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elución

Principio de elución de la cromatografía en columna.

En química analítica y orgánica , la elución es el proceso de extraer un material de otro mediante lavado con un disolvente: lavado de resinas de intercambio iónico cargadas para eliminar iones capturados, o elución de proteínas de una electroforesis en gel o una columna de cromatografía .

En un experimento de cromatografía líquida , por ejemplo, un analito generalmente es adsorbido ("unido a") un adsorbente en una columna de cromatografía líquida. El adsorbente, una fase sólida (fase estacionaria), es un polvo que se recubre sobre un soporte sólido. Según la composición de un adsorbente, puede tener distintas afinidades para "retener" otras moléculas, formando una película delgada sobre la superficie de sus partículas. Entonces, la elución es el proceso de eliminar analitos del adsorbente haciendo pasar un disolvente, llamado "eluyente", más allá del complejo adsorbente/analito. A medida que las moléculas de disolvente "eluyen" o viajan hacia abajo a través de la columna de cromatografía, pueden pasar por el complejo adsorbente/analito o desplazar el analito uniéndose al adsorbente en su lugar. Después de que las moléculas de disolvente desplazan el analito, el analito se puede sacar de la columna para su análisis. Esta es la razón por la que, cuando la fase móvil sale de la columna, normalmente fluye hacia un detector o se recoge para el análisis de composición.

Predecir y controlar el orden de elución es un aspecto clave de los métodos cromatográficos y electroforéticos en columna .

Serie eluotrópica

Una serie eluotrópica es una lista de varios compuestos en orden de poder de elución para un adsorbente determinado . El "poder de elución" de un disolvente es en gran medida una medida de qué tan bien el disolvente puede "extraer" un analito del adsorbente al que está unido. Esto sucede a menudo cuando el eluyente se adsorbe en la fase estacionaria, desplazando al analito. Estas series son útiles para determinar los disolventes necesarios para la cromatografía de compuestos químicos. Normalmente, una serie de este tipo progresa desde disolventes no polares, como el n-hexano , hasta disolventes polares como el metanol o el agua . El orden de los disolventes en una serie eluotrópica depende tanto de la fase estacionaria como del compuesto utilizado para determinar el orden.

eluyente

El eluyente o eluyente es la porción "portadora" de la fase móvil. Mueve los analitos a través del cromatógrafo . En cromatografía líquida , el eluyente es el disolvente líquido; en cromatografía de gases , es el gas portador. [1]

eluato

El eluato es el material analito que emerge del cromatógrafo . Incluye específicamente tanto los analitos como los solutos que pasan a través de la columna, mientras que el eluyente es sólo el portador.

Tiempo de elución y volumen de elución.

El " tiempo de elución" de un soluto es el tiempo entre el inicio de la separación (el momento en que el soluto ingresa a la columna) y el momento en que el soluto eluye. De la misma manera, el volumen de elución es el volumen de eluyente necesario para provocar la elución. En condiciones estándar para una mezcla conocida de solutos en una técnica determinada, el volumen de elución puede ser información suficiente para identificar solutos. Por ejemplo, una mezcla de aminoácidos se puede separar mediante cromatografía de intercambio iónico . Bajo un conjunto particular de condiciones, los aminoácidos eluirán en el mismo orden y con el mismo volumen de elución.

elución de anticuerpos

La elución de anticuerpos es el proceso de eliminación de anticuerpos que están adheridos a sus objetivos, como la superficie de los glóbulos rojos . Las técnicas incluyen el uso de calor, un ciclo de congelación/descongelación, ultrasonido, ácidos o disolventes orgánicos. Ningún método es mejor en todas las situaciones. [2]

Ver también

Referencias

  1. ^ "Libro de oro de la IUPAC: eluyente". Unión internacional de Química Pura Aplicada. doi : 10.1351/goldbook.E02040 . Consultado el 28 de septiembre de 2008 . {{cite journal}}: Citar diario requiere |journal=( ayuda )
  2. ^ George H. Roberts (2006). «Técnicas de Elución en Banco de Sangre» (PDF) . Tecnólogos médicos estadounidenses (AMT) . Archivado desde el original (PDF) el 11 de julio de 2019 . Consultado el 22 de julio de 2020 .

enlaces externos