Un virus dependiente de un virus auxiliar , también denominado virus sin agallas , es un vector viral sintético que depende de la ayuda de un virus auxiliar para replicarse, [1] y puede utilizarse para fines como la terapia génica . Los virus satélites naturales también dependen de un virus auxiliar y, a veces, pueden modificarse para convertirse en vectores virales.
Dado que el genoma del virus gutless no incluye genes que codifiquen las enzimas y/o proteínas estructurales necesarias para replicarse, se considera seguro para su uso en terapia génica, ya que no puede producirse una infección excepto en presencia de un virus auxiliar adecuado. [2]
Los protocolos bien establecidos permiten a los científicos propagar virus dependientes de un auxiliar en el laboratorio. Sin embargo, el uso de un virus auxiliar real plantea problemas cuando se trata de la purificación de un virus transgénico deseado . Por lo tanto, los métodos de laboratorio a menudo utilizan fragmentos mínimos del ADN auxiliar que pueden cumplir este propósito sin crear virus no deseados. Este proceso generalmente implica la introducción de tres plásmidos de ADN separados en una línea celular eucariota a través de un proceso llamado transfección . Estos plásmidos contienen ADN transgénico o ADN que codifica la cápside y la replicación , además del ADN auxiliar. Cada célula que se transfecta con éxito con los tres fragmentos de ADN producirá las proteínas necesarias para producir virus infecciosos. Estos virus solo tendrán ADN transgénico encapsidado y, por lo tanto, una vez que hayan infectado la célula de un paciente, no serán capaces de reproducirse. [3]
Los virus dependientes de ayudantes también pueden aparecer en la naturaleza sin ser "destripados". El término virus satélite se ha dado a un gran grupo de virus que requieren la presencia de otro virus para replicarse. Muchos de ellos son virus de plantas, [4] pero se pueden ver virus animales en el caso de los dependovirus .
Dentro de la familia parvoviridae , el género dependovirus recibió una clasificación distinta debido a su dependencia de otro virus. El dependovirus más conocido es el virus adenoasociado (AAV), que se descubrió originalmente como un contaminante en una muestra de adenovirus de simio . [5] Aunque se considera que el AAV depende del adenovirus, es capaz de replicarse en presencia de herpesvirus , así como de ciertos eventos citotóxicos como la radiación UV o algunos carcinógenos. [6] Durante el curso de una infección natural por dependovirus, si el virus auxiliar no está presente, el dependovirus a menudo es capaz de integrarse en el genoma del huésped y entrar en una fase latente de su ciclo de vida, esperando efectivamente la siguiente infección por virus auxiliar. [6] Para usos de terapia génica, el vector se despoja de su capacidad de integración. Debido a que el AAV puede entregar material transgénico en una forma no replicante, es un fuerte candidato para la terapia génica y actualmente se utiliza en aproximadamente el 8% de los ensayos clínicos. [7]
El virus de la hepatitis D (VHD) es un ejemplo de virus de ARN monocatenario dependiente de un auxiliar y con problemas de replicación, ya que necesita que el virus de la hepatitis B (VHB) le proporcione el antígeno de superficie del VHB (HBsAg) para la encapsidación de su genoma. Las proteínas de la envoltura de la superficie externa del VHD son proporcionadas en su totalidad por el VHB.