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Reactivo de Folin-Ciocalteu

El reactivo de Folin-Ciocâlteu (FCR) o reactivo de fenol de Folin o reactivo de Folin-Denis , es una mezcla de fosfomolibdato y fosfotungstato que se utiliza para el ensayo colorimétrico in vitro de antioxidantes fenólicos y polifenólicos , también llamado método de equivalencia de ácido gálico (GAE). [1] Lleva el nombre de Otto Folin , Vintilă Ciocâlteu y Willey Glover Denis . El reactivo de Folin-Denis se prepara mezclando tungstato de sodio y ácido fosfomolíbdico en ácido fosfórico . El reactivo de Folin-Ciocalteu es solo una modificación del reactivo de Folin-Denis. La modificación consistió en la adición de sulfato de litio y bromo al reactivo fosfotúngstico-fosfomolíbdico. [2]

La absorbancia de diferentes concentraciones de tirosina reaccionada con el reactivo de Folin-Ciocalteu se detecta a 660 nm.

El reactivo no mide solo fenoles, sino que reaccionará con cualquier sustancia reductora. Por lo tanto, mide la capacidad reductora total de una muestra, no solo los compuestos fenólicos. Este reactivo es parte del ensayo de proteínas de Lowry y también reaccionará con algunos compuestos que contienen nitrógeno, como la hidroxilamina y la guanidina . [3] También se ha demostrado que el reactivo es reactivo con los tioles, muchas vitaminas, la base de nucleótidos guanina , las triosas gliceraldehído y dihidroxiacetona y algunos iones inorgánicos. La complejación del cobre aumenta la reactividad de los fenoles hacia este reactivo. [4]

Este reactivo es distinto del reactivo de Folin , que se utiliza para detectar aminas y compuestos que contienen azufre.

Un artículo de 1951 titulado "Medición de proteínas con el reactivo de fenol Folin" [5] fue el artículo más citado en el Science Citation Index de 1945-1988 , con 187.652 citas. [6]

Importancia fisiológica

Debido a que mide la capacidad antioxidante in vitro , el reactivo se ha utilizado para analizar alimentos y suplementos en la ciencia de los alimentos . La capacidad de absorción de radicales de oxígeno (ORAC) solía ser el estándar de la industria para la fuerza antioxidante de alimentos integrales, jugos y aditivos alimentarios. [7] [8] Las mediciones y clasificaciones anteriores del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos se retiraron en 2012 por ser biológicamente irrelevantes para la salud humana, haciendo referencia a la ausencia de evidencia fisiológica de que los polifenoles tengan propiedades antioxidantes in vivo . [9] En consecuencia, el método ORAC, derivado solo de experimentos in vitro , ya no se considera relevante para las dietas humanas o la biología .

El ensayo de capacidad antioxidante equivalente de Trolox , también basado en la presencia de polifenoles, es una medición alternativa in vitro de la capacidad antioxidante. [10]

Véase también

Referencias

  1. ^ Singleton, Vernon L.; Orthofer, Rudolf; Lamuela-Raventós, Rosa M. (1999). "[14] Análisis de fenoles totales y otros sustratos de oxidación y antioxidantes mediante el reactivo de folin-ciocalteu". [14] Análisis de fenoles totales y otros sustratos de oxidación y antioxidantes mediante el reactivo de folin-ciocalteu . Métodos en enzimología. Vol. 299. pp. 152–178. doi :10.1016/S0076-6879(99)99017-1. ISBN 9780121822002.S2CID83124453  .​
  2. ^ Bärlocher, Félix; Graça, Manuel AS (2020), Bärlocher, Felix; Gessner, Mark O.; Graça, Manuel AS (eds.), "Fenólicos totales", Métodos para estudiar la descomposición de la basura , Cham: Springer International Publishing, págs. 157-161, doi :10.1007/978-3-030-30515-4_18, ISBN 978-3-030-30514-7, S2CID  241534328 , consultado el 29 de septiembre de 2022
  3. ^ Ikawa M, Schaper TD, Dollard CA, Sasner JJ (2003). "Utilización del reactivo de fenol de Folin-Ciocalteu para la detección de ciertos compuestos de nitrógeno". J. Agric. Food Chem . 51 (7): 1811–5. doi :10.1021/jf021099r. PMID  12643635.
  4. ^ Everette, Jace D.; Bryant, Quinton M.; Green, Ashlee M.; Abbey, Yvonne A.; Wangila, Grant W.; Walker, Richard B. (2010). "Estudio exhaustivo de la reactividad de varias clases de compuestos hacia el reactivo de Folin−Ciocalteu". J. Agric. Food Chem. 58 (14): 8139–44. doi :10.1021/jf1005935. PMC 4075968 . PMID  20583841.  
  5. ^ Oliver H. Lowry; Nira J. Rosebrough; A. Lewis Farr; Rose J. Randall (1951). "Medición de proteínas con el reactivo Folin Phenol". J. Biol. Chem. 193 (1): 265–275. doi : 10.1016/S0021-9258(19)52451-6 . PMID  14907713.
  6. ^ "Los artículos más citados de todos los tiempos" (PDF) . Ensayos de un científico de la información . 13 : 45–56. 12 de febrero de 1990. Archivado desde el original (PDF) el 19 de febrero de 2018 . Consultado el 14 de agosto de 2010 .
  7. ^ Cao G, Alessio H, Cutler R (1993). "Ensayo de capacidad de absorción de radicales de oxígeno para antioxidantes" (PDF) . Free Radic Biol Med . 14 (3): 303–11. doi :10.1016/0891-5849(93)90027-R. PMID  8458588. Archivado desde el original el 24 de julio de 2018. Consultado el 12 de septiembre de 2019 .
  8. ^ Ou B, Hampsch-Woodill M, Prior R (2001). "Desarrollo y validación de un ensayo mejorado de capacidad de absorción de radicales de oxígeno utilizando fluoresceína como sonda fluorescente". J Agric Food Chem . 49 (10): 4619–26. doi :10.1021/jf010586o. PMID  11599998.
  9. ^ "Retirado: Capacidad de absorción de radicales de oxígeno (ORAC) de alimentos seleccionados, versión 2 (2010)". Departamento de Agricultura de los Estados Unidos, Servicio de Investigación Agrícola. 16 de mayo de 2012. Consultado el 13 de junio de 2012 .
  10. ^ Prior R, Wu X, Schaich K (2005). "Métodos estandarizados para la determinación de la capacidad antioxidante y los fenólicos en alimentos y suplementos dietéticos". J Agric Food Chem . 53 (10): 4290–302. doi :10.1021/jf0502698. PMID  15884874.

Enlaces externos