Un anticuerpo fluorescente directo ( DFA o dFA ), también conocido como " inmunofluorescencia directa ", [1] es un anticuerpo que ha sido marcado en una prueba de anticuerpos fluorescentes directos . Su nombre deriva del hecho de que prueba directamente la presencia de un antígeno con el anticuerpo marcado , a diferencia del western blot , que utiliza un método indirecto de detección, donde el anticuerpo primario se une al antígeno objetivo, con un anticuerpo secundario dirigido contra el primario, y una etiqueta unida al anticuerpo secundario.
Existen kits comerciales de prueba de DFA que contienen anticuerpos marcados con fluorescencia , diseñados para atacar específicamente a antígenos únicos presentes en las bacterias o virus, pero no presentes en mamíferos ( eucariotas ). Esta técnica se puede utilizar para determinar rápidamente si un sujeto tiene una infección viral o bacteriana específica.
En el caso de los virus respiratorios, muchos de los cuales presentan síntomas generales similares, la detección se puede realizar utilizando muestras de lavado nasal del sujeto con la presunta infección. Aunque se pueden obtener células desprendidas en el tracto respiratorio, a menudo se trata de cantidades bajas, por lo que se puede adoptar un método alternativo en el que se puede exponer un cultivo celular compatible a muestras de lavado nasal infectadas, de modo que si el virus está presente se pueda cultivar hasta una cantidad mayor, lo que puede dar entonces una lectura positiva o negativa más clara.
Al igual que con todos los tipos de microscopía de fluorescencia , es necesario determinar la longitud de onda de absorción correcta para excitar la etiqueta fluorófora adherida al anticuerpo y detectar la fluorescencia emitida, que indica qué células son positivas para la presencia del virus o la bacteria que se está detectando.
La inmunofluorescencia directa puede utilizarse para detectar depósitos de inmunoglobulinas y proteínas del complemento en biopsias de piel, riñones y otros órganos. Su presencia es indicativa de una enfermedad autoinmune . Cuando se examina la piel no expuesta al sol, una IF directa positiva (la llamada prueba de la banda lúpica ) es una evidencia de lupus eritematoso sistémico . [2] El anticuerpo fluorescente directo también puede utilizarse para detectar infecciones parasitarias, como fue pionero por Sadun , et al. (1960).
