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Proteína fluorescente fotoactivable

Las proteínas fluorescentes fotoactivables (PAFP) son un tipo de proteína fluorescente que exhibe fluorescencia que puede modificarse mediante una reacción química inducida por la luz .

Historia

La primera PAFP, Kaede (proteína) , se aisló de Trachyphyllia geoffroyi en una pantalla de biblioteca de ADNc diseñada para identificar nuevas proteínas fluorescentes. [1] Se descubrió por casualidad que una proteína verde fluorescente derivada de esta pantalla tiene sensibilidad a la luz ultravioleta.

Sucedió que dejamos una de las alícuotas de proteínas en la mesa del laboratorio durante la noche. Al día siguiente, descubrimos que la muestra de proteína en el banco se había vuelto roja, mientras que las demás que estaban guardadas en una caja de papel permanecían verdes. Aunque el cielo estaba parcialmente nublado, la muestra roja había sido expuesta a la luz del sol a través de las ventanas orientadas al sur. [1]

Propiedades

Muchas PAFP se han diseñado a partir de proteínas fluorescentes existentes o se han identificado mediante pantallas a gran escala tras el descubrimiento de Kaede. Muchos de ellos se someten a fotoconversión de verde a rojo, pero hay otros colores disponibles. Algunas proteínas participan en reacciones de fotoconversión irreversibles, mientras que otras reacciones pueden revertirse utilizando luz de una longitud de onda específica.

Lista de PAFP

Aplicaciones

A diferencia de otras proteínas fluorescentes, las PAFP se pueden utilizar como marcadores ópticos selectivos. Se puede seguir una célula completamente marcada para evaluar la división, migración y morfología celular. Con un láser se pueden activar volúmenes muy pequeños que contienen PAFP. En estos casos, se puede evaluar el tráfico, la difusión y el recambio de proteínas.

Referencias

  1. ^ a b C Ando, ​​Ryoko; Hama, Hiroshi; Yamamoto-Hino, Miki; Mizuno, Hideaki; Miyawaki, Atsushi (1 de octubre de 2002). "Un marcador óptico basado en la fotoconversión de verde a rojo inducida por rayos UV de una proteína fluorescente". Procedimientos de la Academia Nacional de Ciencias . 99 (20): 12651–12656. Código bibliográfico : 2002PNAS...9912651A. doi : 10.1073/pnas.202320599 . ISSN  0027-8424. PMC  130515 . PMID  12271129.
  2. ^ Lukyanov, Konstantin A.; Chudakov, Dmitry M.; Lukyanov, Sergey; Verkhusha, Vladislav V. (noviembre de 2005). "Proteínas fluorescentes fotoactivables". Reseñas de la naturaleza Biología celular molecular . 6 (11): 885–890. doi :10.1038/nrm1741. ISSN  1471-0072. PMID  16167053. S2CID  23734846.
  3. ^ Wiedenmann, J.; Ivánchenko, S.; Oswald, F.; Schmitt, F.; Rockero, C.; Salih, A.; Spindler, K.-D.; Nienhaus, GU (9 de noviembre de 2004). "EosFP, una proteína marcadora fluorescente con conversión de fluorescencia de verde a rojo inducible por UV". Procedimientos de la Academia Nacional de Ciencias . 101 (45): 15905–15910. Código Bib : 2004PNAS..10115905W. doi : 10.1073/pnas.0403668101 . ISSN  0027-8424. PMC 528746 . PMID  15505211. 
  4. ^ Adán, Virgilio; Lelimousin, Mickaël; Boehme, Susan; Desfonds, Guillaume; Nienhaus, Karin; Campo, Martín J.; Wiedenmann, Jörg; McSweeney, Sean; Nienhaus, G. Ulrich; Burgués, Dominique (25 de noviembre de 2008). "Caracterización estructural de IrisFP, un resaltador óptico que sufre múltiples transformaciones fotoinducidas". Procedimientos de la Academia Nacional de Ciencias . 105 (47): 18343–18348. Código bibliográfico : 2008PNAS..10518343A. doi : 10.1073/pnas.0805949105 . ISSN  0027-8424. PMC 2587625 . PMID  19017808. 
  5. ^ Tsutsui, Hidekazu; Karasawa, Satoshi; Shimizu, Hideaki; Nukina, Nobuyuki; Miyawaki, Atsushi (marzo de 2005). "Ingeniería semirracional de una proteína fluorescente de coral en un resaltador eficiente". Informes EMBO . 6 (3): 233–238. doi :10.1038/sj.embor.7400361. ISSN  1469-221X. PMC 1299271 . PMID  15731765. 
  6. ^ Habuchi, Satoshi; Ando, ​​Ryoko; Dedecker, Peter; Verheijen, Wendy; Mizuno, Hideaki; Miyawaki, Atsushi; Hofkens, Johan (5 de julio de 2005). "Fotoconmutación reversible de una sola molécula en la proteína fluorescente Dronpa similar a GFP". Procedimientos de la Academia Nacional de Ciencias . 102 (27): 9511–9516. Código Bib : 2005PNAS..102.9511H. doi : 10.1073/pnas.0500489102 . ISSN  0027-8424. PMC 1157093 . PMID  15972810. 
  7. ^ Patterson, George H; Lippincott-Schwartz, Jennifer (abril de 2004). "Fotomarcado selectivo de proteínas mediante GFP fotoactivable". Métodos . 32 (4): 445–450. doi :10.1016/j.ymeth.2003.10.006. PMID  15003607.
  8. ^ Chudakov, Dmitriy M; Verjusha, Vladislav V; Staroverov, Dmitry B; Souslova, Ekaterina A; Lukyanov, Sergey; Lukyanov, Konstantin A (1 de noviembre de 2004). "Proteína fluorescente cian fotoconmutable para el seguimiento de proteínas". Biotecnología de la Naturaleza . 22 (11): 1435-1439. doi :10.1038/nbt1025. ISSN  1087-0156. PMID  15502815. S2CID  9597405.