Para la detección del colesterol se utiliza la prueba de Liebermann-Burchard o del anhídrido acético . La formación de un color verde o verde azulado después de unos minutos es positiva.
El reactivo de Lieberman-Burchard se utiliza en una prueba colorimétrica para detectar el colesterol y que da un color verde intenso. Este color comienza como un color violáceo, rosa y progresa hasta un color verde claro y luego a un color verde muy oscuro. El color se debe a que el grupo hidroxilo (-OH) del colesterol reacciona con los reactivos y aumenta la conjugación de la insaturación en el anillo fusionado adyacente. Dado que esta prueba utiliza anhídrido acético y ácido sulfúrico como reactivos , se debe tener cuidado para no recibir quemaduras graves.
Método: Disolver uno o dos cristales de colesterol en cloroformo seco en un tubo de ensayo seco . Añadir varias gotas de anhídrido acético y luego 2 gotas de H2SO4 concentrado y mezclar con cuidado. Una vez finalizada la reacción, se puede medir la concentración de colesterol mediante espectrofotometría .