La proteína fluorescente amarilla ( YFP ) es un mutante genético de la proteína fluorescente verde (GFP) derivada originalmente de la medusa Aequorea victoria . [1] Su pico de excitación es de 513 nm y su pico de emisión es de 527 nm. [2] Al igual que la GFP original, la YFP es una herramienta útil en biología celular y molecular porque los picos de excitación y emisión de la YFP se pueden distinguir de la GFP, lo que permite el estudio de múltiples procesos/proteínas dentro del mismo experimento.
Tres versiones mejoradas de YFP son Citrine, Venus e Ypet. Tienen una sensibilidad reducida al cloruro, una maduración más rápida y un brillo aumentado (definido como el producto del coeficiente de extinción y el rendimiento cuántico ). Por lo general, YFP sirve como aceptor para sensores FRET codificados genéticamente , de los cuales el FP donante más probable es la proteína fluorescente cian monomérica (mCFP). El desplazamiento al rojo en relación con GFP es causado por una interacción de apilamiento Pi-Pi como resultado de la sustitución T203Y introducida por mutación, que esencialmente aumenta la polarizabilidad del entorno cromóforo local , además de proporcionar densidad electrónica adicional al cromóforo.
"Venus" contiene una nueva sustitución de aminoácidos –F46L– que acelera la oxidación del cromóforo a 37°C, el paso limitante de la velocidad de maduración. La proteína tiene otras sustituciones (F64L/ M153T/ V163A/ S175G), lo que permite que Venus se pliegue bien y le otorga una tolerancia relativa a la acidosis y al Cl − . [3]
Se necesitaron cuatro mutaciones de la proteína GFP de tipo salvaje encontrada en la medusa Aequorea Victoria para crear el mutante YFP. La mutación más importante fue la sustitución de treonina por tirosina en la posición residual 203 [1] (la sustitución se denota por T203Y, donde T e Y representan el código de una sola letra para los aminoácidos treonina y tirosina, respectivamente).