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Sefadex

Sephadex es un gel de dextrano reticulado que se utiliza para la filtración en gel . Fue lanzado por Pharmacia en 1959, después del trabajo de desarrollo de Jerker Porath y Per Flodin. [1] [2] El nombre se deriva de la separación dextrano de Pharmacia . Normalmente se fabrica en forma de perlas y se utiliza más comúnmente para columnas de filtración en gel . Al variar el grado de reticulación, se pueden alterar las propiedades de fraccionamiento del gel.

Estos medios de filtración en gel y cromatografía altamente especializados están compuestos de perlas macroscópicas derivadas sintéticamente del polisacárido dextrano. Las cadenas orgánicas están reticuladas para formar una red tridimensional que tiene grupos iónicos funcionales unidos por enlaces de éter a las unidades de glucosa de las cadenas de polisacárido.

Las formas disponibles incluyen intercambiadores de aniones y cationes, así como resinas de filtración en gel, con diferentes grados de porosidad; los tamaños de las perlas oscilan en rangos discretos entre 20 y 300 μm .

Sephadex también se utiliza para cromatografía de intercambio iónico. [3]

Sephadex está reticulado con epiclorhidrina . [4]

Aplicaciones

Sephadex se utiliza para separar moléculas por peso molecular. Sephadex es una alternativa más rápida a la diálisis (desalinización), ya que requiere un factor de dilución bajo (tan solo 1,4:1) y permite recuperar una actividad elevada. Sephadex también se utiliza para el intercambio de tampones y la eliminación de moléculas pequeñas durante la preparación de biomoléculas grandes, como anfolitos, detergentes, marcadores radiactivos o fluorescentes y fenol (durante la purificación del ADN).

Una forma especial de resina Sephadex hidroxipropilada [5] , denominada Sephadex LH-20, se utiliza para la separación y purificación de pequeñas moléculas orgánicas como esteroides, terpenoides y lípidos. Un ejemplo de uso es la purificación del colesterol. [6]

Fraccionamiento

Cromatografía de exclusión.

Rango de fraccionamiento [7] de proteínas globulares y dextranos (Da).

Cromatografía de intercambio iónico.

Véase también

Referencias

  1. ^ "De Sephadex a GE Healthcare". chemeurope.com . Archivado desde el original el 31 de julio de 2012. Consultado el 2 de enero de 2019 .
  2. ^ Porath, J; Flodin, P (1959). "Filtración en gel: un método para desalinizar y separar grupos". Nature . 183 (4676): 1657–1659. Bibcode :1959Natur.183.1657P. doi :10.1038/1831657a0. ISSN  1476-4687. PMID  13666849. S2CID  32287460.
  3. ^ "Medios de intercambio iónico Sephadex®" (PDF) . chembio.uoguelph.ca . Pharmacia Biotech.
  4. ^ "GE Healthcare Life Sciences - Instrucciones para medios Sephadex". .gelifesciences.com. Archivado desde el original el 18 de febrero de 2012. Consultado el 2 de diciembre de 2011 .
  5. ^ GE Healthcare. «Sephadex LH-20» . Consultado el 6 de diciembre de 2019 .
  6. ^ Hanukoglu I, Jefcoate CR (1980). "Separación de pregnenolona del colesterol utilizando minicolumnas Sephadex LH-20". Journal of Chromatography A . 190 (1): 256–262. doi :10.1016/S0021-9673(00)85545-4. ISSN  0021-9673.
  7. ^ "Instrucciones para medios Sephadex" (PDF) . gelifesciences.co.jp (manual del producto). GE Healthcare. 7 de abril de 2008 . Consultado el 2 de enero de 2019 .