La tétrada son las cuatro esporas producidas después de la meiosis de una levadura u otra Ascomycota, Chlamydomonas u otra alga, o una planta. Después de que los padres haploides se aparean, producen diploides. En condiciones ambientales apropiadas, los diploides esporulan y sufren meiosis. Los productos meióticos, las esporas, permanecen empaquetados en el cuerpo celular parental para producir la tétrada.
Si los dos padres tienen una mutación en dos genes diferentes, la tétrada puede segregar estos genes como ditipo parental (PD), ditipo no parental (NPD) o tetratipo (TT). [1]
El ditipo parental es un tipo de tétrada que contiene dos genotipos diferentes , ambos parentales. Disposición de esporas en ascomicetos que contiene solo dos ascosporas de tipo no recombinante .
El ditipo no parental (NPD) es una espora que contiene solo dos ascosporas de tipo recombinante (suponiendo dos loci segregantes). Un tipo tétrada que contiene dos genotipos diferentes, ambos recombinantes.
El tetratipo es una tétrada que contiene cuatro genotipos diferentes, dos parentales y dos recombinantes. Una disposición de esporas en ascomicetos que consta de dos esporas parentales y dos recombinantes indica un cruce único entre dos loci vinculados.
La relación entre los diferentes tipos de segregación que surgen después de la esporulación es una medida del vínculo entre los dos genes.
La disección de tétrada se ha convertido en una herramienta poderosa para los genetistas de levaduras y se utiliza junto con muchos procedimientos establecidos que utilizan la versatilidad de las levaduras como organismos modelo . El uso de técnicas modernas de microscopía y micromanipulación permite separar y germinar individualmente las cuatro esporas haploides de una tétrada de levadura para formar colonias de esporas aisladas.
El análisis de tétrada se puede utilizar para confirmar si un fenotipo es causado por una mutación específica, la construcción de cepas y para investigar la interacción genética. Dado que la frecuencia de los tipos de segregación de tétrada está influenciada por la frecuencia de recombinación de los dos marcadores, los datos de segregación se pueden utilizar para calcular la distancia genética entre los marcadores si están cerca en el mismo cromosoma. Los análisis de tétradas también han contribuido a la detección y estudio de los fenómenos de conversión de genes y segregación posmeiótica. [2] Estos estudios han demostrado ser fundamentales para comprender el mecanismo de la recombinación meiótica, que a su vez es clave para comprender la función adaptativa de la reproducción sexual. El uso de tétradas en el análisis genético de estructura fina se describe en los artículos Neurospora crassa y Gene conversion .
Se realizan cruces entre cepas de apareamiento haploides MATa y MATα , luego los diploides resultantes se transfieren a medios de esporulación para formar una tétrada que contiene cuatro esporas haploides. Luego se pueden preparar tétradas con Zymolyase, u otra enzima, para digerir la pared del ascus. Luego, las esporas se separan con una aguja micromanipuladora y se depositan en posiciones separadas en una placa de Petri .
Tradicionalmente, la disección en tétrada tiene fama de "arte negro". [3] Sin embargo, desde entonces se han desarrollado instrumentos específicamente para la disección en tétrada; los más avanzados permiten una separación fácil y semiautomática de tétradas. La mayoría de micromanipuladores utilizan una aguja de fibra de vidrio a la que se adhieren las esporas debido a la formación de un menisco de agua entre el agar y la aguja.