Neorickettsia risticii , anteriormente Ehrlichia risticii, es una bacteria gramnegativa intracelular obligada que normalmente vive como endosimbionte en gusanos planos parásitos, específicamente trematodos. [1] N. risticii es el conocido agente causante de la neorickettsiosis equina (también conocida como fiebre del caballo Potomac (PHF)), [2] que recibe su nombre de su descubrimiento cerca del río Potomac en Maryland y Virginia. [3] N. risticii se recuperó por primera vez de caballos en esta región en 1984, pero no fue reconocido como el agente causante de la FPH hasta 1979. [3] La fiebre del caballo Potomac es actualmente endémica en los Estados Unidos, pero también se ha informado con menor frecuencia. en otras regiones, incluidos Canadá, Brasil, Uruguay y Europa. [4] La FPH es una afección clínicamente importante para los caballos, ya que puede causar signos graves como fiebre, diarrea, cólicos y laminitis. [5] La PHF tiene una tasa de mortalidad de aproximadamente el 30%, lo que hace que esta afección sea una de las preocupaciones de los propietarios de caballos en regiones endémicas. [5] N. risticii generalmente se adquiere entre mediados y finales del verano cerca de arroyos o ríos de agua dulce, así como en pastos de regadío. [6] Esta es una infección estacional porque depende de la ingestión de un vector artrópodo, que se encuentra más comúnmente en los pastos durante los meses de verano. [7] Aunque N. risticii es un agente causante bien conocido de la FPH en caballos, también puede actuar como un patógeno potencial en perros y gatos. [8] No sólo se ha cultivado con éxito N. risticii a partir de monocitos de perros y gatos, [6] sino que los gatos han enfermado clínicamente después de una infección experimental con la bacteria. [9] Además,se ha aislado y cultivado N. risticii a partir de células de linfoma histiocítico humano. [6]
Neorickettsia risticii es miembro del Orden Rickettsiales y de la Familia Anaplasmataceae dentro de la Clase Alphaproteobacteria . [10] N. risticii son organismos intracelulares obligados [10] de monocitos/macrófagos equinos y epitelio intestinal glandular. [6] Los organismos individuales son aerobios gramnegativos pequeños, pleomórficos (cocoides a elipsoidales) que carecen de LPS y peptidoglicano en sus paredes celulares. [11] [12] Tienen dos formas celulares: una forma de cuerpo reticular que es grande y liviana, y una forma de tipo de cuerpo elemental más pequeña que es densa en electrones. [6] [12] [10] Pueden existir como células individuales o como mórulas (colonias similares en apariencia a las moras ) y replicarse en vacuolas parasitóforas mediante fisión binaria dentro de la célula huésped. [12] [10] La identificación se puede realizar basándose en el aislamiento del cultivo celular, la serología o el ensayo de PCR. [1] [6] [13] Sin embargo, N. risticii rara vez se identifica en monocitos de frotis de sangre periférica. [6] Los ensayos de PCR se pueden realizar en sangre y heces (identificación antemortem) o en tejidos frescos o fijados con formalina (identificación postmortem). [6] N. risticii se puede observar mediante microscopía óptica con una variedad de tinciones: las tinciones de Giemsa y Romanowsky marcarán las bacterias de color azul oscuro a púrpura, [12] Maquiavelo se tiñerá de rojo y la hematoxilina eosina (H&E) se tiñerá de azul pálido. [6]
El modo exacto de transmisión de N. risticii no ha sido determinado durante muchos años debido a su complejo ciclo de vida. N. risticii se transmite verticalmente dentro de un trematodo (trematodo), Acanthatrium oregonense , y la transmisión de N. risticii está estrechamente relacionada con el ciclo de vida de la trematoda. [14] [15] A medida que el trematodo se desarrolla y llega al siguiente huésped, N. risticii pasa al siguiente huésped junto con él. [15] El modo de transmisión propuesto involucra dos huéspedes intermediarios (un caracol acuático y un insecto acuático como las moscas caddis y las efímeras). [14] El huevo de la duela es ingerido por un caracol acuático. Luego, la forma cercaria del trematodo se desarrolla y emerge del caracol al medio ambiente. [14] La cercaria luego invade al segundo huésped intermedio, la etapa larvaria o ninfa de un insecto acuático. La cercaria se convierte en una metacercaria a medida que el insecto se convierte en adulto. [14] El insecto adulto luego es ingerido por un insectívoro como un murciélago o una golondrina. [14] [15] Se cree que los murciélagos y las golondrinas sirven como huéspedes definitivos para la duela y reservorios naturales de N. risticii . [14]
Se propone que los caballos puedan exponerse a N. risticii a través de dos vías. Los caballos pueden quedar expuestos a través de la penetración en la piel de una forma de cercaria infectada del trematodo. Esto se ve comúnmente cuando los caballos pastan cerca de fuentes de agua contaminadas. [16] Otra ruta de exposición es a través de la ingestión directa del segundo huésped intermediario, los insectos acuáticos, que contienen las metacercarias infectadas. [14]
Se propone que N. risticii sea una bacteria intracelular obligada que prefiere replicarse en monocitos del huésped. [17] Una vez fagocitado por el monocito, el patógeno previene la fusión lisosomal con el fagosoma, escapando así del mecanismo de defensa del huésped. [14] Una vez que N. risticii establece la infección dentro del huésped, los objetivos principales son las células epiteliales, los mastocitos y los macrófagos ubicados en el intestino grueso del huésped. [14] Las células epiteliales intestinales infectadas sufren un transporte deficiente de electrolitos y pérdida de microvellosidades, lo que contribuye a una menor absorción de electrolitos y una mayor pérdida de agua en el intestino grueso. [18] Por lo tanto, la diarrea es uno de los signos clínicos comunes de la neorickettsiosis equina.
Neorickettsia risticii es la causa infecciosa de la neorickettsiosis equina, o la coloquialmente denominada fiebre del caballo Potomac (PHF). [5] Esta enfermedad se adquiere cuando los caballos ingieren un huésped trematodo que está infectado con la bacteria. [5] Debido a la presencia del vector artrópodo, parece que esta enfermedad es motivo de preocupación en el verano, cuando el clima más cálido permite que estos vectores estén presentes en los pastos. [7] N. risticii puede permanecer dentro de estos trematodos durante sus etapas de desarrollo y también puede transmitirse a generaciones futuras a través de una ruta de transmisión transovárica . [11] Una vez infectado, el caballo no es contagioso para otros caballos, ya que la infección debe propagarse mediante la ingestión del huésped intermedio. [5]
Esta enfermedad puede provocar que los caballos tengan fiebre, experimenten diarrea líquida, muestren un comportamiento tranquilo y dejen de comer, lo que puede provocar cólicos y laminitis . [5] Las lesiones intestinales observadas previamente con la FPH incluyen enterocolitis pronunciada con erosiones ulcerativas y reducción evidente de las proyecciones de las vellosidades. [19] Las lesiones provocarán que el caballo tenga una enfermedad gastrointestinal grave y una capacidad reducida para absorber nutrientes. Las lesiones relacionadas con la presencia de bacterias en la sangre incluyen hepatitis, inflamación de los túbulos renales, pérdida del suministro de sangre arterial renal e inflamación de las glándulas suprarrenales. [19] También hay cambios en la sangre en respuesta a la infección, y la FPH temprana puede resultar en una reducción de los glóbulos blancos, incluidos niveles bajos de neutrófilos y linfocitos, mientras que la progresión de la FPH puede resultar en una respuesta inflamatoria y un aumento de los glóbulos blancos. [19] La replicación de N. risticii ocurre dentro del revestimiento epitelial de los intestinos y dentro de las células mieloides como macrófagos, monocitos y mastocitos. [11] La afección puede ser fatal en 3 de cada 10 caballos infectados, pero se ha demostrado que hasta 1/3 de los caballos infectados son asintomáticos, por lo que existe variabilidad en la presentación de la enfermedad. [5] Debido a los síntomas graves asociados con la enfermedad y la tasa de mortalidad, esta afección es motivo de preocupación para los propietarios de caballos.
Si una yegua preñada está infectada con N. risticii y presenta síntomas de FPH, existe la posibilidad de que cause aborto y lesiones en el feto. Se han realizado estudios en yeguas que fueron infectadas natural o artificialmente con N. risticii y experimentaron abortos. Los fetos tenían lesiones de inflamación del hígado, inflamación del corazón, enterocolitis e inflamación de los ganglios linfáticos mesentéricos. [20] El aborto parece ser una complicación notable de la FPH, como se demostró en un estudio que infectó a yeguas preñadas con N. risticii, lo que provocó abortos en poco más de la mitad de los sujetos. [20] Esta infección no causa inflamación de la placenta y las lesiones generalmente están ausentes en la placenta o son muy leves; sin embargo, causa lesiones en el feto mismo, lo cual es bastante único. [20] La FPH no es una causa bien documentada de aborto equino y, a menudo, no se elige como diagnóstico diferencial. [20] Sin embargo, se podría argumentar que N. risticii requiere más investigación en esta área y podría ser una causa más común de aborto equino de lo que se pensaba anteriormente.
El diagnóstico de la fiebre del caballo Potomac (PHF) se basa más comúnmente en técnicas serológicas y, por lo tanto, requiere la recolección de una muestra de sangre de un caballo infectado. Neorickettsia risticii se detecta en la sangre mediante una prueba de anticuerpos inmunofluorescentes indirectos (IFA) o mediante identificación por PCR . [21] La prueba serológica IFA detecta la presencia de anticuerpos IgG e IgM contra N. risticii en la sangre, sin embargo no diferencia si un animal está infectado activamente o ha tenido exposición previa. [22] El uso de IFA en un solo momento no proporciona un diagnóstico preciso y, por lo tanto, requiere pruebas de IFA en múltiples momentos para detectar títulos de anticuerpos crecientes. El aumento de los títulos de anticuerpos junto con los signos clínicos sugiere una infección activa por FPH. [22] Los ensayos de PCR se pueden realizar tanto en la sangre como en las heces de un animal infectado y permiten la detección de N. risticii en estas muestras. [4] La PCR es la prueba de elección en animales vacunados porque estos animales tendrán anticuerpos contra N. risticii, lo que interfiere con la prueba IFA. [22]
El aislamiento en cultivo celular también se puede utilizar para la detección y aislamiento de Neorickettsia risticii , aunque es una técnica que requiere más tiempo, requiere equipo especializado y no se utiliza de forma rutinaria como método de diagnóstico. [1] N. risticii es un microorganismo intracelular obligado y, como tal, es técnicamente más difícil de cultivar, aislar y enviar a un laboratorio de diagnóstico. [4] El aislamiento de cultivos celulares detecta la presencia de bacterias vivas y puede usarse para aislar bacterias de un animal infectado, el medio ambiente o un huésped parásito. [1] La variación de cepas entre los aislados se puede determinar identificando antígenos de superficie o realizando una secuenciación del genoma completo. [4] El análisis molecular de antígenos de superficie ha encontrado variaciones genéticas y fenotípicas significativas en cepas de N. risticii ; estas variaciones pueden contribuir a fallas en la vacunación. [23]
La principal presentación clínica de Neorickettsia risticii es la fiebre del caballo de Potomac (FPH). El diagnóstico y tratamiento oportunos de la FPH es importante para evitar que la enfermedad progrese y cause signos clínicos como laminitis, endotoxemia y cólicos. Prevenir con éxito esta progresión puede aumentar en gran medida las posibilidades de supervivencia de un caballo infectado. [24] El tratamiento de la FPH utiliza una combinación de terapia antimicrobiana y de apoyo. [25] Se ha descubierto que la oxitetraciclina es el tratamiento antimicrobiano más exitoso para la FPH y se ha correlacionado con un mayor tiempo de supervivencia. [24] Cuando el tratamiento se retrasa hasta después de la aparición de los signos clínicos, la terapia adicional con doxiciclina, demeclociclina o rifampicina se ha asociado con niveles de títulos de anticuerpos más altos que los de los animales no tratados. [26] Además del tratamiento antimicrobiano, también se debe utilizar terapia de apoyo para el manejo del dolor, la deshidratación y la función gastrointestinal para tratar la laminitis, la endotoxemia y los cólicos, respectivamente. La laminitis se puede tratar con una combinación de crioterapia y un opioide, como butorfanol o morfina. [27] Se puede administrar solución de Ringer lactato intravenoso para reponer líquidos y electrolitos y Flunixin Meglumine se puede utilizar para tratar los signos de cólico, los cuales pueden ayudar a compensar los signos de endotoxemia y prevenir el shock endotóxico. [4]
Actualmente hay dos tipos de vacunas disponibles para la fiebre del caballo Potomac. Una es una vacuna monovalente inactiva que protege únicamente contra la FPH y la otra es una vacuna multivalente inactiva que se combina con una vacuna contra la rabia. Existe cierta evidencia que demuestra que la vacuna multivalente contra la rabia y la FPH proporciona una menor inmunogenicidad en comparación con la vacuna monovalente contra la rabia cuando se administra con una vacuna contra la rabia separada. [28] Se ha informado que la eficacia de estas vacunas es bastante pobre debido al hecho de que contienen solo una de varias cepas de N. risticii, pero los estudios también han demostrado que los caballos vacunados que se infectan tienden a mostrar síntomas clínicos menos graves. signos en comparación con caballos no vacunados. [29] Se recomienda administrar las vacunas anualmente, pero los caballos en regiones endémicas pueden recibir una segunda dosis 3 a 4 semanas después de la vacuna inicial para ayudar a aumentar la eficacia. Las yeguas preñadas también deben recibir una vacuna adicional entre 4 y 6 semanas antes del parto. [30]