[2][3] La fuerte lluvia que cayó durante la prueba ocasionó serías dificultades a las participantes.
Sudáfrica (18.ª) y Nueva Zelanda (19.ª) recibieron una plaza en función de sus clasificaciones en el ranking UCI saltándose a Venezuela ya que esos países tenían 1 ciclista entre las 20 primeras de la Copa del Mundo, mientras que Mauricio recibió la última plaza disponible por invitación directa.
[13] Otras favoritas eran la líder del Ranking UCI, la neerlandesa Marianne Vos,[12] la británica Nicole Cooke,[12] quien había declarado que tenía una mayor confianza en su equipo que en 2004 cuando finalizó quinta en Ciclismo en ruta femenino en los Atenas y Noemi Cantele de Italia.
[12] El equipo australiano también se encontraba entre los favoritos a medalla puesto que estaba formado por Sara Carrigan, que defendía el título olímpico logrado cuatro años antes,[12] Oenone Wood , ganadora del Campeonato de Australia de ese año, y Katherine Bates.
[13][14] Muchas ciclistas esperaban unas condiciones climatológicas tropicales durante la carrera por lo que adecuaron su entrenamiento a esta situación.
[17][18] En la prueba masculina celebrada un día antes la humedad y el calor habían supuesto el mayor problema para los ciclistas.
[16] Por ello y para compensar el calor esperado algunas de las participantes decidieron no utilizar camisetas interiores bajo el maillot.
Al contrario que en los Juegos Olímpicos precedentes el inicio y el final de la carrera no se encontraban en el mismo lugar.