stringtranslate.com

Nefelometría (medicina)

La nefelometría es una técnica utilizada en inmunología para determinar los niveles de varias proteínas del plasma sanguíneo. Por ejemplo, los niveles totales de isotipos o clases de anticuerpos : Inmunoglobulina M , Inmunoglobulina G e Inmunoglobulina A. [ 1] Es importante en la cuantificación de cadenas ligeras libres en enfermedades como el mieloma múltiple . La cuantificación es importante para la clasificación de la enfermedad y para el seguimiento de la enfermedad una vez que un paciente ha sido tratado (un mayor sesgo de la relación entre las cadenas ligeras kappa y lambda después de que un paciente haya sido tratado es una indicación de recurrencia de la enfermedad).

Se realiza midiendo la luz dispersa en un ángulo desde la muestra que se está midiendo. [2] En la nefelometría diagnóstica, la rama ascendente de la curva de Heidelberger-Kendall se extiende optimizando el curso de la reacción de modo que las señales de medición de la mayoría de las proteínas plasmáticas (de sangre humana) caigan en el lado izquierdo de la curva de Heidelberger-Kendall, incluso en concentraciones muy altas. [ cita requerida ]

Esta técnica se utiliza ampliamente en los laboratorios clínicos porque es relativamente fácil de automatizar. Se basa en el principio de que una suspensión diluida de partículas pequeñas dispersará la luz (normalmente un láser) que pasa a través de ella en lugar de simplemente absorberla. La cantidad de dispersión se determina recogiendo la luz en un ángulo (normalmente a 30 y 90 grados). [3]

El anticuerpo y el antígeno se mezclan en concentraciones tales que solo se forman pequeños agregados que no se depositan rápidamente en el fondo. La cantidad de dispersión de luz se mide y se compara con la cantidad de dispersión de mezclas conocidas. La cantidad de la sustancia desconocida se determina a partir de una curva estándar.

La nefelometría se puede utilizar para detectar antígenos o anticuerpos, pero generalmente se realiza con el anticuerpo como reactivo y el antígeno del paciente como el desconocido. [4] En el laboratorio médico de inmunología, se pueden realizar dos tipos de pruebas: "nefelometría de punto final" y "nefelometría cinética (de velocidad)".

Las pruebas de nefelometría de punto final se realizan dejando que la reacción anticuerpo/antígeno se complete (hasta que todos los anticuerpos reactivos presentes y los antígenos de la muestra del paciente actual que pueden agregarse lo hayan hecho y no se puedan formar más complejos). Sin embargo, las partículas grandes caerán de la solución y causarán una lectura de dispersión falsa, por lo que se ideó la nefelometría cinética.

En la nefelometría cinética, la tasa de dispersión se mide inmediatamente después de añadir el reactivo. Mientras el reactivo sea constante, la tasa de cambio puede considerarse directamente relacionada con la cantidad de antígeno presente.

Otras aplicaciones

Además de las aplicaciones médicas, la nefelometría se puede utilizar para medir la claridad del agua, [5] para medir el crecimiento de microorganismos [6] [7] y para probar la solubilidad de los fármacos. [3]

Véase también

Referencias

  1. ^ Enciclopedia MedlinePlus : 003545
  2. ^ Reese, Andy C.; Dolen, William K. (1998). "Capítulo 4: Reacciones antígeno-anticuerpo, nefelometría". Fundamentos de inmunología . Facultad de Medicina de Georgia. Archivado desde el original el 4 de septiembre de 2006.
  3. ^ ab "Nefelometría". BMG LabTech . 2022 . Consultado el 9 de noviembre de 2022 .
  4. ^ Stevens, Christine Dorresteyn (2010). Inmunología clínica y serología (3.ª ed.). FA Davis Company. pág. 127. ISBN 978-0803618145.
  5. ^ Fondriest Environmental, Inc. (5 de septiembre de 2014). "Medición de la turbidez, los sólidos en suspensión y la claridad del agua". Fundamentos de las mediciones ambientales . Consultado el 9 de noviembre de 2022 .
  6. ^ Thoré, Eli SJ; Schoeters, Floris; Spit, Jornt; Van Miert, Sabine (septiembre de 2021). "Monitoreo en tiempo real de biomasa de microalgas en fotobiorreactores a escala piloto mediante nefelometría". Procesos . 9 (9): 1530. doi : 10.3390/pr9091530 .
  7. ^ Mechsner, KL (1 de enero de 1984). "Un sistema nefelométrico automatizado para la evaluación del crecimiento de cultivos bacterianos". Analytica Chimica Acta . 163 : 85–90. Bibcode :1984AcAC..163...85M. doi :10.1016/S0003-2670(00)81496-8.