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Citocentrífuga

Ejemplo de una citocentrífuga

Una citocentrífuga , a veces denominada citocentrifugadora , [1] es una centrífuga especializada que se utiliza para concentrar células en muestras de líquido en un portaobjetos de microscopio para que puedan teñirse y examinarse. [2] Las citocentrífugas se utilizan en varias áreas del laboratorio clínico , como la citopatología , la hematología y la microbiología , así como en la investigación biológica. El método se puede utilizar en muchos tipos diferentes de muestras, incluidas las aspiraciones con aguja fina , el líquido cefalorraquídeo , el líquido seroso y sinovial y la orina . [3]

Procedimiento

Para preparar frotis de citocentrífuga, se coloca un embudo en la parte delantera de un portaobjetos de microscopio. La superficie del embudo que está en contacto con el portaobjetos se recubre con papel de filtro para absorber el exceso de líquido. Se colocan unas gotas de líquido en el embudo. El conjunto se coloca en la citocentrífuga, que funciona a baja fuerza (600–800 xg) para preservar la estructura celular. [4] La fuerza centrífuga empuja el líquido a través de la abertura del embudo y concentra las células en una pequeña zona del portaobjetos. El proceso de centrifugación concentra las células unas veinte veces [5] y crea una monocapa de una célula de espesor, lo que permite evaluar la morfología celular. A continuación, el portaobjetos se puede fijar y teñir. [6] [7]

Aplicaciones

Células de linfoma en líquido cefalorraquídeo, portaobjetos de citocentrífuga
Células de linfoma en el líquido cefalorraquídeo

Algunas aplicaciones de las citocentrífugas incluyen:

Limitaciones

El proceso de citocentrifugación puede hacer que las células se vean distorsionadas. Las células ubicadas en el centro del frotis pueden verse comprimidas en comparación con las células de la periferia. Los núcleos celulares pueden desarrollar hendiduras, lóbulos o agujeros artificiales [4] y el citoplasma puede verse vacuolado o desarrollar proyecciones irregulares. Los gránulos citoplasmáticos pueden ser empujados hacia la periferia de la célula. Si el recuento de células es alto, las células pueden distorsionarse debido al hacinamiento; por lo tanto, las muestras con recuentos de células altos se diluyen antes de la preparación del frotis. [10]

Historia

El examen de células en fluidos corporales se realizaba históricamente utilizando un hemocitómetro , una cámara diseñada para contar células microscópicamente. [11] Esta técnica estaba limitada por la mala discriminación entre tipos de células (las células solo podían clasificarse como mononucleares o polimorfonucleares) y el bajo número de células presentes en fluidos corporales no concentrados. Además, esta técnica no producía un registro permanente de la muestra. [10] En un artículo de 1966, Watson P. describió la primera citocentrífuga, llamándola "un aparato para concentrar células en suspensión sobre un portaobjetos de microscopio". [12] El dispositivo se vendió comercialmente en la década de 1970 y en 1983 fue patentado por Shandon (ahora Thermo Scientific ). A partir de 2012, existen numerosas marcas de citocentrífugas en el mercado. [8]

Referencias

  1. ^ McManus L, Mitchell R (1 de agosto de 2014). Patobiología de las enfermedades humanas: una enciclopedia dinámica de los mecanismos de las enfermedades. Elsevier Science. pág. 3365. ISBN 978-0-12-386457-4.
  2. ^ Turgeon ML (23 de marzo de 2015). Linné & Ringsrud's Clinical Laboratory Science: Concepts, Procedures, and Clinical Applications (7.ª ed.). Elsevier Mosby. pág. 146. ISBN 978-0-323-22545-8.
  3. ^ ab Stokes BO (2004). "Principios de la citocentrifugación". Medicina de laboratorio . 35 (7): 434–437. doi : 10.1309/FTT59GWKDWH69FB0 . ISSN  0007-5027.
  4. ^ abc Brunzel NA (5 de noviembre de 2016). "Capítulo 17: Análisis de fluidos corporales". Fundamentos del análisis de orina y fluidos corporales . Elsevier Health Sciences. págs. 356–58. ISBN 978-0-323-39636-3.
  5. ^ Galagan KA (2006). Atlas en color de fluidos corporales: una guía de campo ilustrada basada en pruebas de competencia. Colegio Americano de Patólogos . Págs. 13-14. ISBN. 978-0-930304-91-1.
  6. ^ Shambayati B (17 de febrero de 2011). Citopatología. OUP Oxford. p. 24. ISBN 978-0-19-953392-3.
  7. ^ Keohane EM, Smith L, Walenga JM (19 de febrero de 2015). Hematología de Rodak: principios clínicos y aplicaciones. Elsevier Health Sciences. págs. 270-1. ISBN 978-0-323-32716-9.
  8. ^ ab Gill G (19 de octubre de 2012). "Capítulo 6: Citocentrifugación". Citopreparación: principios y práctica . Springer Science & Business Media. págs. 73–84. ISBN 978-1-4614-4932-4.
  9. ^ Mahon CR, Lehman DC, Manuselis G (25 de marzo de 2014). Libro de texto de microbiología diagnóstica - Libro electrónico. Elsevier Health Sciences. pág. 129. ISBN 978-0-323-29262-7.
  10. ^ ab Harmening D (2009). "Capítulo 30: Examen de fluidos corporales: análisis cualitativo, cuantitativo y morfológico". Hematología clínica y fundamentos de la hemostasia (5.ª ed.). FA Davis Company. págs. 720–757. ISBN 978-0-8036-1732-2.
  11. ^ Vembadi A, Menachery A, Qasaimeh MA (2019). "Citometría celular: revisión y perspectiva sobre los avances biotecnológicos". Frontiers in Bioengineering and Biotechnology . 7 : 147. doi : 10.3389/fbioe.2019.00147 . PMC 6591278 . PMID  31275933. 
  12. ^ Watson P (septiembre de 1966). "Una centrífuga de portaobjetos: un aparato para concentrar células en suspensión sobre un portaobjetos de microscopio". The Journal of Laboratory and Clinical Medicine . 68 (3): 494–501. PMID  5922759.