Actuó por vez primera en 1904 en el Teatro Lustspielhaus de Berlín.
En los años 1920 interpretó también algunos pequeños papeles en el cine, intensificándose su trayectoria a finales de esa década.
Lotte Spira encarnaba principalmente a damas de clase burguesa.
Debido a la presión Nazi y por ser su marido judío, ella se divorció en 1934.
Durante la Segunda Guerra Mundial, ella firmó una confesión en la que sostenía que el padre real de su hija Camilla, que se encontraba detenida en el campo de internamiento de Westerbork, en Holanda, no era Fritz Spira.