La estabilización térmica es una tecnología de conservación sin aditivos para muestras de tejido que detiene la degradación y los cambios de forma inmediata y permanente. La estabilización térmica utiliza un calentamiento conductivo rápido, bajo presión controlada, para generar una desnaturalización térmica rápida, homogénea e irreversible de las proteínas, lo que da como resultado una eliminación completa y permanente de toda la actividad enzimática que, de otro modo, causaría más cambios biológicos en la muestra de tejido ex vivo . Debido a la inactivación permanente de las enzimas, la estabilización térmica supera los inconvenientes de las técnicas de conservación de muestras de tejido convencionales, como la congelación rápida seguida de inhibidores. [1]
Comprender el papel de las proteínas , los péptidos y las moléculas pequeñas en el tejido normal y enfermo es crucial para definir su uso potencial como fármacos, dianas farmacológicas o biomarcadores de enfermedades . Sin embargo, los cambios biológicos comienzan en el momento en que el tejido se retira de su entorno nativo. Las alteraciones dramáticas a nivel molecular ocurren en cuestión de segundos, por ejemplo, el metabolismo cambia, la fragmentación catabólica de moléculas grandes (como el ATP ) ocurre para liberar energía, lo que lleva a mecanismos de control alterados, los estados de fosforilación se alteran y las proteínas comienzan a degradarse. Como consecuencia, la información vital puede perderse o distorsionarse, lo que lleva a una variación entre muestras, riesgo de interpretación incorrecta de los datos y conclusiones potencialmente engañosas. [2]
La estabilización térmica ofrece ventajas significativas sobre los enfoques convencionales para prevenir el cambio biológico. [3] Se puede utilizar para reemplazar la congelación rápida seguida de inhibidores, cambios de pH, solventes orgánicos o reticulación. También se puede utilizar con tejido congelado, lo que permite la estabilización de muestras almacenadas. La estabilización térmica se puede utilizar para casi cualquier tipo de muestra de tejido, y se ha verificado que es compatible con muchas técnicas analíticas posteriores, como espectrometría de masas , [4] fosfo-shotgun , [5] imágenes MALDI , [6] Western blot , [7] geles 1D y 2D , matrices de proteínas en fase inversa, [8] RIA y ELISA . El método también permite que las muestras recolectadas y manipuladas en laboratorios de nivel de bioseguridad se manipulen posteriormente fuera de dichos laboratorios después del tratamiento. [9]