Un vibratomo es un instrumento que se utiliza para cortar rodajas finas de material (aunque, por lo general, rodajas más gruesas que las cortadas en muestras incluidas en parafina utilizando un microtomo ). Es similar a un microtomo pero utiliza una cuchilla vibratoria para cortar el tejido . Se puede controlar la amplitud de la vibración , la velocidad y el ángulo de la hoja. Se incluyen trozos de tejido fijo o fresco en agarosa a baja temperatura de gelificación . El bloque de agarosa resultante que contiene el trozo de tejido se une luego a un bloque de metal y se secciona mientras se sumerge en agua o en un baño tampón. Luego se recogen secciones individuales con un cepillo fino y se transfieren a portaobjetos o placas multipocillos para teñirlas. [1]
Vibratome no es un nombre genérico sino una marca registrada de Leica Biosystems Richmond, Inc. en EE. UU.
Ventajas
No es necesario deshidratar los tejidos antes de su inclusión, por lo que se reduce la pérdida de componentes celulares.
Permite la inclusión de tejido en agarosa para proporcionar estabilidad de corte.
No es necesario desparafinar ni rehidratar las secciones antes de la inmunotinción.
Sin altas temperaturas ni tratamientos químicos agresivos que puedan provocar la inestabilidad del antígeno.
No se requieren hojas de microtomo especiales
Menos posibilidades de que se produzcan artefactos causados por la inclusión en parafina o la congelación
Disminución de la autofluorescencia del tejido debido a que se evita la fijación con formalina y la inclusión en parafina.
Menos período de espera desde el muestreo de tejido hasta el momento del inmunomarcaje
Permite la creación directa de secciones flotantes para inmunohistoquímica.
Desventajas
En lugar de cintas, se cortan y recogen secciones individuales, que son más delicadas y difíciles de manipular.
Las secciones son generalmente más gruesas que las obtenidas con métodos de parafina; La penetración de anticuerpos y otros reactivos puede ser más lenta y, por tanto, pueden ser necesarios tiempos de incubación más prolongados. Además, puede resultar difícil obtener imágenes de secciones gruesas con el microscopio. (Sin embargo, las secciones gruesas son compatibles y, a veces, incluso deseables si se utiliza microscopía confocal).
Asegurar secciones de vibratomo a portaobjetos de vidrio puede resultar difícil o imposible debido al grosor de las secciones. [2]
Aplicaciones experimentales
Los vibratomos sirven para una multitud de aplicaciones experimentales en los campos de las ciencias biológicas y la histología.
Electrofisiología
Los vibratomos son fundamentales para crear secciones de tejido vivo, particularmente para estudios electrofisiológicos. Permiten la preparación de cortes cerebrales agudos a partir de muestras vivas, que son esenciales para técnicas como la electrofisiología con pinza de parche. Estos cortes facilitan el estudio en tiempo real de la actividad neuronal y las conexiones sinápticas. [3]
Inmunohistoquímica
Los vibratomos desempeñan un papel crucial en la investigación de tejidos fijos al proporcionar secciones de tejido precisas que son vitales para la inmunohistoquímica. Estas secciones se utilizan para visualizar y analizar biomarcadores, proteínas o estructuras celulares específicas dentro de los tejidos. [4]
Rebanadas de tejido cortadas con precisión
Los investigadores suelen utilizar vibratomos para crear cortes de tejido cortados con precisión, como cortes de pulmón cortados con precisión (PCLS). Los PCLS son valiosos en la investigación respiratoria, ya que permiten la investigación de la reactividad de las vías respiratorias, las respuestas inmunitarias y las pruebas de fármacos en entornos fisiológicamente relevantes. [5]
Cultivos de rebanadas organotípicas
Los vibratomos son esenciales para generar cultivos de cortes organotípicos. Estos cultivos mantienen la integridad de cortes de tejido vivo en condiciones controladas, lo que los hace ideales para estudiar el desarrollo de tejidos, circuitos neuronales y diversos procesos celulares. [6]
En el medio
Los vibratomos aparecen en muchos medios, aunque generalmente se fantasean en proporciones extravagantes. En la franquicia Metal Gear (principalmente en Metal Gear Rising: Revengeance ), muchos personajes utilizan "cuchillas de alta frecuencia", a saber, Gray Fox y Raiden . En la franquicia Star Wars , los vibratomos aparecen numerosas veces en forma de "Vibro-cuchillas".
Referencias
^ "Métodos mejorados para la preparación de cortes cerebrales agudos de animales adultos y ancianos" (PDF) . Archivado desde el original el 17 de julio de 2011 . Consultado el 1 de junio de 2009 .
^ http://www4.ncsu.edu/~rgfranks/FRANKS%20LAB%20PROTOCOLS/immuno%20histio%20chemistry/robertson%20vbratmimuno.doc [ enlace muerto permanente ]
^ Calza, K. (2011). "Sección de vibratomo para una mejor preservación de la citoarquitectura del órgano de Corti de los mamíferos". Revista de experimentos visualizados (52): 2793. doi :10.3791/2793. PMC 3197053 . PMID 21712798.
^ Stinson, Rebeca; Morice, Alyn; Sadofsky, Laura (2021). "El grosor de las rebanadas de pulmón cortadas con precisión (PCLS) tiene un impacto limitado en la viabilidad del tejido". Biología celular e inmunopatología de las vías respiratorias . vol. 58. págs. PA3703. doi : 10.1183/13993003.congress-2021.PA3703. S2CID 244673915.
^ Humpel, cristiano (2018). "Cultivos organotípicos de cortes de cerebro". Protocolos actuales en inmunología . 123 (1): e59. doi :10.1002/cpim.59. PMID 30311739. S2CID 52966761.
