La tinción supravital es un método de tinción utilizado en microscopía para examinar células vivas que han sido extraídas de un organismo. Se diferencia de la tinción intravital, que se realiza inyectando o introduciendo de otro modo el colorante en el cuerpo. Por tanto, una tinción supravital puede tener una mayor toxicidad , ya que sólo unas pocas células necesitan sobrevivir a ella durante un breve periodo de tiempo. El término " tinción vital " es utilizado por algunos autores para referirse específicamente a una tinción intravital, y por otros de forma intercambiable con una tinción supravital, siendo el concepto central el de que la célula que se examina todavía está viva. Como las células están vivas y no fijadas, fuera del cuerpo, las tinciones supravitales son de naturaleza temporal. [1] [2]
La tinción supravital más común se realiza en reticulocitos utilizando azul de metileno nuevo o azul de cresilo brillante , que permite ver el patrón reticulofilamentoso de los ribosomas precipitados característicamente en estos glóbulos rojos inmaduros vivos por las tinciones supravitales. Al contar el número de dichas células, se puede determinar la tasa de formación de glóbulos rojos, lo que proporciona una idea de la actividad de la médula ósea y la anemia . [3] Esto contrasta con la tinción vital , cuando el tinte empleado es uno que se excluye de las células vivas, de modo que solo las células muertas se tiñen positivamente. (Las tinciones vitales incluyen tintes como el azul tripán y el yoduro de propidio , que son demasiado voluminosos o demasiado cargados para atravesar la membrana celular, o que son bombeados rápidamente y de forma activa por las células vivas).
La tinción supravital se puede combinar con la tinción de anticuerpos de la superficie celular ( inmunofluorescencia ) para aplicaciones como el análisis FACS . [4] La inmunofluorescencia también se puede realizar dentro del interior de células vivas mediante permeabilización celular reversible utilizando el detergente Triton X-100 . Ajustado cuidadosamente a la concentración apropiada para el número de células, el pretratamiento puede permitir el acceso de moléculas entre 1 y 150 kilodaltons al interior de la célula. [5] Aunque los anticuerpos se pueden utilizar de forma similar en este contexto, el término "tinción supravital" se reserva normalmente para productos químicos más pequeños que poseen propiedades adecuadas intrínsecamente.
Colorantes supravitales para glóbulos rojos: [6]
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