La pseudotipificación es el proceso de producción de virus o vectores virales en combinación con proteínas de envoltura virales extrañas . El resultado es una partícula viral pseudotipada, también llamada pseudovirus . [1] Con este método, las proteínas de envoltura virales extrañas se pueden utilizar para alterar el tropismo del huésped o aumentar o disminuir la estabilidad de las partículas virales. Las partículas pseudotipadas no llevan el material genético para producir proteínas de envoltura viral adicionales, por lo que los cambios fenotípicos no se pueden transmitir a las partículas virales de la progenie. En algunos casos, la incapacidad de producir proteínas de envoltura viral hace que la replicación del pseudovirus sea incompetente . De esta manera, las propiedades de los virus peligrosos se pueden estudiar en un entorno de menor riesgo. [2]
La seudotipificación permite controlar la expresión de las proteínas de la envoltura. Una proteína que se utiliza con frecuencia es la glucoproteína G (VSV-G) del virus de la estomatitis vesicular (VSV), que media la entrada a través del receptor LDL . Las proteínas de la envoltura incorporadas al pseudovirus permiten que el virus entre fácilmente en diferentes tipos de células con el receptor huésped correspondiente .
El virus pseudotipado se puede utilizar para vacunar animales contra proteínas expresadas en la envoltura del virión. [3] Este enfoque se ha utilizado para producir vacunas candidatas contra el VIH , [3] el henipavirus Nipah , [2] el lisavirus de la rabia , [4] el SARS-CoV , [5] el ébolavirus de Zaire , [6] y el SARS-CoV-2 . [7] El virus de la estomatitis vesicular recombinante-virus del ébola de Zaire (rVSV-ZEBOV) fue creado por la Agencia de Salud Pública de Canadá (PHAC) y actualmente está autorizado en la Unión Europea y los Estados Unidos para la prevención de la enfermedad por el virus del Ébola (EVE) causada por el ébolavirus de Zaire .
Los virus pseudotipados, especialmente los virus pseudotipados que portan un gen de luciferasa recombinante (rLuc), se pueden utilizar para probar si un tratamiento puede proteger a las células huésped de la infección. [8] Por ejemplo, se extrae sangre de un animal con inmunidad serológica a un virus. Se genera un pseudovirus separado con una proteína de envoltura del virus al que el animal tiene inmunidad. El pseudovirus se modifica adicionalmente para que contenga un gen para la luciferasa. Cuando la sangre extraída del animal se mezcla con el pseudovirus, los anticuerpos protectores se unen y neutralizan la proteína de envoltura introducida. En el cultivo celular , se evitará que los pseudovirus neutralizados infecten las células y produzcan el producto del gen reportero luminiscente. Cuando se analizan las muestras de cultivo celular donde está presente un inhibidor eficaz del virus tendrán luminiscencia reducida. [4]