El tiocianato de guanidinio (GTC) o isotiocianato de guanidinio ( GITC ) es un compuesto químico utilizado como desnaturalizante general de proteínas, siendo un agente caotrópico , aunque se utiliza más comúnmente como protector de ácidos nucleicos en la extracción de ADN y ARN de las células. [1]
GITC también puede reconocerse como tiocianato de guanidina . Esto se debe a que el guanidinio es el ácido conjugado de la guanidina y se llama catión guanidinio , [CH 6 N 3 ] + .
El tiocianato de guanidinio se puede utilizar para desactivar un virus , como el virus de la gripe que causó la " gripe española " de 1918, de modo que pueda estudiarse de forma segura.
El tiocianato de guanidinio también se utiliza para lisar células y partículas de virus en extracciones de ARN y ADN, donde su función, además de su acción lisante, es prevenir la actividad de las enzimas RNasa y DNasa desnaturalizándolas. De lo contrario, estas enzimas dañarían el extracto.
Un método comúnmente utilizado es la extracción con tiocianato de guanidinio-fenol-cloroformo . No es estrictamente necesario utilizar fenol o cloroformo si se extrae ARN para transferencia Northern o ADN para análisis de transferencia Southern porque la electroforesis en gel seguida de la transferencia a una membrana separará el ARN/ADN de las proteínas. Además, dado que estos métodos utilizan sondas para unirse a sus conjugados, los péptidos que pasan por el proceso generalmente no importan a menos que un péptido sea una RNasa o una DNasa, y solo si la enzima logra renaturalizarse, lo que no debería ocurrir si se siguen los protocolos adecuados. son seguidos. Una posible excepción podría ser cuando se trabaja con extremófilos de temperatura porque algunas enzimas de estos organismos pueden permanecer estables en circunstancias extraordinarias. [2]
Esta sustancia se puede preparar haciendo reaccionar carbonato de guanidinio con sulfato de amonio [3] [4] o tiocianato de amonio [5] bajo calor. Otro método es la pirólisis de tiocianato de amonio [6] o tiourea [7] a 180°C.