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Tinción de Feulgen

Microfotografía en blanco y negro de glándulas salivales intactas de garrapatas infectadas por el virus de la garrapata del venado, teñidas con Feulgen . Acino salival hipotrofiado lleno de masas amorfas de material teñido de rosa (=Feulgen positivo) (flechas). Barra de escala = 10 μm.

La tinción de Feulgen es una técnica de tinción descubierta por Robert Feulgen y utilizada en histología para identificar material cromosómico o ADN en muestras de células. Se tiñe de un color oscuro. Depende de la hidrólisis ácida del ADN, por lo que se deben evitar los agentes fijadores que utilicen ácidos fuertes .

La muestra se somete a ácido clorhídrico tibio (60 °C) y luego a reactivo de Schiff . En el pasado, se realizaba un enjuague con sulfito , pero ahora se considera innecesario. Opcionalmente, la muestra se puede contrateñir con Light Green SF yellowish . Finalmente, se deshidrata con etanol , se aclara con xileno y se monta en un medio resinoso .

El ADN debe teñirse de rojo. El fondo, si se tiñe de rojo, es verde.

La reacción de Feulgen es una técnica semicuantitativa. Si los únicos aldehídos que quedan en la célula son los producidos a partir de la hidrólisis del ADN, entonces la técnica es cuantitativa para el ADN. Es posible utilizar un instrumento conocido como microdensitómetro o microespectrofotómetro para medir realmente la intensidad de la reacción rosa de Feulgen para un orgánulo determinado . Utilizando este procedimiento, se determinó tempranamente que las células en interfase estaban compuestas por dos poblaciones, aquellas con ADN diploide y aquellas con ADN tetraploide (dos genomas completos). Los núcleos parecían idénticos, pero uno contenía el doble de ADN. Esto dio lugar a la división del período de interfase del ciclo celular en fases G1, S y G2 basadas en la síntesis de ese ADN adicional. [1]

Referencias

  1. ^ "El procedimiento Feulgen para el ADN, Adolphus College". Archivado desde el original el 26 de enero de 2007. Consultado el 30 de agosto de 2006 .