Espectrometría de movilidad iónica ( IMS ) Es un método para realizar investigaciones analíticas que separa e identifica moléculas ionizadas presentes en la fase gaseosa en función de la movilidad de las moléculas en un gas tampón portador. Aunque se utiliza ampliamente para objetivos militares o de seguridad, como la detección de drogas y explosivos, la tecnología también tiene muchas aplicaciones en análisis de laboratorio, incluido el estudio de biomoléculas grandes y pequeñas. [1] Los instrumentos IMS son dispositivos independientes extremadamente sensibles, pero a menudo se combinan con espectrometría de masas , cromatografía de gases o cromatografía líquida de alto rendimiento para lograr una separación multidimensional. Vienen en varios tamaños, desde unos pocos milímetros hasta varios metros, según la aplicación específica, y son capaces de funcionar en una amplia gama de condiciones. Los instrumentos IMS, como la espectrometría de movilidad iónica de forma de onda asimétrica de campo alto a microescala , pueden ser portátiles para su uso en una variedad de aplicaciones que incluyen el monitoreo de compuestos orgánicos volátiles (COV), el análisis de muestras biológicas, el diagnóstico médico y el monitoreo de la calidad de los alimentos. [2] Los sistemas que funcionan a presión más alta (es decir, condiciones atmosféricas, 1 atm o 1013 hPa) suelen ir acompañados de temperaturas elevadas (por encima de 100 °C), mientras que los sistemas de presión más baja (1-20 hPa) no requieren calefacción. [ cita necesaria ]
IMS fue desarrollado por primera vez principalmente por Earl W. McDaniel del Instituto de Tecnología de Georgia en las décadas de 1950 y 1960, cuando utilizó células de deriva con campos eléctricos aplicados bajos para estudiar las reacciones y movilidades de los iones en fase gaseosa. [3] En las décadas siguientes, integró la tecnología recientemente desarrollada en la que había estado trabajando con un espectrómetro de masas de sector magnético. Durante este período, otros también utilizaron sus técnicas de maneras novedosas y originales. Desde entonces, las células IMS se han incluido en diversas configuraciones de espectrómetros de masas, cromatógrafos de gases e instrumentos de cromatografía líquida de alto rendimiento. IMS es un método utilizado en múltiples contextos y la variedad de aplicaciones que puede admitir, además de sus capacidades, se amplía continuamente.
Quizás el mayor punto fuerte de la espectrometría de movilidad iónica sea la velocidad a la que se producen las separaciones, normalmente del orden de decenas de milisegundos. Esta característica, combinada con su facilidad de uso, sensibilidad relativamente alta y diseño altamente compacto, ha permitido que el IMS como producto comercial se utilice como herramienta de rutina para la detección de explosivos , drogas y armas químicas en el campo . Los principales fabricantes de dispositivos de detección IMS utilizados en aeropuertos son Morpho y SmithsDetection . Smiths compró MorphoDetection en 2017 y posteriormente tuvo que vender legalmente la propiedad de la parte Trace del negocio (Smiths tiene Trace Products) [4] que se vendió a Rapiscan Systems a mediados de 2017. Los productos se enumeran en ETD Itemisers. El último modelo es un 4DX sin radiación.
En la industria farmacéutica, IMS se utiliza en validaciones de limpieza , lo que demuestra que los recipientes de reacción están lo suficientemente limpios para continuar con el siguiente lote de producto farmacéutico. IMS es mucho más rápido y preciso que el HPLC y los métodos de carbono orgánico total utilizados anteriormente. IMS también se utiliza para analizar la composición de los medicamentos producidos, encontrando así un lugar en el control y garantía de calidad. [5]
Como herramienta de investigación, la movilidad iónica se utiliza cada vez más en el análisis de materiales biológicos, específicamente en proteómica y metabolómica . Por ejemplo, IMS-MS que utiliza MALDI como método de ionización ha ayudado a lograr avances en proteómica, proporcionando separaciones más rápidas y de alta resolución de piezas de proteínas en el análisis. [6] Además, es una herramienta realmente prometedora para la glucómica , ya que se pueden obtener valores de sección transversal de colisión (CCS) promediados rotacionalmente. Los valores de CCS son características distintivas importantes de los iones en la fase gaseosa y, además de las determinaciones empíricas, también se pueden calcular computacionalmente cuando se conoce la estructura tridimensional de la molécula. De esta manera, agregar valores CCS de glicanos y sus fragmentos a las bases de datos aumentará la confianza y precisión de la identificación estructural. [7]
Fuera de los fines de laboratorio, IMS ha encontrado un gran uso como herramienta de detección de sustancias peligrosas. Más de 10.000 dispositivos IMS se utilizan en aeropuertos de todo el mundo, y el ejército de EE. UU. tiene más de 50.000 dispositivos IMS. [8] [9] En entornos industriales, los usos del IMS incluyen verificar la limpieza del equipo y detectar el contenido de las emisiones, como determinar la cantidad de ácido clorhídrico y fluorhídrico en un gas de chimenea de un proceso. [10] También se aplica con fines industriales para detectar sustancias nocivas en el aire. [11]
En metabolómica , el IMS se utiliza para detectar cáncer de pulmón , enfermedad pulmonar obstructiva crónica , sarcoidosis , posibles rechazos después de un trasplante de pulmón y relaciones con bacterias dentro del pulmón (ver análisis de gases espirados ).
La cantidad física de movilidad iónica K se define como el factor de proporcionalidad entre la velocidad de deriva de un ion v d en un gas y un campo eléctrico de intensidad E.
Después de hacer los ajustes necesarios para tener en cuenta la densidad del gas estándar n0, las movilidades de los iones a menudo se expresan como movilidades reducidas. Este número también puede describirse como temperatura estándar T0 = 273 K y presión estándar p0 = 1013 hPa. Ambos se pueden encontrar en la siguiente tabla. Las concentraciones de iones son otro término que puede usarse cuando se hace referencia a la movilidad de los iones. Debido a esto, la disminución de la movilidad de los iones sigue dependiendo de la temperatura, aunque este ajuste no considera ningún impacto distinto de la reducción de la densidad del gas.
La movilidad del ion K puede calcularse, bajo diversas suposiciones, mediante la ecuación de Mason-Schamp.
donde Q es la carga del ion , n es la densidad numérica del gas de deriva , μ es la masa reducida del ion y las moléculas del gas de deriva, k es la constante de Boltzmann , T es la temperatura del gas de deriva y σ es la sección transversal de colisión entre las ion y las moléculas de gas a la deriva. A menudo, se utiliza N en lugar de n para la densidad numérica del gas de deriva y Ω en lugar de σ para la sección transversal de colisión ion-neutral. Esta relación se mantiene aproximadamente en un límite bajo del campo eléctrico, donde la relación E/N es pequeña y, por tanto, la energía térmica de los iones es mucho mayor que la energía obtenida del campo eléctrico entre colisiones. Dado que estos iones tienen energías similares a las de las moléculas del gas amortiguador, en este caso las fuerzas de difusión dominan el movimiento de los iones. La relación E/N normalmente se da en Townsends (Td) y normalmente se estima que la transición entre condiciones de campo bajo y alto ocurre entre 2 Td y 10 Td. [12] Cuando ya no prevalecen las condiciones de campo bajo, la propia movilidad de los iones pasa a ser una función de la intensidad del campo eléctrico, que normalmente se describe empíricamente mediante la llamada función alfa.
Las moléculas de la muestra deben ionizarse , generalmente mediante descarga de corona , fotoionización a presión atmosférica (APPI), ionización por electropulverización (ESI) o ionización química radiactiva a presión atmosférica (R-APCI), por ejemplo, un pequeño trozo de 63 Ni o 241 Am , similar al utilizado en los detectores de humo por ionización . [13] Las técnicas ESI y MALDI se utilizan comúnmente cuando IMS se combina con espectrometría de masas.
A veces se añaden materiales dopantes al gas de deriva para lograr selectividad de ionización. Por ejemplo, se puede agregar acetona para la detección de agentes de guerra química, solventes clorados para explosivos y nicotinamida para la detección de drogas. [14]
Los espectrómetros de movilidad iónica existen según varios principios, optimizados para diferentes aplicaciones. Una revisión de 2014 enumera ocho conceptos diferentes de espectrometría de movilidad iónica. [15]
La espectrometría de movilidad de iones de tubo de deriva (DTIMS) mide cuánto tiempo tarda un ion determinado en atravesar una longitud determinada en un campo eléctrico uniforme a través de una atmósfera determinada. En intervalos especificados, se deja entrar una muestra de los iones en la región de deriva; El mecanismo de activación se basa en un electrodo cargado que funciona de manera similar a como funciona la rejilla de control en los triodos para los electrones. Para un control preciso del ancho del pulso de iones admitido en el tubo de deriva, se emplean sistemas de compuerta más complejos, como Bradbury-Nielsen o Field Switching Shutter. Una vez en el tubo de deriva, los iones se someten a un campo eléctrico homogéneo que varía desde unos pocos voltios por centímetro hasta muchos cientos de voltios por centímetro. Luego, este campo eléctrico impulsa los iones a través del tubo de deriva, donde interactúan con las moléculas de deriva neutras contenidas dentro del sistema y se separan según la movilidad de los iones , llegando al detector para su medición. Los iones se registran en el detector en orden del más rápido al más lento, generando una señal de respuesta característica de la composición química de la muestra medida.
La movilidad del ion K puede entonces determinarse experimentalmente a partir del tiempo de deriva t D de un ion que atraviesa dentro de un campo eléctrico homogéneo la diferencia de potencial U en la longitud de deriva L .
El poder de resolución de un tubo de deriva, RP , puede, cuando se supone que la difusión es el único contribuyente al ensanchamiento del pico, calcularse como
donde t D es el tiempo de deriva de iones, Δt D es el ancho total a la mitad del máximo , L es la longitud del tubo, E es la intensidad del campo eléctrico, Q es la carga de iones, k es la constante de Boltzmann y T es la temperatura del gas de deriva. . Los métodos de presión ambiental permiten un mayor poder de resolución y una mayor selectividad de separación debido a una mayor tasa de interacciones ion-molécula y generalmente se usan para dispositivos independientes, así como para detectores de cromatografía de gases, líquidos y fluidos supercríticos. Como se muestra arriba, el poder de resolución depende de la caída de voltaje total que atraviesa el ion. Usando un voltaje de deriva de 25 kV en un tubo de deriva de presión atmosférica de 15 cm de largo, se puede lograr un poder de resolución superior a 250 incluso para iones pequeños con una sola carga. [16] Esto es suficiente para lograr la separación de algunos isotopólogos en función de su diferencia en la masa reducida μ. [17]
Los tubos de deriva de presión reducida funcionan utilizando los mismos principios que sus homólogos de presión atmosférica, pero con una presión de gas de deriva de sólo unos pocos torr. Debido al número muy reducido de interacciones ion-neutro, se necesitan tubos de deriva mucho más largos o obturadores de iones mucho más rápidos para lograr el mismo poder de resolución. Sin embargo, la operación a presión reducida ofrece varias ventajas. En primer lugar, facilita la interconexión del IMS con la espectrometría de masas. [3] En segundo lugar, a presiones más bajas, los iones pueden almacenarse para su inyección desde una trampa de iones [18] y reenfocarse radialmente durante y después de la separación. En tercer lugar, se pueden lograr valores elevados de E/N , lo que permite la medición directa de K ( E/N ) en un amplio rango. [19]
Aunque los campos eléctricos de deriva son normalmente uniformes, también se pueden utilizar campos de deriva no uniformes. Un ejemplo es el IMS de onda viajera, [20] que es un IMS con tubo de deriva de baja presión en el que el campo eléctrico sólo se aplica en una pequeña región del tubo de deriva. Luego, esta región se mueve a lo largo del tubo de deriva, creando una onda que empuja los iones hacia el detector, eliminando la necesidad de un voltaje de deriva total alto. No es posible determinar directamente las secciones transversales de colisión (CCS) utilizando TWIMS. Los calibrantes pueden ayudar a evitar este importante inconveniente; sin embargo, deben coincidir en tamaño, carga y clase química del analito determinado. [21] Una variante especialmente digna de mención es el "SUPER" IMS, [22] que combina la captura de iones mediante las llamadas estructuras para manipulaciones de iones sin pérdidas (SLIM) con varios pasos a través de la misma región de deriva para lograr poderes de resolución extremadamente altos.
En la espectrometría de movilidad de iones atrapados (TIMS), los iones se mantienen estacionarios (o atrapados) en un gas tampón que fluye mediante un perfil de gradiente de campo eléctrico axial (EFG), mientras que la aplicación de potenciales de radiofrecuencia (rf) da como resultado un atrapamiento en la dimensión radial. [23] TIMS opera en el rango de presión de 2 a 5 hPa y reemplaza el embudo de iones que se encuentra en la región fuente de los espectrómetros de masas modernos. Se puede acoplar con casi cualquier analizador de masas a través del modo de operación estándar para instrumentos de tipo haz o del modo de acumulación selectiva (SA-TIMS) cuando se usa con instrumentos de espectrometría de masas (MS) de captura.
Efectivamente, la celda de deriva se prolonga mediante el movimiento de iones creado a través del flujo de gas. [24] Por lo tanto, los dispositivos TIMS no requieren gran tamaño ni alto voltaje para lograr una alta resolución, por ejemplo logrando más de 250 poderes de resolución desde un dispositivo de 4,7 cm mediante el uso de tiempos de separación extendidos. [25] Sin embargo, el poder de resolución depende en gran medida de la movilidad del ion y disminuye para iones más móviles. Además, TIMS puede tener una mayor sensibilidad que otros sistemas de movilidad de iones porque no existen rejillas ni obturadores en la ruta de los iones, lo que mejora la transmisión de iones tanto durante los experimentos de movilidad de iones como mientras opera en un modo MS transparente únicamente.
DMS (espectrómetro de movilidad diferencial) o FAIMS ( espectrómetro de movilidad de iones asimétricos de campo ) aprovechan la dependencia de la movilidad de iones K de la intensidad del campo eléctrico E en campos eléctricos elevados. Los iones son transportados a través del dispositivo por el flujo de gas a la deriva y sometidos a diferentes intensidades de campo en dirección ortogonal durante diferentes períodos de tiempo. Los iones se desvían hacia las paredes del analizador en función del cambio de su movilidad. De este modo, sólo los iones con una cierta dependencia de la movilidad pueden pasar el filtro así creado.
Un analizador de movilidad diferencial ( DMA ) utiliza una corriente de gas rápida perpendicular al campo eléctrico. De este modo, los iones de diferentes movilidades siguen diferentes trayectorias. Este tipo de IMS corresponde a los instrumentos del sector en espectrometría de masas . También funcionan como filtro escaneable. Los ejemplos incluyen el detector de movilidad diferencial comercializado por primera vez por Varian en el MicroGC CP-4900. Aspiration IMS funciona con circulación de circuito abierto de aire muestreado. El flujo de muestra pasa a través de una cámara de ionización y luego ingresa al área de medición donde los iones se desvían hacia uno o más electrodos de medición mediante un campo eléctrico perpendicular que puede ser estático o variable. La salida del sensor es característica de la distribución de la movilidad de los iones y puede utilizarse con fines de detección e identificación.
Un DMA puede separar partículas o iones de aerosol cargados según su movilidad en un campo eléctrico antes de su detección, lo que se puede hacer con varios medios, incluidos electrómetros o los más sofisticados espectrómetros de masas. [26] [27] [28]
La composición del gas de deriva es un parámetro importante para el diseño y la resolución de los instrumentos del SIV. A menudo, diferentes composiciones de gas de deriva pueden permitir la separación de picos que de otro modo se superpondrían. [29] La temperatura elevada del gas ayuda a eliminar grupos de iones que pueden distorsionar las mediciones experimentales. [30] [31]
A menudo, el detector es una simple placa de Faraday acoplada a un amplificador de transimpedancia ; sin embargo, los instrumentos de movilidad iónica más avanzados se combinan con espectrómetros de masas para obtener información sobre el tamaño y la masa simultáneamente. Es de destacar que el detector influye en las condiciones operativas óptimas para el experimento de movilidad iónica. [32]
IMS se puede combinar con otras técnicas de separación.
Cuando el IMS se combina con la cromatografía de gases, la introducción de la muestra común se realiza con la columna capilar del GC conectada directamente a la configuración del IMS, con las moléculas ionizadas a medida que eluyen del GC. [14] Una técnica similar se utiliza comúnmente para HPLC . En 2012 se produjo un diseño novedoso para la espectrometría de movilidad de iones de ionización por descarga de corona (CD-IMS) como detector después de la cromatografía de gases capilar. En este diseño, se utilizó una aguja hueca para la creación de la descarga de corona y el efluente se ingresó en la región de ionización. en el lado aguas arriba de la fuente de corona. Además de las conveniencias prácticas de acoplar el capilar a la celda IMS, esta interfaz axial directa nos ayuda a lograr una ionización más eficiente, lo que resulta en una mayor sensibilidad.
Cuando se utiliza con GC, un analizador de movilidad diferencial a menudo se denomina detector de movilidad diferencial ( DMD ). [33] Un DMD es a menudo un tipo de sistema microelectromecánico , dispositivo de espectrometría de movilidad iónica modulada por radiofrecuencia (MEMS RF-IMS). [34] Aunque es pequeño, puede caber en unidades portátiles, como cromatógrafos de gases transferibles o sensores de drogas/explosivos. Por ejemplo, Varian lo incorporó en su CP-4900 DMD MicroGC y Thermo Fisher en su sistema EGIS Defender, diseñado para detectar narcóticos y explosivos en el transporte u otras aplicaciones de seguridad.
Junto con la LC y la MS, la IMS se ha utilizado ampliamente para analizar biomoléculas, una práctica muy desarrollada por David E. Clemmer , ahora en la Universidad de Indiana (Bloomington) . [35]
Cuando se utiliza IMS con espectrometría de masas, la espectrometría de masas de movilidad iónica ofrece muchas ventajas, incluida una mejor relación señal-ruido, separación de isómeros e identificación del estado de carga. [3] [36] IMS comúnmente se ha conectado a varios analizadores de espectrometría de masas, incluidos los de cuadripolo, de tiempo de vuelo y de resonancia de ciclotrón por transformada de Fourier.
La espectrometría de masas de movilidad iónica es una técnica de análisis de iones en fase gaseosa popularizada recientemente. Como tal, no existe una gran oferta de software para mostrar y analizar datos espectrométricos de masas de movilidad iónica, aparte de los paquetes de software que se envían junto con los instrumentos. ProteoWizard, [37] OpenMS, [38] y msXpertSuite [39] son software libre según la definición de OpenSourceInitiative. Si bien ProteoWizard y OpenMS tienen funciones que permiten el escrutinio del espectro, esos paquetes de software no ofrecen funciones combinadas. Por el contrario, msXpertSuite presenta la capacidad de combinar espectros según varios criterios: tiempo de retención, rango m/z, rango de tiempo de deriva, por ejemplo. Por lo tanto, msXpertSuite imita más fielmente el software que normalmente viene incluido con el espectrómetro de masas.