El pseudotipado es el proceso de producción de virus o vectores virales en combinación con proteínas extrañas de la envoltura viral . El resultado es una partícula de virus pseudotipada, también llamada pseudovirus . [1] Con este método, las proteínas de la envoltura viral extraña se pueden utilizar para alterar el tropismo del huésped o aumentar o disminuir la estabilidad de las partículas del virus. Las partículas pseudotipadas no transportan el material genético para producir proteínas de envoltura viral adicionales, por lo que los cambios fenotípicos no pueden transmitirse a las partículas virales de la progenie. En algunos casos, la incapacidad de producir proteínas de la envoltura viral hace que la replicación del pseudovirus sea incompetente . De esta manera, se pueden estudiar las propiedades de virus peligrosos en un entorno de menor riesgo. [2]
El pseudotipado permite controlar la expresión de las proteínas de la envoltura. Una proteína de uso frecuente es la glicoproteína G (VSV-G) del virus de la estomatitis vesicular (VSV), que media la entrada a través del receptor de LDL . Las proteínas de la envoltura incorporadas al pseudovirus permiten que el virus ingrese fácilmente a diferentes tipos de células con el correspondiente receptor del huésped .
Se pueden utilizar virus pseudotipados para vacunar animales contra proteínas expresadas en la envoltura del virión. [3] Este enfoque se ha utilizado para producir vacunas candidatas contra el VIH , [3] henipavirus Nipah , [2] lisavirus de la rabia , [4] SARS-CoV , [5] ebolavirus Zaire , [6] y SARS-CoV-2 . [7] El virus de la estomatitis vesicular recombinante: virus del Ébola de Zaire (rVSV-ZEBOV) fue creado por la Agencia de Salud Pública de Canadá (PHAC) y actualmente está autorizado en la Unión Europea y los Estados Unidos para la prevención de la enfermedad por el virus del Ébola (EVE) causada por Ébolavirus de Zaire .
Los virus pseudotipados, especialmente los virus pseudotipados que portan un gen de luciferasa recombinante (rLuc), se pueden utilizar para probar si un tratamiento puede proteger la infección de las células huésped. [8] Por ejemplo, se extrae sangre de un animal con inmunidad serológica a un virus. Se genera un pseudovirus separado con una proteína de envoltura del virus al que el animal tiene inmunidad. Además, el pseudovirus está diseñado para contener un gen de la luciferasa. Cuando la sangre extraída del animal se mezcla con el pseudovirus, los anticuerpos protectores se unen y neutralizan la proteína de la envoltura introducida. En el cultivo celular , se evitará que los pseudovirus neutralizados infecten las células y produzcan el producto del gen indicador luminiscente. Cuando se analizan, las muestras de cultivos celulares en las que hay presente un inhibidor eficaz del virus tendrán una luminiscencia reducida. [4]