El receptor 1 activado por proteinasa ( PAR1 ), también conocido como receptor 1 activado por proteasa , receptor del factor II de coagulación y receptor de trombina , es una proteína que en los seres humanos está codificada por el gen F2R . [5] PAR1 es un receptor acoplado a proteína G y uno de los cuatro receptores activados por proteasa que participan en la regulación de la respuesta trombótica . Altamente expresado en plaquetas y células endoteliales, PAR1 desempeña un papel clave en la mediación de la interacción entre la coagulación y la inflamación , lo cual es importante en la patogénesis de las enfermedades pulmonares inflamatorias y fibróticas. [6] También está involucrado tanto en la alteración como en el mantenimiento de la integridad de la barrera endotelial , a través de la interacción con la trombina o la proteína C activada , respectivamente. [7]
Estructura
PAR1 es un receptor acoplado a proteína G transmembrana (GPCR) que comparte gran parte de su estructura con los otros receptores activados por proteasas. [8] [9] Estas características incluyen tener siete hélices alfa transmembrana , cuatro bucles extracelulares y tres bucles intracelulares. [9] PAR1 contiene específicamente 425 residuos de aminoácidos dispuestos para la unión óptima de la trombina en su extremo N extracelular . El extremo C de PAR1 se encuentra en el lado intracelular de la membrana celular como parte de su cola citoplasmática. [8]
Vía de transducción de señales
Activación
La PAR1 se activa cuando los 41 aminoácidos terminales de su extremo N son escindidos por la trombina, una serina proteasa. [10] La trombina reconoce a la PAR1 por una secuencia de lisina-aspartato-prolina-arginina-serina en el extremo N, donde corta el enlace peptídico entre la arginina-41 y la serina-42. La afinidad de la trombina por este sitio de escisión específico en la PAR1 se ve favorecida además por interacciones secundarias entre el exositio de la trombina y una región ácida de residuos de aminoácidos ubicados en el extremo C de la Ser-42. [11] Esta escisión proteolítica es irreversible y el péptido suelto, a menudo denominado parstatina, se libera entonces fuera de la célula. [10] El extremo N recién revelado actúa como un ligando anclado que se une a una región de unión entre los bucles extracelulares 3 y 4 de la PAR1, activando así la proteína. La unión provoca cambios conformacionales en la proteína que en última instancia permiten la unión de las proteínas G a sitios en la región intracelular de PAR1. [12]
Señalización
Una vez escindido, PAR1 puede activar proteínas G que se unen a varias ubicaciones en sus bucles intracelulares. Por ejemplo, PAR1 junto con PAR4 puede acoplarse y activar la proteína G G 12/13 , que a su vez activa Rho y la quinasa Rho . [8] Esta vía conduce a la rápida alteración de la forma de las plaquetas debido a las contracciones de actina que conducen a la movilidad de las plaquetas, así como a la liberación de gránulos que son necesarios para la agregación plaquetaria . [8] El acoplamiento también puede ocurrir con G q , lo que conduce a la activación de la fosfolipasa C-β; esta vía da como resultado la estimulación de la proteína quinasa C (PKC) que afecta la activación plaquetaria. [8]
Además, tanto PAR1 como PAR4 pueden acoplarse a la proteína G q, que estimula el movimiento intracelular de iones de calcio que sirven como segundos mensajeros para la activación plaquetaria. [8] Esto también activa la proteína quinasa C, que estimula la agregación plaquetaria y, por lo tanto, la coagulación sanguínea más adelante en la vía. [11]
Terminación
La fosforilación de la cola citoplasmática de PAR1 y la posterior unión a la arrestina desacoplan la proteína de la señalización de la proteína G. [10] [11] Estos PAR1 fosforilados se transportan de vuelta a la célula a través de endosomas, donde se envían a los aparatos de Golgi. Los PAR1 escindidos se clasifican y se transportan a los lisosomas, donde se degradan. [11] Este proceso de internalización y degradación es necesario para la terminación de la señalización del receptor. [10]
Para recuperar la capacidad de respuesta a la trombina, es necesario reponer PAR1 en la superficie celular. El complejo adaptador AP2 une el PAR1 no escindido en la membrana celular a un motivo de tirosina en el extremo C intracelular, lo que estimula la endocitosis del PAR1 no activado. [13] Luego se almacena en vesículas recubiertas de clatrina dentro del citosol y, en última instancia, se protege de la proteólisis. Esto garantiza que haya un suministro constante de PAR1 no escindido que pueda circular hacia la membrana plasmática independientemente de la reproducción de PAR1, lo que vuelve a sensibilizar a la célula a la trombina y restablece la vía de transducción de señales. [14]
Ligandos
Agonistas
El descubrimiento de agonistas selectivos para PAR1 también ha sido un tema de interés para los investigadores. Se ha descubierto que un péptido sintético SFLLRN actúa como agonista de PAR1. El péptido SFLLRN imita los primeros seis residuos del ligando N-terminal anclado de PAR1 activado y se une al mismo sitio de unión en el segundo bucle extracelular. [15] Por lo tanto, incluso en ausencia de trombina, la unión de SFLLRN puede generar una respuesta de PAR1 escindido o no escindido. [16]
Antagonistas
Se han desarrollado antagonistas selectivos del receptor PAR1 para su uso como agentes anticoagulantes.
Vorapaxar , vendido bajo la marca Zontivity, es un fármaco antiplaquetario de primera clase utilizado en el tratamiento de enfermedades cardíacas en pacientes con antecedentes de ataques cardíacos y enfermedad arterial periférica . [17] Recientemente se ha demostrado que Vorapaxar atenúa la respuesta inflamatoria neutrofílica a Streptococcus pneumoniae al reducir los niveles de citocinas proinflamatorias como IL-1β y quimiocinas CXCL1 , CCL2 y CCL7 . [18] Vorapaxar inhibe PAR1 cuando la molécula se une a un bolsillo de unión entre el bucle extracelular 2 y 3 de PAR1 donde estabiliza la estructura de la proteína inactivada y evita el cambio a la conformación activa. [15]
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Enlaces externos
Resumen de toda la información estructural disponible en el PDB para UniProt : P25116 (Receptor 1 activado por proteinasa) en PDBe-KB .