Los personajes que aparecen en son Wonder Woman, Batgirl, Supergirl, Harley Quinn, Hiedra Venenosa, Katana, y Bumblebee.

[3]​ Otros personajes que se incluyen son Hal Jordan, Barry Allen, Star Sapphire, Chico Bestia, Cheetah, Hawkgirl y Catwoman quienes también aparecen.

[4]​ Amanda Waller es presentada como la directora de la Super Hero High.

Muchos otros héroes y villanos de DC Comics aparecen en el fondo como cameos.

Las DC Super Hero Girls tiene una serie de cortos animados en YouTube y su sitio web, centradas en las jóvenes heroínas y villanas que asisten al Super Hero High.