stringtranslate.com

Albúmina de suero bovino

La albúmina sérica bovina ( BSA o "Fracción V" ) es una proteína de albúmina sérica derivada de vacas. A menudo se utiliza como estándar de concentración de proteínas en experimentos de laboratorio.

El sobrenombre de "Fracción V" se refiere a que la albúmina es la quinta fracción de la metodología de purificación original de Edwin Cohn que utilizaba características de solubilidad diferencial de las proteínas plasmáticas . Manipulando las concentraciones de disolvente, el pH , los niveles de sal y la temperatura , Cohn pudo extraer "fracciones" sucesivas de plasma sanguíneo . El proceso se comercializó por primera vez con albúmina humana para uso médico y luego se adoptó para la producción de BSA.

Albúmina sérica bovina liofilizada

Propiedades

El polipéptido precursor de BSA de longitud completa tiene 607 aminoácidos (AA) de longitud. Un péptido señal N-terminal de 18 residuos se corta de la proteína precursora tras la secreción, por lo que el producto proteico inicial contiene 589 residuos de aminoácidos. Se escinden seis aminoácidos adicionales para producir la proteína BSA madura que contiene 583 aminoácidos. [1]

BSA tiene tres dominios homólogos pero estructuralmente diferentes. Los dominios, denominados I, II y III, se dividen en dos subdominios, A y B. [1]

Propiedades físicas de BSA:

Función

BSA, al igual que otras albúminas séricas , es fundamental para proporcionar presión oncótica dentro de los capilares, transportar ácidos grasos, bilirrubina , minerales y hormonas, y funcionar como anticoagulante y antioxidante . [9] Hay aproximadamente 6 sitios diferentes de unión de ácidos grasos de cadena larga en la proteína, los tres más fuertes de los cuales están ubicados uno por cada dominio. BSA también puede unirse a otras sustancias como salicilato , sulfonamidas , bilirrubina y otros fármacos, que se unen al "sitio 1" en el subdominio IIA, mientras que triptófano , tiroxina , octanoato y otros fármacos que son de naturaleza aromática se unen al "sitio 2" en subdominio IIIA. [10]

Aplicaciones

BSA se utiliza a menudo como modelo para otras proteínas de albúmina sérica, especialmente la albúmina sérica humana , a la que tiene un 76% de homología estructural. [11]

BSA tiene numerosas aplicaciones bioquímicas, incluidas ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas), inmunotransferencias e inmunohistoquímica . Debido a que la BSA es una proteína pequeña, estable y moderadamente no reactiva, a menudo se usa como bloqueador en inmunohistoquímica. [12] Durante la inmunohistoquímica, que es el proceso que utiliza anticuerpos para identificar antígenos en las células, las secciones de tejido a menudo se incuban con bloqueadores de BSA para unirse a sitios de unión no específicos. [13] [14] Esta unión de BSA a sitios de unión no específicos aumenta la posibilidad de que los anticuerpos se unan solo a los antígenos de interés. [15] El bloqueador de BSA mejora la sensibilidad al disminuir el ruido de fondo ya que los sitios están cubiertos con la proteína moderadamente no reactiva. [16] [17] Durante este proceso, la minimización de la unión no específica de los anticuerpos es esencial para adquirir la relación señal-ruido más alta. [16] BSA también se utiliza como nutriente en cultivos celulares y microbianos. En las digestiones de restricción , la BSA se utiliza para estabilizar algunas enzimas durante la digestión del ADN y para evitar la adhesión de la enzima a los tubos de reacción, puntas de pipetas y otros recipientes. [18] Esta proteína no afecta a otras enzimas que no la necesitan para la estabilización. BSA también se usa comúnmente para determinar la cantidad de otras proteínas, comparando una cantidad desconocida de proteína con cantidades conocidas de BSA (consulte Ensayo de proteínas de Bradford ). La BSA se utiliza debido a su capacidad para aumentar la señal en los ensayos, su falta de efecto en muchas reacciones bioquímicas y su bajo costo, ya que grandes cantidades pueden purificarse fácilmente a partir de sangre bovina, un subproducto de la industria ganadera. Otro uso de la BSA es que puede usarse para aislar temporalmente sustancias que bloquean la actividad de la enzima necesaria, impidiendo así la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). [19] BSA se ha utilizado ampliamente como plantilla para sintetizar nanoestructuras [20] y determinar los efectos tóxicos o beneficiosos de los iones metálicos y sus complejos. [21]

BSA es también el componente principal del suero fetal bovino , un medio de cultivo celular común.

Ver también

Referencias

  1. ^ ab Majorek KA, Porebski PJ, Dayal A, Zimmerman MD, Jablonska K, Stewart AJ, et al. (Octubre 2012). "Caracterización estructural e inmunológica de albúminas séricas de bovino, caballo y conejo". Inmunología molecular . 52 (3–4): 174–182. doi :10.1016/j.molimm.2012.05.011. PMC  3401331 . PMID  22677715.
  2. ^ Ge S, Kojio K, Takahara A, Kajiyama T (1998). "Adsorción de albúmina sérica bovina sobre la superficie de organotriclorosilano inmovilizado: influencia de la separación de fases en los patrones de adsorción de proteínas". Revista de ciencia de biomateriales. Edición de polímero . 9 (2): 131-150. doi :10.1163/156856298x00479. PMID  9493841.
  3. ^ Peters T (1975). Putman FW (ed.). Las Proteínas Plasmáticas . Prensa académica. págs. 133–181.
  4. ^ Wright AK, Thompson MR (febrero de 1975). "Estructura hidrodinámica de la albúmina sérica bovina determinada por birrefringencia eléctrica transitoria". Revista Biofísica . 15 (2 puntos 1): 137–141. Código Bib : 1975BpJ....15..137W. doi :10.1016/S0006-3495(75)85797-3. PMC 1334600 . PMID  1167468. 
  5. ^ abcdefghijklm Putnam FW (1975). Las proteínas plasmáticas: estructura, función y control genético . vol. 1 (2ª ed.). Nueva York: Academic Press. págs.141, 147. ASIN  B007ESU1JQ.
  6. ^ abcdefghijklm "Albúmina de suero bovino" (PDF) . Sigma-Aldrich. Archivado desde el original (PDF) el 8 de octubre de 2013 . Consultado el 5 de julio de 2013 .
  7. ^ Axelsson I (mayo de 1978). "Caracterización de proteínas y otras macromoléculas mediante cromatografía en gel de agarosa". Revista de cromatografía A. 152 (1): 21–32. doi :10.1016/S0021-9673(00)85330-3.
  8. ^ "Consejo técnico n.º 6: coeficientes de extinción" (PDF) . Termo Fisher Scientific . Consultado el 29 de abril de 2021 .
  9. ^ Chen CB, Hammo B, Barry J, Radhakrishnan K (julio de 2021). "Descripción general de la fisiología de la albúmina y su papel en las enfermedades pediátricas". Informes actuales de gastroenterología . 23 (8): 11. doi :10.1007/s11894-021-00813-6. PMID  34213692.
  10. ^ Peters T (1996). Todo sobre la albúmina: bioquímica, genética y aplicaciones médicas. San Diego: Prensa académica. ISBN 978-0-12-552110-9. OCLC  162129148.
  11. ^ Topală T, Bodoki A, Oprean L, Oprean R (12 de noviembre de 2014). "Interacciones de albúmina sérica bovina con complejos metálicos". Médico Clujul . 87 (4): 215–219. doi :10.15386/cjmed-357. PMC 4620676 . PMID  26528027. 
  12. ^ "Albúminas séricas y alergias". Base de conocimientos de biología estructural . Instituto Nacional de Ciencias Médicas Generales de los Institutos Nacionales de Salud. Octubre de 2013. Archivado desde el original el 23 de octubre de 2021 . Consultado el 29 de marzo de 2017 .
  13. ^ "¿Qué es la inmunohistoquímica (IHC)?". Inmunohistoquímica . Sino biológico Inc.
  14. ^ Farwell AP, Dubord-Tomasetti SA (septiembre de 1999). "La hormona tiroidea regula la expresión de laminina en el cerebelo de rata en desarrollo". Endocrinología . 140 (9): 4221–4227. doi : 10.1210/endo.140.9.7007 . PMID  10465295.
  15. ^ "Consejos para reducir los antecedentes de ELISA". Biocomparar . Comparar redes. 8 de octubre de 2012.
  16. ^ ab Ouellet M (24 de diciembre de 2006). "Cómo funciona el bloqueo en el análisis inmunocitoquímico con suero o BSA". Red MadSci: Bioquímica . Red MadSci.
  17. ^ "Blocker™ BSA (10X) en PBS". Termo Fisher Scientific . Thermo Fisher Scientific Inc. Archivado desde el original el 30 de marzo de 2017.
  18. ^ "Preguntas frecuentes sobre BSA". Invitrogeno. Archivado desde el original el 28 de diciembre de 2011 . Consultado el 19 de enero de 2012 .
  19. ^ Kreader CA (marzo de 1996). "Alivio de la inhibición de la amplificación en PCR con albúmina sérica bovina o proteína 32 del gen T4". Microbiología Aplicada y Ambiental . 62 (3): 1102-1106. Código Bib : 1996ApEnM..62.1102K. doi :10.1128/aem.62.3.1102-1106.1996. PMC 167874 . PMID  8975603. 
  20. ^ Rahmani T, Hajian A, Afkhami A, Bagheri H (2018). "Una capa sensora sin enzimas novedosa y de alto rendimiento para la detección electroquímica de metilparatión basada en nanoclusters bimetálicos de Au-Ag con plantilla de BSA". Nueva Revista de Química . 42 (9): 7213–22. doi :10.1039/C8NJ00425K.
  21. ^ Zavalishin MN, Pimenov OA, Belov KV, Khodov IA, Gamov GA (noviembre de 2023). "Equilibrios químicos en soluciones acuosas de H [AuCl4] y albúmina sérica bovina o humana". Revista de líquidos moleculares . 389 : 122914. doi : 10.1016/j.molliq.2023.122914.

Otras lecturas

enlaces externos