Transposasa

La palabra "transposasa" fue acuñada por primera vez por los individuos que clonaron la enzima requerida para transposición del transposón Tn3.Cuando este leucina es reemplazado con un residuo de la prolina la hélice alfa está rota, introducir un cambio conformacional en el dominio C-terminal, separándolo del dominio N-Terminal suficiente para promover una mayor actividad de la proteína.El motivo DDE se dice que coordinar los iones metálicos divalentes, más a menudo de magnesio y manganeso, que son importantes en la reacción catalítica porque la transposasa es increíblemente inactiva la región DDE está mutada así la transposasa llega a ser hiperactiva y cataliza el movimiento de los transposones.[5]​ Debido a las mutaciones del DDE, algunos pasos del proceso están perdidos—por ejemplo, cuándo este experimento está actuado en vitro, y SDS tratamiento de calor denatures la transposasa Aun así, es todavía incierto qué pasa la transposasa en vivo.El SB100X diseñado es una enzima que dirige los altos niveles de integración del transposón.Específicamente clasificado como elemento transponible(transposón), la secuencia puede duplicarse y moverse dentro de un genoma utilizando una enzima recombinasa autocodificada llamada transposasa, lo que tiene como resultado efectos tales como la creación o reversión de mutaciones y el cambio del tamaño del genoma.Sin embargo, Tn7 es único en el sentido de que también se transpone a alta frecuencia en un solo sitio específico en los cromosomas bacterianos llamado attTn7.Esta secuencia específica es un gen esencial y altamente conservado que se encuentra en muchas cepas de bacterias.Sin embargo, la recombinación no es perjudicial para la bacteria huésped, ya que Tn7 en realidad se transpone aguas abajo del gen después de reconocerlo, lo que da como resultado una forma segura de propagar el transposón sin matar al huésped.El transposón Tn7 codifica cinco proteínas: TnsA, TnsB, TnsC, TnsD y TnsE.La proteína TnsC interactúa con la enzima transposasa y el ADN objetivo para promover los procesos de escisión e inserción.Cuando la proteína TnsE interactúa con la maquinaria central de TnsABC, Tn7 dirige preferentemente las inserciones en plásmidos conjugables.Cuando la proteína TnsD interactúa con TnsABC, Tn7 preferentemente dirige las inserciones corriente abajo hacia un único sitio esencial y altamente conservado en el cromosoma bacteriano.