La aloficocianina ("otra proteína azul de las algas"; del griego ἄλλος ( allos) que significa "otra", φύκος (phykos) que significa "alga" y κυανός (kyanos) que significa "azul") es una proteína de la familia de las ficobiliproteínas captadoras de luz , junto con la ficocianina , la ficoeritrina y la ficoeritrocianina . Es un pigmento accesorio de la clorofila . Todas las ficobiliproteínas son solubles en agua y, por lo tanto, no pueden existir dentro de la membrana como los carotenoides , sino que se agregan, formando grupos que se adhieren a la membrana llamados ficobilisomas . La aloficocianina absorbe y emite luz roja (650 y 660 nm máximo, respectivamente), y se encuentra fácilmente en las cianobacterias (también llamadas algas verdeazuladas ) y las algas rojas . Los pigmentos de ficobilina tienen propiedades fluorescentes que se utilizan en kits de inmunoensayo . En citometría de flujo , a menudo se abrevia APC. Para que se utilice de manera eficaz en aplicaciones como FACS , detección de alto rendimiento (HTS) y microscopía , la APC debe estar reticulada químicamente.
La aloficocianina se puede aislar de varias especies de algas rojas o verdeazuladas, cada una de las cuales produce formas ligeramente diferentes de la molécula. Está compuesta por dos subunidades diferentes (α y β) en las que cada subunidad tiene un cromóforo de ficocianobilina (PCB). La estructura de la subunidad de APC se ha determinado como (αβ) 3 . El peso molecular de APC es de 105.000 daltons.
APC reticulado
Como se mencionó anteriormente, para que el APC sea útil en inmunoensayos, primero debe reticularse químicamente para evitar que se disocie en sus subunidades componentes cuando se encuentra en tampones fisiológicos comunes. [1] El método convencional para lograr esto es a través de un proceso destructivo en el que el trímero de APC tratado se desintegra químicamente en urea 8M y luego se le permite volver a asociarse a través de un tampón fisiológico. [2] Se puede utilizar un método alternativo que preserva la integridad estructural del trímero de APC y permite obtener un producto final más brillante y estable. [3]
Se desarrollaron muchas aplicaciones e instrumentos específicamente para la aloficocianina. Se utiliza comúnmente en inmunoensayos como FACS , citometría de flujo y detección de alto rendimiento como aceptor de europio mediante ensayos de transferencia de energía por resonancia de fluorescencia resuelta en el tiempo (TR-FRET) .