Resistencia a los ácidos

Propiedad física de ciertas células bacterianas y eucariotas

Mycobacterium tuberculosis (teñido de rojo) en tejido (azul).

La resistencia a los ácidos es una propiedad física de ciertas células bacterianas y eucariotas , así como de algunas estructuras subcelulares , específicamente su resistencia a la decoloración por ácidos durante los procedimientos de tinción de laboratorio . ^{[1] [2]} Una vez teñidos como parte de una muestra, estos organismos pueden resistir los procedimientos de decoloración basados ​​en ácidos y/o etanol comunes en muchos protocolos de tinción, de ahí el nombre de resistencia a los ácidos . ^[2]

Los mecanismos de resistencia al ácido varían según la especie, aunque el ejemplo más conocido se encuentra en el género Mycobacterium , que incluye las especies responsables de la tuberculosis y la lepra . La resistencia al ácido de las micobacterias se debe al alto contenido de ácido micólico de sus paredes celulares , que es responsable del patrón de tinción de mala absorción seguida de alta retención. Algunas bacterias también pueden ser parcialmente resistentes al ácido, como Nocardia .

Los organismos acidorresistentes son difíciles de caracterizar con técnicas microbiológicas estándar, aunque se pueden teñir con colorantes concentrados, en particular cuando el proceso de tinción se combina con calor. Algunos, como las micobacterias , se pueden teñir con la tinción de Gram , pero no reaccionan bien al violeta cristal y, por lo tanto, aparecen de color violeta claro, lo que aún puede dar lugar a una identificación incorrecta de bacterias gramnegativas. ^[3]

La técnica de tinción más común utilizada para identificar bacterias acidorresistentes es la tinción de Ziehl-Neelsen , en la que las especies acidorresistentes se tiñen de rojo brillante y se destacan claramente contra un fondo azul. Otro método es el método de Kinyoun , en el que las bacterias se tiñen de rojo brillante y se destacan claramente contra un fondo verde. Las micobacterias acidorresistentes también se pueden visualizar mediante microscopía de fluorescencia utilizando colorantes fluorescentes específicos ( tinción de auramina-rodamina , por ejemplo). ^[4]

Algunas técnicas de tinción acidorresistente

• Tinción de Ziehl-Neelsen (tipos de blanqueador clásico y modificado) ^[5]
• Tinción de Kinyoun
• Para las personas daltónicas (o en entornos donde es difícil detectar bacterias rojas), el azul Victoria se puede sustituir por fucsina carbol y se puede utilizar ácido pícrico como contratinción en lugar de azul de metileno , y se puede utilizar el resto de la técnica de Kinyoun. ^[6]
  • Varias técnicas de tinción de esporas bacterianas utilizando Kenyon, por ejemplo
    • El método de Moeller
    • Método de Dorner ^[7] (decolorante de alcohol ácido) sin la modificación de Schaeffer–Fulton ^[8] (decoloración con agua) ^[9]
    • Método de detergente, utilizando Tergitol 7, surfactante no iónico de éter poliglicólico tipo NP-7 ^[10]
• Tinción de Fite ^[11]
  • Tinción de Fite-Faraco ^{[12] [13]}
  • Tinción de Wade Fite ^[14]
• Tinción de Ellis y Zabrowarny ^{[15] [16]} (sin fenol/ácido carbólico)
• Tinción de auramina-rodamina
• Tinción de fenol auramina

Estructuras acidorresistentes notables

Muy pocas estructuras son acidorresistentes, por lo que la tinción para determinar la resistencia a los ácidos es particularmente útil en el diagnóstico. Los siguientes son ejemplos notables de estructuras que son acidorresistentes o acidorresistentes modificadas:

• Todas las micobacterias : M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis y micobacterias atípicas
• Actinomicetos (especialmente algunos aeróbicos) con ácido micólico en su pared celular (nótese que los Streptomyces NO tienen); no debe confundirse con Actinomyces , que es un género de actinomiceto no ácido-alcohol resistente.
  • Nocardia (débilmente resistente a los ácidos; resiste la decoloración con concentraciones de ácidos más débiles)
  • rodococo
  • Gordonia (un actinomiceto)
  • Tsukamurella
  • Dieta
• Cabeza de espermatozoide
• Esporas bacterianas, véase Endospora
• Legionella micdadei
• Ciertas inclusiones celulares, por ejemplo
  • Cuerpos de inclusión citoplasmáticos observados en
    • Neuronas en la capa 5 de la corteza cerebral lipofuscinosis ceroidea neuronal ( enfermedad de Batten ).
  • Cuerpos de inclusión nucleares observados en
    • Saturnismo
    • Envenenamiento por bismuto.
• Ooquistes de algunos parásitos coccidios en materia fecal, como:
  • Cryptosporidium parvum , ^[17]
  • Isospora belli ^[18]
  • Cyclospora cayetanensis . ^[19]
• Algunos otros parásitos:
  • Sarcocystis
  • Los huevos de Taenia saginata se tiñen bien, pero los de Taenia solium no (se puede utilizar para distinguirlos)
  • Los quistes hidatídicos , especialmente sus " ganchitos ", se tiñen irregularmente con la tinción ZN pero emanan fluorescencia roja brillante bajo luz verde y pueden ayudar a la detección en fondos moderadamente densos o con escasos "ganchitos". ^[20]
• Las formas de levadura fúngica se tiñen de manera inconsistente con la tinción ácido-resistente, que se considera una tinción de espectro estrecho para hongos. ^[21] En un estudio sobre la resistencia a los ácidos de los hongos, ^[22] el 60% de los blastomyces y el 47% de los histoplasmas mostraron una tinción citoplasmática positiva de las células similares a las levaduras, y Cryptococcus o candida no se tiñeron, y se observó una tinción muy rara en las endosporas de Coccidioides.

Referencias

1. Madison B (2001). "Aplicación de colorantes en microbiología clínica". Biotech Histochem . 76 (3): 119–25. doi :10.1080/714028138. PMID  11475314.
2. Ryan KJ; Ray CG, eds. (2004). Microbiología médica de Sherris (4.ª ed.). McGraw Hill. ISBN 0-8385-8529-9.
3. Reynolds, Jackie; Moyes, Rita B.; Breakwell, Donald P. (noviembre de 2009). "Tinción diferencial de bacterias: tinción de ácidos resistentes". Protocolos actuales en microbiología . Apéndice 3: Apéndice 3H. doi :10.1002/9780471729259.mca03hs15. ISSN  1934-8533. PMID  19885935. S2CID  45685776.
4. Abe C (2003). "[Estandarización de las pruebas de laboratorio para la tuberculosis y sus pruebas de competencia]". Kekkaku . 78 (8): 541–51. PMID  14509226.
5. "Ácido resistente / Auramina-rodamina". Pathologyoutlines.com .
6. Teoría y práctica de las técnicas histológicas, John D Bancroft, 6.ª ed., pág. 314
7. Dorner, W. 1926. Un procedimiento simple para la coloración de las esporas. Le Lait 6:8–12.
8. Schaeffer AB, Fulton M (1933). "Un método simplificado de tinción de endosporas". Science . 77 (1990): 194. Bibcode :1933Sci....77..194S. doi :10.1126/science.77.1990.194. PMID  17741261.
9. "Protocolo de tinción de endosporas". 1 de junio de 2012. Archivado desde el original el 1 de junio de 2012 . Consultado el 7 de marzo de 2022 .
10. M. Hayama; K. Oana; T. Kozakai; S. Umeda; J. Fujimoto; H. Ota; Y. Kawakami (2007). "PROPUESTA DE UNA TÉCNICA SIMPLIFICADA PARA LA TINCIÓN DE ESPORAS BACTERIANAS SIN APLICAR CALOR – MODIFICACIÓN EXITOSA DEL MÉTODO DE MOELLER" (PDF) . Revista Europea de Investigación Médica . 12 (8): 356–359. PMID  17933713 . Consultado el 7 de marzo de 2022 .
11. "Stainsfile – Fite". www.stainsfile.info . Archivado desde el original el 18 de noviembre de 2011. Consultado el 28 de junio de 2012 .
12. "Protocolo de tinción de Fite-Faraco para bacilos de lepra". Ihcworld.com .
13. "Stainsfile – Fite Faraco". spotsfile.info . Archivado desde el original el 2011-11-18 . Consultado el 2012-06-28 .
14. "Stainsfile – Wade Fite". www.stainsfile.info . Archivado desde el original el 18 de noviembre de 2011. Consultado el 28 de junio de 2012 .
15. Ellis, RC; Zabrowarny, LA (1993). "Método de tinción más seguro para bacilos acidorresistentes". Journal of Clinical Pathology . 46 (6): 559–560. doi :10.1136/jcp.46.6.559. PMC 501296 . PMID  7687254. 
16. "Laboratorio de Histología: TINCIÓN PARA BACILOS ÁCIDO-ALCOHOLICOS". Archivado desde el original el 4 de enero de 2006. Consultado el 11 de marzo de 2006 .
17. Garcia LS, Bruckner DA, Brewer TC, Shimizu RY (julio de 1983). "Técnicas para la recuperación e identificación de ooquistes de Cryptosporidium a partir de muestras de heces". J. Clin. Microbiol . 18 (1): 185–90. doi :10.1128/JCM.18.1.185-190.1983. PMC 270765 . PMID  6193138. 
18. Ng E, Markell EK, Fleming RL, Fried M (septiembre de 1984). "Demostración de Isospora belli mediante tinción de ácidos resistentes en un paciente con síndrome de inmunodeficiencia adquirida". J. Clin. Microbiol . 20 (3): 384–6. doi :10.1128/JCM.20.3.384-386.1984. PMC 271334 . PMID  6208216. 
19. Ortega YR, Sterling CR, Gilman RH, Cama VA, Díaz F (mayo de 1993). "Especies de Cyclospora: un nuevo protozoo patógeno de los humanos". N. Engl. J. Med . 328 (18): 1308–12. doi : 10.1056/NEJM199305063281804 . PMID:  8469253.
20. Clavel A, Varea M, Doiz O, López L, Quílez J, Castillo FJ, Rubio C, Gómez-Lus R (1999). "Visualización de elementos hidatídicos: comparación de varias técnicas". J Clin Microbiol . 37 (5): 1561–3. doi :10.1128/JCM.37.5.1561-1563.1999. PMC 84828 . PMID  10203521. 
21. "Dako Products – Agilent" (PDF) . Dako.com . Archivado desde el original (PDF) el 4 de marzo de 2016 . Consultado el 3 de diciembre de 2018 .
22. Wages ds, Wear dJ. Resistencia a los ácidos de los hongos en la blastomicosis y la histoplasmosis. Arch Pathol Lab Med 1982; 106:440-41.

Ejemplos de protocolos en línea

• Protocolo Ziehl–Neelsen ( formato PDF ).
• Método alternativo de Ellis y Zabrowarny Archivado el 4 de enero de 2006 en Wayback Machine para la tinción de AFB.