La HPPD se clasifica dentro de una clase de enzimas oxigenasas que generalmente utilizan α-cetoglutarato y oxígeno diatómico para oxigenar u oxidar una molécula objetivo. [5] Sin embargo, la HPPD difiere de la mayoría de las moléculas de esta clase debido al hecho de que no utiliza α-cetoglutarato, y solo utiliza dos sustratos mientras agrega ambos átomos de oxígeno diatómico al producto, homogentisato. [6] La reacción de HPPD ocurre a través de un desplazamiento NIH e implica la descarboxilación oxidativa de un ácido α-oxo, así como la hidroxilación del anillo aromático . El desplazamiento NIH, que se ha demostrado a través de estudios de marcado de isótopos, implica la migración de un grupo alquilo para formar un carbocatión más estable . El desplazamiento explica la observación de que C3 está unido a C4 en 4-hidroxifenilpiruvato pero a C5 en homogentisato. El mecanismo previsto de HPPD se puede ver en la siguiente figura:
Estructura
La HPPD es una enzima que normalmente se une para formar tetrámeros en bacterias y dímeros en eucariotas y tiene una masa de subunidad de 40-50 kDa. [7] [8] [9] Al dividir la enzima en el extremo N y el extremo C , se notará que el extremo N varía en composición mientras que el extremo C permanece relativamente constante [10] (el extremo C en las plantas difiere ligeramente del extremo C en otros seres). En 1999 se creó la primera estructura de cristalografía de rayos X de la HPPD [11] y desde entonces se ha descubierto que el sitio activo de la HPPD está compuesto enteramente de residuos cerca del extremo C de la enzima. El sitio activo de la HPPD no ha sido completamente mapeado, pero se sabe que el sitio consiste en un ion de hierro rodeado de aminoácidos que se extienden hacia adentro desde las láminas beta (con la excepción de la hélice del extremo C). Aunque se sabe aún menos sobre la función del extremo N de la enzima, los científicos han descubierto que un solo cambio de aminoácido en la región N-terminal puede causar la enfermedad conocida como hawkinsinuria . [12]
Función
En casi todos los seres aeróbicos, la 4-hidroxifenilpiruvato dioxigenasa es responsable de convertir el 4-hidroxifenilpiruvato en homogentisato . [13] Esta conversión es uno de los muchos pasos en la descomposición de la L -tirosina en acetoacetato y fumarato . [14] Si bien los productos generales de este ciclo se utilizan para crear energía, las plantas y los eucariotas de orden superior utilizan la HPPD por una razón mucho más importante. En los eucariotas, la HPPD se utiliza para regular los niveles de tirosina en sangre, y las plantas utilizan esta enzima para ayudar a producir los cofactores plastoquinona y tocoferol que son esenciales para que la planta sobreviva. [15]
Relevancia de la enfermedad
La HPPD puede estar relacionada con uno de los trastornos metabólicos hereditarios más antiguos conocidos, conocido como alcaptonuria , que es causado por altos niveles de homogentisato en el torrente sanguíneo. [16] La HPPD también está directamente relacionada con la tirosinemia tipo III [17] Cuando la concentración de la enzima HPPD activa es baja en el cuerpo humano, da como resultado altos niveles de concentración de tirosina en la sangre, lo que puede causar retraso mental leve al nacer y degradación de la visión a medida que el paciente envejece. [18]
En la tirosinemia de tipo I , una enzima diferente, la fumarilacetoacetato hidrolasa, está mutada y no funciona, lo que lleva a la acumulación de productos muy dañinos en el cuerpo. [19] La fumarilacetoacetato hidrolasa actúa sobre la tirosina después de que lo haga la HPPD, por lo que los científicos que trabajan en la fabricación de herbicidas en la clase de inhibidores de la HPPD plantearon la hipótesis de que inhibir la HPPD y controlar la tirosina en la dieta podría tratar esta enfermedad. Se intentó una serie de pequeños ensayos clínicos con uno de sus compuestos, la nitisinona , que tuvieron éxito, lo que llevó a que la nitisinona se comercializara como un medicamento huérfano . [20] [21]
Relevancia industrial
Debido al papel de la HPPD en la producción de cofactores necesarios en las plantas, existen varios herbicidas inhibidores de HPPD comercializados que bloquean la actividad de esta enzima y se están realizando investigaciones para encontrar otros nuevos. [22] [23]
Referencias
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Lectura adicional
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