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Nucleasa microcócica

La nucleasa microcócica ( EC 3.1.31.1, S7 Nuclease , MNasa , endonucleasa del bazo , termonucleasa , nucleasa T , endonucleasa microcócica , nucleasa T' , nucleasa estafilocócica , fosfodiesterasa del bazo , nucleasa de Staphylococcus aureus , nucleasa B de Staphylococcus aureus , ribonucleato (desoxinucleato) 3'-nucleotidohidrolasa ) es una endoexonucleasa que digiere preferentemente ácidos nucleicos monocatenarios . La tasa de escisión es 30 veces mayor en el lado 5' de A o T que en G o C y da como resultado la producción de mononucleótidos y oligonucleótidos con fosfatos terminales 3' . La enzima también es activa contra ADN y ARN bicatenarios y todas las secuencias se escindirán en última instancia.

Características

La enzima tiene un peso molecular de 16,9 kDa.

El pH óptimo se informa como 9,2. La actividad enzimática depende estrictamente del Ca 2+ y el pH óptimo varía según la concentración de Ca 2+ . [1] Por lo tanto, la enzima se inactiva fácilmente con EGTA .

Fuentes

Esta enzima es la nucleasa extracelular de Staphylococcus aureus . Dos cepas, V8 y Foggi, producen enzimas casi idénticas. [2] Una fuente común son las células de E. coli que portan un gen nuc clonado que codifica la nucleasa extracelular de Staphylococcus aureus (nucleasa microcócica).

Estructura

La estructura tridimensional de la nucleasa microcócica (en aquel entonces denominada nucleasa estafilocócica) se resolvió muy temprano en la historia de la cristalografía de proteínas , en 1969, [3] depositada como el ahora obsoleto archivo 1SNS del Protein Data Bank . Hay estructuras cristalinas más recientes y de mayor resolución disponibles para la forma apo como el archivo 1SNO del Protein Data Bank: [1] y para la forma inhibida por timidina-difosfato como el archivo 3H6M del Protein Data Bank: [2] o 1SNC: [3]. Como se ve en el diagrama de cintas anterior, la molécula de nucleasa tiene 3 hélices alfa largas y una lámina beta de 5 cadenas en forma de barril , en una disposición conocida como pliegue OB (para pliegue de unión a oligonucleótidos) según la clasificación de la base de datos SCOP .

Aplicaciones

Véase también

Referencias

  1. ^ Heins JN, Suriano JR, Taniuchi H, Anfinsen CB (1967). "Caracterización de una nucleasa producida por Staphylococcus aureus". J. Biol. Chem . 242 (5): 1016–20. doi : 10.1016/S0021-9258(18)96225-3 . PMID  6020427.
  2. ^ Cusumano CL, Taniuchi H, Anfinsen CB (1968). "Nucleasa estafilocócica (cepa Foggi). I. Orden de fragmentos de bromuro de cianógeno y un "cuarto" residuo de histidina". J. Biol. Chem . 243 (18): 4769–77. doi : 10.1016/S0021-9258(18)93185-6 . PMID  5687719.
  3. ^ Arnone A, Bier J, et al. (1971). "Una estructura de alta resolución de un complejo inhibidor de la nucleasa extracelular de Staphylococcus aureus: I. Procedimientos experimentales y rastreo de cadenas". J. Biol. Chem . 246 (7): 2303–2316. doi : 10.1016/S0021-9258(19)77221-4 . PMID  5555571.

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