El tiocianato de guanidinio (GTC) o isotiocianato de guanidinio ( GITC ) es un compuesto químico utilizado como desnaturalizante general de proteínas, siendo un agente caotrópico , aunque su uso más habitual es como protector de ácidos nucleicos en la extracción de ADN y ARN de las células. [1]
El GITC también puede reconocerse como tiocianato de guanidina . Esto se debe a que el guanidinio es el ácido conjugado de la guanidina y se denomina catión guanidinio , [CH 6 N 3 ] + .
El tiocianato de guanidinio se puede utilizar para desactivar un virus , como el virus de la gripe que causó la " gripe española " de 1918, para que pueda estudiarse de forma segura.
El tiocianato de guanidinio también se utiliza para lisar células y partículas virales en extracciones de ARN y ADN, donde su función, además de su acción lisante, es impedir la actividad de las enzimas ARNasa y ADNasa desnaturalizándolas, que de otro modo dañarían el extracto.
Un método de uso común es la extracción con tiocianato de guanidinio-fenol-cloroformo . No es estrictamente necesario utilizar fenol o cloroformo si se extrae ARN para el análisis Northern blot o ADN para el análisis Southern blot porque la electroforesis en gel seguida de la transferencia a una membrana separará el ARN/ADN de las proteínas. Además, dado que estos métodos utilizan sondas para unirse a sus conjugados, los péptidos que pasan por el proceso generalmente no importan a menos que un péptido sea una ARNasa o ADNasa, y solo si la enzima logra renaturalizarse, lo que no debería ocurrir si se siguen los protocolos adecuados. Una posible excepción podría ser cuando se trabaja con extremófilos de temperatura porque algunas enzimas de estos organismos pueden permanecer estables en circunstancias extraordinarias. [2]
Esta sustancia se puede preparar haciendo reaccionar el carbonato de guanidinio con sulfato de amonio [3] [4] o tiocianato de amonio [5] bajo calor. Otro método es la pirólisis del tiocianato de amonio [6] o la tiourea [7] a 180 °C.