La albúmina sérica bovina ( BSA o "Fracción V" ) es una proteína de albúmina sérica derivada de vacas. Se utiliza a menudo como estándar de concentración de proteínas en experimentos de laboratorio.
El apodo "Fracción V" se refiere a que la albúmina es la quinta fracción de la metodología de purificación original de Edwin Cohn que hizo uso de las características de solubilidad diferencial de las proteínas plasmáticas . Al manipular las concentraciones de disolventes, el pH , los niveles de sal y la temperatura , Cohn pudo extraer "fracciones" sucesivas de plasma sanguíneo . El proceso se comercializó primero con albúmina humana para uso médico y luego se adoptó para la producción de BSA.
Albúmina de suero bovino liofilizada
Propiedades
El polipéptido precursor de BSA de longitud completa tiene 607 aminoácidos (AA). Un péptido señal de 18 residuos N-terminal se separa de la proteína precursora durante la secreción, por lo que el producto proteico inicial contiene 589 residuos de aminoácidos. Se escinden seis aminoácidos adicionales para producir la proteína BSA madura que contiene 583 aminoácidos. [1]
La BSA tiene tres dominios homólogos pero estructuralmente diferentes. Los dominios, denominados I, II y III, se dividen en dos subdominios, A y B. [1]
Rotación media de residuos, [m'] 233 : 8443 [5] [6]
Elipticidad media del residuo: 21,1 [θ] 209 nm ; 20,1 [θ] 222 nm [5] [6]
Hélice a estimada, %: 54 [5] [6]
Forma b estimada, %: 18 [5] [6]
Función
La BSA, al igual que otras albúminas séricas , es fundamental para proporcionar presión oncótica dentro de los capilares, transportar ácidos grasos, bilirrubina , minerales y hormonas, y funcionar como anticoagulante y antioxidante . [9] Hay aproximadamente 6 sitios de unión de ácidos grasos de cadena larga diferentes en la proteína, los tres más fuertes de los cuales se encuentran uno por cada dominio. La BSA también puede unirse a otras sustancias como salicilato , sulfonamidas , bilirrubina y otros fármacos, que se unen al "sitio 1" en el subdominio IIA, mientras que el triptófano , la tiroxina , el octanoato y otros fármacos de naturaleza aromática se unen al "sitio 2" en el subdominio IIIA. [10]
Aplicaciones
La BSA se utiliza a menudo como modelo para otras proteínas de albúmina sérica, especialmente la albúmina sérica humana , a la que es estructuralmente homóloga en un 76%. [11]
La BSA tiene numerosas aplicaciones bioquímicas, incluidas las pruebas ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas), inmunotransferencias e inmunohistoquímica . Debido a que la BSA es una proteína pequeña, estable y moderadamente no reactiva, a menudo se utiliza como bloqueador en inmunohistoquímica. [12] Durante la inmunohistoquímica, que es el proceso que utiliza anticuerpos para identificar antígenos en las células, las secciones de tejido a menudo se incuban con bloqueadores de BSA para unirse a sitios de unión no específicos. [13] [14] Esta unión de la BSA a sitios de unión no específicos aumenta la posibilidad de que los anticuerpos se unan solo a los antígenos de interés. [15] El bloqueador de BSA mejora la sensibilidad al disminuir el ruido de fondo a medida que los sitios están cubiertos con la proteína moderadamente no reactiva. [16] [17] Durante este proceso, la minimización de la unión no específica de los anticuerpos es esencial para adquirir la mayor relación señal-ruido. [16] La BSA también se utiliza como nutriente en cultivos celulares y microbianos. En los digestos de restricción , la BSA se utiliza para estabilizar algunas enzimas durante la digestión del ADN y para evitar la adhesión de la enzima a los tubos de reacción, las puntas de las pipetas y otros recipientes. [18] Esta proteína no afecta a otras enzimas que no la necesitan para la estabilización. La BSA también se utiliza comúnmente para determinar la cantidad de otras proteínas, comparando una cantidad desconocida de proteína con cantidades conocidas de BSA (véase el ensayo de proteínas de Bradford ). La BSA se utiliza debido a su capacidad para aumentar la señal en los ensayos, su falta de efecto en muchas reacciones bioquímicas y su bajo coste, ya que grandes cantidades de ella se pueden purificar fácilmente a partir de sangre bovina, un subproducto de la industria ganadera. Otro uso de la BSA es que se puede utilizar para aislar temporalmente sustancias que bloquean la actividad de la enzima que se necesita, impidiendo así la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). [19] La BSA se ha utilizado ampliamente como plantilla para sintetizar nanoestructuras [20] y determinar los efectos tóxicos o beneficiosos de los iones metálicos y sus complejos. [21]
La BSA también es el componente principal del suero bovino fetal , un medio de cultivo celular común.
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Lectura adicional
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