La centrifugación de densidad flotante (también centrifugación isopícnica o centrifugación en gradiente de densidad de equilibrio ) utiliza el concepto de flotabilidad para separar moléculas en solución por sus diferencias de densidad.
Históricamente se utilizaba a menudo una solución de cloruro de cesio (CsCl), pero los gradientes de densidad más utilizados son la sacarosa o el Percoll . La muestra se coloca encima de la solución y luego el tubo se hace girar a muy alta velocidad durante un tiempo prolongado, que a veces dura días. Las moléculas de CsCl se vuelven densamente empaquetadas hacia el fondo, por lo que se forma un gradiente continuo de capas de diferentes densidades (y concentraciones de CsCl). Dado que la solución original tenía aproximadamente la misma densidad, llegan a un nivel en el que su densidad y la densidad de CsCl son iguales, en el que forman una banda nítida y distintiva.
Este método separa moléculas de forma muy nítida, y es tan nítido que incluso puede separar diferentes isótopos moleculares entre sí. [1]
La densidad de flotación de la mayoría del ADN es de 1,7 g/cm 3 [2], que es igual a la densidad de una solución de CsCl 6 M. [ cita requerida ] La densidad flotante del ADN cambia con su contenido de GC . El término " ADN satélite " se refiere a pequeñas bandas de secuencias de ADN repetitivas con una composición de bases distinta que flotan por encima (rico en A+T) o por debajo (rico en G+C) del componente principal del ADN.