Prueba de fijación del complemento

Esquema de una prueba de fijación del complemento.

La prueba de fijación del complemento es una prueba médica inmunológica que se puede utilizar para detectar la presencia de un anticuerpo específico o de un antígeno específico en el suero de un paciente , en función de si se produce la fijación del complemento . Se utilizó ampliamente para diagnosticar infecciones, en particular con microbios que no se detectan fácilmente mediante métodos de cultivo, y en enfermedades reumáticas. Sin embargo, en los laboratorios de diagnóstico clínico ha sido ampliamente reemplazada por otros métodos serológicos como ELISA y por métodos de detección de patógenos basados ​​en ADN, en particular PCR .

Proceso

El sistema del complemento es un sistema de proteínas séricas que reaccionan con complejos antígeno-anticuerpo. Si esta reacción ocurre en la superficie celular, dará como resultado la formación de poros transmembrana y, por lo tanto, la destrucción de la célula. Los pasos básicos de una prueba de fijación del complemento son los siguientes: ^[1]

1. El suero se separa del paciente.
2. Naturalmente, los pacientes tienen diferentes niveles de proteínas del complemento en el suero. Para evitar cualquier efecto que esto pueda tener en la prueba, las proteínas del complemento en el suero del paciente deben destruirse y reemplazarse por una cantidad conocida de proteínas del complemento estandarizadas.
   1. El suero se calienta de tal manera que se destruyen todas las proteínas del complemento (pero ninguno de los anticuerpos) que contiene (esto es posible porque las proteínas del complemento son mucho más susceptibles a la destrucción por el calor que los anticuerpos).
   2. Se añade al suero una cantidad conocida de proteínas estándar del complemento (estas proteínas se obtienen con frecuencia del suero de cobaya).
3. Se añade el antígeno de interés al suero.
4. Se añaden al suero glóbulos rojos de carnero (RBCs) ^[2] que se han unido previamente a anticuerpos antiRBCs. La prueba se considera negativa si la solución se vuelve rosada en este punto y positiva en caso contrario.

Si el suero del paciente contiene anticuerpos contra el antígeno de interés, estos se unirán al antígeno en el paso 3 para formar complejos antígeno-anticuerpo. Las proteínas del complemento reaccionarán con estos complejos y se agotarán. Por lo tanto, cuando se añaden los complejos sRBC-anticuerpo en el paso 4, no quedará complemento en el suero. Sin embargo, si no hay anticuerpos contra el antígeno de interés, el complemento no se agotará y reaccionará con los complejos sRBC-anticuerpo añadidos en el paso 4, lisando los sRBC y derramando su contenido en la solución, lo que torna la solución rosada. ^[1]

Prueba de antígeno

Si bien la detección de anticuerpos es el formato de prueba más común, también es posible detectar la presencia de antígeno. En este caso, el suero del paciente se complementa con un anticuerpo específico para inducir la formación de complejos; la adición de complemento y de glóbulos rojos indicadores se realiza como antes. ^{[ cita requerida ]}

Pruebas semicuantitativas

La prueba se puede hacer cuantitativa estableciendo una serie de diluciones del suero del paciente y determinando el factor de dilución más alto que aún dará como resultado una prueba de FC positiva. Este factor de dilución corresponde al título . ^{[ cita requerida ]}

Referencias

1. "Cuestionario de animación 4: Prueba de fijación del complemento". highered.mheducation.com .
2. C. Vaman Rao (2005). Inmunología: un libro de texto. Alpha Science Int'l Ltd. págs. 112–. ISBN 978-1-84265-255-8. Recuperado el 3 de diciembre de 2010 .

Enlaces externos

• Pruebas de fijación del complemento en los encabezados de materias médicas (MeSH) de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU.