La tétrada está formada por las cuatro esporas que se producen tras la meiosis de una levadura u otro Ascomycota, Chlamydomonas u otra alga, o de una planta. Después de que los progenitores haploides se aparean, producen diploides. En condiciones ambientales adecuadas, los diploides esporulan y experimentan meiosis. Los productos meióticos, las esporas, permanecen empaquetados en el cuerpo celular de los progenitores para producir la tétrada.
Si los dos padres tienen una mutación en dos genes diferentes, la tétrada puede segregar estos genes como el ditipo parental (PD), el ditipo no parental (NPD) o como el tetratipo (TT). [1]
El ditipo parental es un tipo de tétrada que contiene dos genotipos diferentes , ambos parentales. Disposición de esporas en ascomicetos que contiene solo las dos ascosporas de tipo no recombinante .
Un ditipo no parental (NPD) es una espora que contiene solo las dos ascosporas de tipo recombinante (suponiendo que hay dos loci segregantes). Un tipo de tétrada que contiene dos genotipos diferentes, ambos recombinantes.
Un tetratipo es una tétrada que contiene cuatro genotipos diferentes, dos parentales y dos recombinantes. Una disposición de esporas en ascomicetos que consta de dos esporas parentales y dos recombinantes indica un único entrecruzamiento entre dos loci ligados.
La relación entre los diferentes tipos de segregación que surgen después de la esporulación es una medida del vínculo entre los dos genes.
La disección de tétradas se ha convertido en una poderosa herramienta para los genetistas de levaduras y se utiliza junto con muchos procedimientos establecidos que utilizan la versatilidad de las levaduras como organismos modelo . El uso de técnicas modernas de microscopía y micromanipulación permite separar las cuatro esporas haploides de una tétrada de levadura y hacerlas germinar individualmente para formar colonias de esporas aisladas.
El análisis de tétradas se puede utilizar para confirmar si un fenotipo es causado por una mutación específica, la construcción de cepas y para investigar la interacción genética. Dado que la frecuencia de los tipos de segregación de tétradas está influenciada por la frecuencia de recombinación de los dos marcadores, los datos de segregación se pueden utilizar para calcular la distancia genética entre los marcadores si están cerca en el mismo cromosoma. Los análisis de tétradas también han contribuido a la detección y el estudio de los fenómenos de conversión genética y segregación postmeiótica. [2] Estos estudios han demostrado ser fundamentales para comprender el mecanismo de recombinación meiótica, que a su vez es clave para comprender la función adaptativa de la reproducción sexual. El uso de tétradas en el análisis genético de estructura fina se describe en los artículos Neurospora crassa y Gene conversion .
Se realizan cruces entre cepas de apareamiento haploides MATa y MATα , luego los diploides resultantes se transfieren a medios de esporulación para formar una tétrada que contiene cuatro esporas haploides. Luego, las tétradas se pueden preparar con zimoliasa u otra enzima para digerir la pared del asco. Luego, las esporas se separan con una aguja de micromanipulador y se depositan en posiciones separadas en una placa de Petri .
Tradicionalmente, la disección de tétradas tiene fama de "arte oscuro". [3] Sin embargo, desde entonces se han desarrollado instrumentos específicos para la disección de tétradas; los más avanzados permiten una separación fácil y semiautomatizada de las tétradas. La mayoría de los micromanipuladores utilizan una aguja de fibra de vidrio a la que se adhieren las esporas debido a la formación de un menisco de agua entre el agar y la aguja.