Conocido por sus actuaciones en el escenario y la pantalla, ganó prominencia por su papel de Mr.

En el cine, Macfadyen es conocido por sus papeles en Muerte en un funeral (2007), Frost/Nixon (2008), Anna Karenina (2012), The Assistant (2019) y Operation Mincemeat (2021) e interpretó a Mr.

[7]​ Asistió a escuelas en Inglaterra, incluso en Louth, Lincolnshire, así como en Escocia e Indonesia.

[8]​ Macfadyen se incorporó en la compañía teatral Cheek by Jowl y debutó en el teatro profesional con The Duchess of Malfi.

En 1998, con la compañía Cheek by Jowl, protagonizó Mucho ruido y pocas nueces, junto a Saskia Reeves.

Dicha producción llegó estar en cartel en Nueva York en la Brooklyn Academy of Music (BAM).

En 2001 trabajó en The Way We Live Now, y también en dicho año obtuvo gran aclamación por parte de la crítica por su papel de protagonista en Perfect Strangers, escrito y dirigido por Stephen Poliakoff.

Dicha serie fue emitida también en Estados Unidos como MI5 y en España con el título de Doble identidad.

[9]​ En 2008 apareció en la miniserie de la BBC Little Dorrit, interpretando a Arthur Clennam.

[10]​ Ese mismo año se unió al elenco de la serie Ripper Street, donde interpretó al detective inspector Edmund Reid[11]​ hasta el final de la serie, que concluyó su segunda temporada en 2013.