La serie se centra en el coro del ficticio instituto William McKinley, en la ciudad de Lima, Ohio.

[2]​ El episodio piloto cubre la formación de dicho grupo e introduce a los personajes principales: el profesor de español Will Schuester (Matthew Morrison) y su esposa Terri (Jessalyn Gilsig), la entrenadora de las animadoras Sue Sylvester (Jane Lynch), la orientadora estudiantil del instituto Emma Pillsbury (Jayma Mays), y los estudiantes Rachel Berry (Lea Michele), Finn Hudson (Cory Monteith), Kurt Hummel (Chris Colfer), Mercedes Jones (Amber Riley), Artie Abrams (Kevin McHale), Tina Cohen-Chang (Jenna Ushkowitz), Noah "Puck" Puckerman (Mark Salling) y Quinn Fabray (Dianna Agron).

[5]​[6]​ El profesor de español Will Schuester (Matthew Morrison) recibe la noticia de que a Sandy Ryerson (Stephen Tobolowsky), el jefe del coro del instituto William McKinley, ha sido despedido debido a un comportamiento inadecuado con sus alumnos masculinos.

Tras las audiciones iniciales, el coro pasa a estar formado por: Rachel Berry, una chica hambrienta de fama (Lea Michele), la diva Mercedes Jones (Amber Riley), Kurt Hummel (Chris Colfer), el guitarrista parapléjico Artie Abrams (Kevin McHale) y la gótica tartamuda Tina Cohen-Chang (Jenna Ushkowitz).

Los esfuerzos de Will son ridiculizados por Sue Sylvester (Jane Lynch), jefa del triunfante equipo de animadoras del instituto, mientras que su esposa Terry (Jessalyn Gilsig) tampoco lo apoya y le sugiere que se haga contable para aumentar sus ganancias.

Rachel amenaza con dejar el coro si Will no encuentra a un cantante masculino con un talento comparable al suyo.

Will pone marihuana en la taquilla de Finn y le chantajea diciendo que no se lo dirá a nadie si entra en el coro.

Los acompaña Emma Pillsbury (Jayma Mays), la orientadora misofóbica del instituto, que quiere a Will en secreto.

Finn pide perdón a los miembros del coro y el grupo decide seguir sin Will.

Murphy se inspiró en su propia infancia, ya que interpretó el papel principal en todos los musicales de su instituto.

Glee pertenece a un género diferente, no hay nada parecido emitiéndose por la internet ni por televisión.

Chris Colfer no tenía ninguna experiencia profesional previa, pero le recordó a Ryan el personaje de Kurt del musical The Sound of Music.

[34]​ David Hinckley de The Daily News escribió que el espectáculo «no es casi perfecto», pero «tiene personajes agradables, un buen sentido del humor y un toque muy hábil con la música».

[39]​ Maureen Ryan del Chicago Tribune comentó que: «los dos mayores números musicales son tremendamente entretenidos.

Están interpretados con energías distintas, y ponen en vergüenza a esos cánticos realizados por los participantes de American Idol»,[40]​ pero otra vez observó: «si va a funcionar como una comedia dramática irónica sobre el ambiente social y violento de la escuela secundaria es otra cosa».

el actor no sólo tiene una voz dulce, pero una esperanza decaida apaleado que le da un anclaje necesario para los elementos más satíricos de la serie Cory Monteith el mariscal de campo (Finn Hudson) el líder maduro mezclado con una ingenuidad y un gusto lamentable, y Lea Michele (Rachel Berry) no sólo tiene una voz increíble, pero se las arregla para hacer que su personaje, de diva malcriada, más que un estereotipo sin sentido del humor».