por lo tanto, ciertos anticuerpos solo reaccionarán con ciertas especies de NHP. Los isotipos de anticuerpos más comunes son el macaco rhesus y el mono cinomolgus IgG1 e IgG4. [3]
Si bien los métodos utilizados para la creación y detección de anticuerpos anti-babuino son muy similares, cada anticuerpo es responsable de identificar un isotipo diferente de IgG. Los isotipos incluyen IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4.
Los siguientes anticuerpos anti-rhesus son isotipos de anti-IgG. Los isotipos incluyen IgG1 e IgG4. Tanto [2C6] como [7A8] son subtipos de anti-IgG4.
Es importante señalar que estos no son los únicos anticuerpos anti-inmunoglobulina no humana. Estos son ejemplos de los anticuerpos anti-inmunoglobulina más comunes que se utilizan en la investigación actual sobre NHP.
Los anticuerpos antiinmunoglobulina monoclonales recombinantes tienen diversas aplicaciones clínicas que incluyen el diagnóstico, el tratamiento de enfermedades y la investigación. El uso más práctico de los anticuerpos antiinmunoglobulina es en pruebas de diagnóstico. Los ensayos utilizan anticuerpos antiinmunoglobulina para detectar respuestas inmunitarias en pacientes con cáncer, desarrollos de fármacos para terapias autoinmunes, estudios de enfermedades infecciosas y ensayos de vacunas. [3] La aplicación más actual de los anticuerpos antiinmunoglobulina es en el desarrollo de tratamientos para el asma y la detección de COVID-19 .
Los anticuerpos anti-inmunoglobulina IgE se utilizan actualmente en medicamentos para el tratamiento del asma en casos graves. El tratamiento se centra en el asma bronquial, que se define como la inflamación crónica de las vías respiratorias. Los síntomas incluyen sibilancias, disnea y tos. El uso de anticuerpos anti-inmunoglobulina E se reserva para casos graves de asma relacionados con reacciones alérgicas. Los planes de tratamiento a largo plazo para el asma grave se presentan en cuatro pasos, y el uso de un anticuerpo anti-IgE se utiliza en el cuarto paso junto con un corticosteroide inhalado . El uso de anticuerpos anti-IgE en el tratamiento solo es eficaz en pacientes con un valor de IgE total en suero de entre 30 y 1500 UI/ml. Omalizumab es la terapia farmacológica utilizada para administrar los anticuerpos anti-inmunoglobulina E. Omalizumab es un anticuerpo monoclonal anti-IgE humano. Bloquea las reacciones mediadas por IgE y reduce los síntomas del asma al unirse a los anticuerpos IgE libres en el suero. El medicamento se administra cada 2 a 4 semanas según la gravedad del paciente. La eficacia del fármaco predice un mayor recuento de eosinófilos , un mayor recuento de periostina sérica y mayores niveles de óxido nítrico exhalado fraccional . El tratamiento es eficaz en aproximadamente el 60% de los pacientes. [34]
Con la propagación de COVID-19 en todo el mundo, se volvió vital para los investigadores desarrollar un método eficiente para detectar COVID-19 en pruebas de PCR . En 2021, los investigadores desarrollaron un ensayo para detectar tanto el ARN viral como los anticuerpos humanos a partir de una muestra clínica. El ensayo se conoce como OPIPE, un ensayo de extensión de proximidad de interfaz pre-recubierto de un solo recipiente. El ensayo reconoce los anticuerpos mediante el uso de una interfaz de antígeno pre-recubierta y un par de anti-anticuerpos marcados con oligosacáridos . Los anticuerpos reconocidos se extienden a plantillas de ADN bicatenario para iniciar los pasos finales de la PCR. El nivel de detección sérica es de 100 fg/mL para el anticuerpo anti-SARS-CoV-2 y 10 copias/μL para el ADN viral. [35] El éxito del método para co-detectar ARN viral y anticuerpos humanos es imperativo para encontrar alternativas más económicas para las identificaciones de infecciones por COVID-19.