Por lo general, actúa durante la traducción cuando la proteína naciente está entrando en el RE, pero esta glicosilación cotraduccional se denomina, no obstante, modificación postraduccional . Se han encontrado algunos ejemplos de actividad de OST después de que se completa la traducción. [5] [6] La opinión actual es que puede producirse actividad postraduccional si la proteína está mal plegada o se pliega lentamente. [6]
Estructura y función
La OST de levadura se compone de ocho proteínas diferentes que atraviesan la membrana en tres subcomplejos (uno de ellos es OST4 ). [7] [8] Estos octómeros no forman oligómeros de orden superior , y tres de las ocho proteínas están glicosiladas. [7] Se sabe que la OST en mamíferos tiene una composición similar. [9] [10]
Se cree que la OST requiere muchas subunidades porque debe: [11]
Posiciónese cerca del poro translocón.
Reconocer y unirse al oligosacarildólico.
Escanear la proteína naciente para reconocer y unirse a los sequones.
Mueva estos dos grandes sustratos a sus ubicaciones y conformaciones adecuadas.
La subunidad catalíticamente activa de la OST se llama STT3. Existen dos parálogos en eucariotas, denominados STT3A y STT3B . STT3A es principalmente responsable de la glicosilación cotraduccional del polipéptido naciente cuando ingresa al lumen del retículo endoplasmático, mientras que STT3B también puede mediar la glicosilación postraduccional. [12] Se ha resuelto la estructura de PglB , el homólogo procariota de STT3. [13] La alta similitud de secuencia entre el STT3 procariota y el eucariota sugiere que sus estructuras son similares.
Importancia clínica
Los síndromes CDG son trastornos genéticos de la vía de la glicosilación. Se denominan "Tipo I" si el gen defectuoso corresponde a una enzima implicada en el ensamblaje o transferencia del precursor Glc 3 Man 9 GlcNAc 2 -dolicol. Se denominan "Tipo II" si el paso defectuoso se produce después de la acción de OST en la vía de la glicosilación ligada a N o implica la glicosilación ligada a O. [14]
^ Wild R, Kowal J, Eyring J, Ngwa EM, Aebi M, Locher KP (2018). "La estructura del complejo oligosacariltransferasa de levadura proporciona información sobre la N-glicosilación eucariota". Science . 359 (6375): 545–550. Bibcode :2018Sci...359..545W. doi : 10.1126/science.aar5140 . hdl : 20.500.11850/228327 . PMID 29301962.
^ Pfeffer S, Dudek J, Gogala M, Schorr S, Linxweiler J, Lang S, Becker T, Beckmann R, Zimmermann R, Förster F (2014). "Estructura del complejo oligosacaril-transferasa de mamíferos en el translocón de la proteína ER nativa". Nat. Commun . 5 (5): 3072. Bibcode :2014NatCo...5.3072P. doi : 10.1038/ncomms4072 . PMID 24407213.
^ Zufferey R, Knauer R, Burda P, Stagljar I, te Heesen S, Lehle L, Aebi M (octubre de 1995). "STT3, una proteína altamente conservada necesaria para la actividad de la oligosacaril transferasa de levadura in vivo". EMBO J . 14 (20): 4949–60. doi :10.1002/j.1460-2075.1995.tb00178.x. PMC 394598 . PMID 7588624.
^ Nilsson IM, von Heijne G (marzo de 1993). "Determinación de la distancia entre el sitio activo de la oligosacariltransferasa y la membrana del retículo endoplasmático". J. Biol. Chem . 268 (8): 5798–801. doi : 10.1016/S0021-9258(18)53389-5 . PMID: 8449946.
^ Pless DD, Lennarz WJ; Lennarz (enero de 1977). "Conversión enzimática de proteínas en glicoproteínas". Proc. Natl. Sci. USA . 74 (1): 134–8. Bibcode :1977PNAS...74..134P. doi : 10.1073/pnas.74.1.134 . PMC 393212 . PMID 264667.
^ ab Duvet S, Op De Beeck A, Cocquerel L, Wychowski C, Cacan R, Dubuisson J (febrero de 2002). "La glicosilación de la proteína de envoltura E1 del virus de la hepatitis C se produce postraduccionalmente en una línea celular mutante CHO deficiente en manosilfosforildólicol". Glycobiology . 12 (2): 95–101. doi : 10.1093/glycob/12.2.95 . PMID 11886842.
^ ab Knauer R, Lehle L (enero de 1999). "El complejo oligosacariltransferasa de la levadura". Biochim. Biophys. Acta . 1426 (2): 259–73. doi :10.1016/S0304-4165(98)00128-7. PMID 9878773.
^ Dempski RE, Imperiali B (diciembre de 2002). "Oligosacaril transferasa: guardiana de la vía secretora". Curr Opin Chem Biol . 6 (6): 844–50. doi :10.1016/S1367-5931(02)00390-3. PMID 12470740.
^ Nilsson I, Kelleher DJ, Miao Y, Shao Y, Kreibich G, Gilmore R, von Heijne G, Johnson AE (mayo de 2003). "Fotoentrecruzamiento de cadenas nacientes a la subunidad STT3 del complejo oligosacariltransferasa". J. Cell Biol . 161 (4): 715–25. doi :10.1083/jcb.200301043. PMC 2199356. PMID 12756234 .
^ Karaoglu D, Kelleher DJ, Gilmore R (octubre de 2001). "La regulación alostérica proporciona un mecanismo molecular para la utilización preferencial del oligosacárido unido a dolicol completamente ensamblado por la oligosacariltransferasa de levadura". Bioquímica . 40 (40): 12193–206. doi :10.1021/bi0111911. PMID 11580295.
^ Imperiali B (noviembre de 1997). "Glicosilación de proteínas: el choque de titanes". Accounts of Chemical Research . 30 (11): 452–459. doi :10.1021/ar950226k.
^ Ruiz-Canada C, Kelleher DJ, Gilmore R (enero de 2009). "N-glicosilación cotraduccional y postraduccional de polipéptidos por distintas isoformas de OST en mamíferos". Cell . 136 (2): 272–83. doi :10.1016/j.cell.2008.11.047. PMC 2859625 . PMID 19167329.
^ Lizak C, Gerber S, Numao S, Aebi M, Locher KP (junio de 2011). "Estructura de rayos X de una oligosacariltransferasa bacteriana". Nature . 474 (7351): 350–5. doi :10.1038/nature10151. PMID 21677752. S2CID 205225231.
^ Marquardt T, Denecke J (junio de 2003). "Trastornos congénitos de la glicosilación: revisión de sus bases moleculares, presentaciones clínicas y terapias específicas". Eur. J. Pediatr . 162 (6): 359–79. doi :10.1007/s00431-002-1136-0. PMID 12756558. S2CID 3196550.