En histología , histopatología y patología clínica , el azul de Prusia de Perls es un método comúnmente utilizado para detectar la presencia de hierro en muestras de tejido o células. [1] : 235 [2] [3] [4] El azul de Prusia de Perls deriva su nombre del patólogo alemán Max Perls (1843-1881), quien describió la técnica en 1867. [2] El método no implica la aplicación de un tinte, sino que hace que el pigmento azul de Prusia se forme directamente dentro del tejido. [5] El método tiñe principalmente el hierro en estado férrico , que incluye ferritina y hemosiderina , en lugar de hierro en estado ferroso . [6]
El método de Perls se utiliza para indicar hierro "no hemo " en tejidos como la ferritina y la hemosiderina, [6] el procedimiento no tiñe el hierro que está unido a la porfirina formadora de hemo como la hemoglobina y la mioglobina . [2] La tinción es una tinción histoquímica importante que se utiliza para demostrar la distribución y la cantidad de depósitos de hierro en el tejido hepático, a menudo en forma de biopsia. [6] [7] El procedimiento de Perls se puede utilizar para identificar depósitos de hierro en exceso como depósitos de hemosiderina ( hemosiderosis ) y en condiciones como la hemocromatosis hereditaria . [8] El azul de Prusia de Perls se utiliza comúnmente en aspirados de médula ósea para indicar niveles de almacenamiento de hierro [4] y puede proporcionar evidencia confiable de deficiencia de hierro. [7]
Perls no publicó un procedimiento detallado, salvo indicar que se aplicó una solución diluida de ferrocianuro de potasio al tejido seguida de ácido clorhídrico . [2] Los depósitos de hierro férrico en el tejido (presentes principalmente como hierro férrico dentro de la proteína de almacenamiento ferritina ) reaccionan luego con el ferrocianuro soluble en la tinción para formar el pigmento azul de Prusia insoluble (una sustancia compleja de ferrocianuro férrico hidratado). Estos depósitos luego se pueden visualizar microscópicamente como depósitos azules o morados. [9]
Se han publicado muchos métodos para realizar la tinción azul de Prusia de Perls para el hierro, [2] Drury y Wallington (1980) dan un protocolo que utiliza una mezcla de 1 parte de ácido clorhídrico al 2% y 1 parte de ferrocianuro de potasio al 2% que se aplica a la sección durante 20 a 30 minutos seguido de un enjuague en agua destilada y la aplicación de una contratinción como eosina , safranina o rojo neutro . [5]
El ferrocianuro de potasio en la solución de tinción se combina con el hierro férrico formando el pigmento azul de Prusia. [5] [2] La adición de ácido clorhídrico aumenta la disponibilidad de hierro dentro del tejido para la reacción con el ferrocianuro de potasio. [2] La reacción química para la conversión de hierro a azul de Prusia se proporciona de la siguiente manera en Drury y Wallington [5] (1980):
4FeCl 3 + 3K 4 Fe(CN) 6 → Fe4[Fe(CN) 6 ] 3 + 12KCl
(hierro férrico) + (ferrocianuro de potasio) → (ferrocianuro férrico o azul de Prusia)