La visualización en levadura (o visualización de la superficie de la levadura ) es una técnica de ingeniería de proteínas que utiliza la expresión de proteínas recombinantes incorporadas en la pared celular de la levadura . Este método se puede utilizar para varias aplicaciones, como el aislamiento y la ingeniería de anticuerpos [1] y la determinación de interacciones entre el huésped y el microbio. [2]
La técnica de visualización de levadura fue publicada por primera vez por el laboratorio del profesor K. Dane Wittrup y Eric T. Boder. [3] La tecnología fue vendida a Abbott Laboratories en 2001. [4]
Una proteína de interés se muestra como una fusión con la proteína Aga2p en la superficie de la levadura. La proteína Aga2p es utilizada por la levadura para mediar los contactos célula-célula durante el apareamiento celular de la levadura. Como tal, la visualización de una proteína a través de Aga2p probablemente proyecta la proteína de fusión desde la superficie celular, minimizando las interacciones potenciales con otras moléculas en la pared celular de la levadura [ cita requerida ] . El uso de separación magnética y citometría de flujo junto con una biblioteca de visualización de levadura puede ser un método altamente efectivo para aislar ligandos de proteínas de alta afinidad contra casi cualquier receptor a través de la evolución dirigida . [ cita requerida ]
Las ventajas de la visualización en levaduras sobre otros métodos de evolución in vitro incluyen la expresión eucariota y el procesamiento postraduccional, mecanismos de control de calidad de la vía secretora eucariota, efectos mínimos de avidez y detección cuantitativa de bibliotecas mediante clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) [ cita requerida ] . Las levaduras son organismos eucariotas que permiten modificaciones postraduccionales complejas de las proteínas que ninguna otra biblioteca de visualización puede proporcionar [ cita requerida ] .
Las desventajas incluyen tamaños de bibliotecas de mutantes más pequeños en comparación con los métodos alternativos y una glicosilación diferencial en levaduras en comparación con las células de mamíferos. Los métodos alternativos para la evolución de proteínas in vitro son la visualización en mamíferos, la visualización en fagos , la visualización en ribosomas , la visualización en bacterias y la visualización de ARNm [ cita requerida ] .