La técnica de inmunoensayo multiplicado por enzimas ( EMIT ) es un método común para la determinación cualitativa y cuantitativa de drogas terapéuticas y recreativas y ciertas proteínas en suero y orina . [1]
Es un inmunoensayo en el que un fármaco o metabolito de la muestra compite con un fármaco/metabolito marcado con una enzima para unirse a un anticuerpo. Cuanto más fármaco haya en la muestra, más enzima libre habrá y el aumento de la actividad enzimática provocará un cambio de color. [2] : 70
La determinación de los niveles del fármaco en suero es particularmente importante cuando la diferencia en las concentraciones necesarias para producir un efecto terapéutico y reacciones secundarias adversas (la ventana terapéutica ) es pequeña. Las pruebas de seguimiento de fármacos terapéuticos del EMIT proporcionan información precisa sobre la concentración de fármacos como los inmunosupresores y algunos antibióticos. [3] [4]
Los ensayos de orina EMIT para drogas como cannabinoides, morfina y anfetamina están diseñados para detectar la droga en sí o un metabolito de la droga presente en una concentración superior a un límite mínimo de detección preespecificado. [5] En los EE. UU., los límites de corte deben establecerse de acuerdo con las pautas obligatorias para los programas federales de pruebas de drogas en el lugar de trabajo que fueron desarrolladas por SAMHSA (La Administración de Servicios de Salud Mental y Abuso de Sustancias es una rama del Departamento de Salud y Servicios Humanos de los EE. UU. ). El establecimiento de límites de corte razonables ayuda a reducir los resultados falsos positivos que se producen debido a las limitaciones del ensayo. Debido a las consecuencias sociales y legales, un resultado positivo de la prueba debe confirmarse mediante un método alternativo, generalmente cromatografía de gases/espectrometría de masas. Como ejemplo, los límites de SAMHSA para cannabinoides son 50 ng/ml para el inmunoensayo y 15 ng/ml según lo confirmado por GC/MS. [6] Se ha demostrado que los inmunoensayos que no cumplen con SAMHSA, con un límite de 20 ng/ml, producen falsos positivos por inhalación pasiva de humo de marihuana. [7]