La tinción supravital es un método de tinción utilizado en microscopía para examinar células vivas que han sido extraídas de un organismo. Se diferencia de la tinción intravital, que se realiza inyectando o introduciendo de otro modo la tinción en el cuerpo. Por tanto, una tinción supravital puede tener una mayor toxicidad , ya que sólo unas pocas células necesitan sobrevivir durante un breve periodo de tiempo. Algunos autores utilizan el término " tinción vital " para referirse específicamente a una tinción intravital, y otros indistintamente a una tinción supravital, siendo el concepto central que la célula que se examina todavía está viva. Como las células están vivas y no fijadas, fuera del cuerpo, las manchas supravitales son de naturaleza temporal. [1] [2]
La tinción supravital más común se realiza en reticulocitos utilizando azul de metileno nuevo o azul de cresilo brillante , lo que permite ver el patrón reticulofilamentoso de los ribosomas característicamente precipitados en estos glóbulos rojos vivos inmaduros por las tinciones supravitales. Contando el número de dichas células se puede determinar la tasa de formación de glóbulos rojos, lo que proporciona información sobre la actividad de la médula ósea y la anemia . [3] Esto contrasta con la tinción vital , cuando el tinte empleado es uno que se excluye de las células vivas, de modo que solo las células muertas se tiñen positivamente. (Las tinciones vitales incluyen tintes como el azul tripán y el yoduro de propidio , que son demasiado voluminosos o demasiado cargados para cruzar la membrana celular, o que las células vivas bombean activamente y rápidamente).
La tinción supravital se puede combinar con la tinción de anticuerpos de la superficie celular ( inmunofluorescencia ) para aplicaciones como el análisis FACS . [4] La inmunofluorescencia también se puede realizar en el interior de células vivas mediante permeabilización celular reversible utilizando el detergente Triton X-100 . Ajustado cuidadosamente a la concentración adecuada al número de células, el pretratamiento puede permitir el acceso de moléculas de entre 1 y 150 kilodaltons al interior de la célula. [5] Aunque los anticuerpos pueden usarse de manera similar en este contexto, el término "tinción supravital" generalmente se reserva para productos químicos más pequeños que poseen propiedades adecuadas intrínsecamente.
Tintes supravitales para glóbulos rojos: [6]
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