La exhibición en levadura (o exhibición en superficie de levadura ) es una técnica de ingeniería de proteínas que utiliza la expresión de proteínas recombinantes incorporadas a la pared celular de la levadura . Este método se puede utilizar para varias aplicaciones, como aislar y diseñar anticuerpos [1] y determinar las interacciones entre el huésped y el microbio. [2]
La técnica de visualización de levadura fue publicada por primera vez por el laboratorio del profesor K. Dane Wittrup y Eric T. Boder. [3] La tecnología se vendió a Abbott Laboratories en 2001. [4]
Una proteína de interés se muestra como una fusión con la proteína Aga2p en la superficie de la levadura. La levadura utiliza la proteína Aga2p para mediar en los contactos entre células durante el apareamiento de las células de levadura. Como tal, la visualización de una proteína a través de Aga2p probablemente proyecta la proteína de fusión desde la superficie celular, minimizando las posibles interacciones con otras moléculas en la pared celular de la levadura [ cita necesaria ] . El uso de separación magnética y citometría de flujo junto con una biblioteca de presentación de levaduras puede ser un método muy eficaz para aislar ligandos proteicos de alta afinidad contra casi cualquier receptor mediante evolución dirigida . [ cita necesaria ]
Las ventajas de la presentación de levaduras sobre otros métodos de evolución in vitro incluyen la expresión eucariota y el procesamiento postraduccional, mecanismos de control de calidad de la vía secretora eucariota, efectos mínimos de avidez y detección cuantitativa de bibliotecas mediante clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) [ cita necesaria ] . Las levaduras son organismos eucariotas que permiten modificaciones postraduccionales complejas en las proteínas que ninguna otra biblioteca de visualización puede proporcionar [ cita necesaria ] .
Las desventajas incluyen tamaños de biblioteca de mutantes más pequeños en comparación con métodos alternativos y glicosilación diferencial en levaduras en comparación con células de mamíferos. Los métodos alternativos para la evolución de proteínas in vitro son la presentación en mamíferos, la presentación en fagos , la presentación en ribosomas , la presentación en bacterias y la presentación en ARNm [ cita requerida ] .