El caldo de lisogenia ( LB ) es un medio nutricionalmente rico que se utiliza principalmente para el crecimiento de bacterias. Su creador, Giuseppe Bertani , pretendía que LB representara caldo de lisogenia , [1] pero LB también ha llegado a significar coloquialmente caldo Luria , caldo Lennox , caldo de vida o medio Luria -Bertani . [2] La fórmula del medio LB fue publicada en 1951 en el primer artículo de Bertani sobre lisogenia . En este artículo describió el experimento de ráfaga única modificado y el aislamiento de los fagos P1 , P2 y P3. Había desarrollado el medio LB para optimizar el crecimiento de Shigella y la formación de placas . [1] [3]
Las formulaciones del medio LB han sido un estándar industrial para el cultivo de Escherichia coli desde la década de 1950. [4] [5] Estos medios se han utilizado ampliamente en aplicaciones de microbiología molecular para la preparación de ADN plasmídico y proteínas recombinantes . Sigue siendo uno de los medios más comunes utilizados para mantener y cultivar cepas recombinantes de laboratorio de Escherichia coli . [5] [4] Sin embargo, para estudios fisiológicos, se desaconseja el uso de medio LB. [6]
Existen varias formulaciones comunes de LB. Aunque son diferentes, generalmente comparten una composición algo similar de ingredientes utilizados para promover el crecimiento, incluidos los siguientes:
Los iones de sodio para el transporte y el equilibrio osmótico los proporciona el cloruro de sodio . La triptona se usa para proporcionar aminoácidos esenciales como péptidos y peptonas a las bacterias en crecimiento, mientras que el extracto de levadura se usa para proporcionar una gran cantidad de compuestos orgánicos útiles para el crecimiento bacteriano. Estos compuestos incluyen vitaminas y ciertos oligoelementos.
En su artículo original de 1951, Bertani utilizó 10 gramos de NaCl y 1 gramo de glucosa por 1 litro de solución; Luria en su "caldo L" de 1957 copió exactamente la receta original de Bertani. [7] Las recetas publicadas posteriormente normalmente no incluyen la glucosa. [ cita necesaria ]
Las formulaciones generalmente difieren en la cantidad de cloruro de sodio, lo que permite seleccionar las condiciones osmóticas apropiadas para la cepa bacteriana particular y las condiciones de cultivo deseadas. Las formulaciones bajas en sal, Lennox y Luria, son ideales para cultivos que requieren antibióticos sensibles a la sal.
Antes de esterilizarlo en autoclave, algunos laboratorios ajustan el pH de LB a 7,5 u 8 con hidróxido de sodio. Sin embargo, el hidróxido de sodio no proporciona ninguna capacidad amortiguadora al medio y esto da como resultado cambios rápidos en el pH durante el cultivo de bacterias. Para evitar esto, algunos laboratorios prefieren ajustar el pH con 5-10 mmol/L de tampón TRIS , diluido a partir de 1 mol/L de solución TRIS al pH deseado. Sin embargo, no es absolutamente necesario ajustar el pH en la mayoría de las situaciones. Algunos laboratorios ajustan el pH a 7,0 simplemente como precaución. [8]